鼻咽癌细胞株体外诱导同种异体T细胞TCR VβCDR3谱型和细胞毒性分析

目的 用鼻咽癌细胞株CNE2体外负载同种异体树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导T淋巴细胞,使之活化为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte,CTL),观察其体外特异性杀伤和克隆性增殖.方法 用GM-CSF,IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者外周血单核细胞,用CNE2负载,使之分化为成熟DC,流式细胞仪检测负载前后DC的表型特征.在IL-2的作用下,用负载CNE2抗原的DC诱导自身T细胞生成特异性CTL.乳酸脱氢酶释放法检测其特异性杀伤活性;采用免疫谱型分析技术分析T细胞的克隆性.结果 健康志愿者外周血单核细胞体外在GM-CSF,IL-4和TNF-α诱导下获得具有典型表型特征的成熟DC,其诱导的CTL对CNE2有明显的特异性杀伤作用;PBMC的TCR Vβ CDR3谱型呈高斯分布,而诱导后的T细胞部分家族出现优势表达.结论 负载鼻咽癌抗原的同种异体DC所诱导的CTL在体外对鼻咽癌细胞有特异性杀伤作用,优势表达的TCR Vβ CDR3家族对鼻咽癌治疗有潜在的临床应用价值.     

经尿道前列腺电切除（TURP）术前术后的护理干预

目的通过对经尿道前列腺电切除术（简称TURP）的手术前后的护理进行干预，为预防和控制并发症及手术恢复过程起到积极的作用。方法采取健康数育的方法，干预手术前后对疾病的认知、饮食、心理、和行为的护理全过程。结果增强了病人对手术的安全感、舒适感和信任感，缩短了病程。结论术前消除了紧张、恐惧心理，术后减少了出血，改善了生活质量，提高了治愈率。     

不同浓度舒芬太尼用于妇科病人术后镇痛的临床观察

目的探讨舒芬太尼用于妇科病人术后静脉镇痛的理想浓度。方法选择90例ASAⅠ-Ⅱ的妇科病人,随机分为3组(S1、S2、S3),每组30例。舒芬太尼浓度为S1组0.5μg/ml,S2组0.75μg/ml,S3组1μg/ml。分别于术后0~6h、6~12h、12~18h、18~24h、24~48h进行疼痛、镇静评分,记录血氧饱和度、心率、呼吸频率,PCA按压的例数及有无不良反应。结果3组间的血氧饱和度、心率、呼吸频率无统计学差异(P>0.05)。S2、S3组与S1组相比镇痛效果有统计学差异(P<0.05),而S2与S3组比较镇痛效果无统计学差异(P>0.05),3组均未见严重不良反应。结论0.75ug/ml的舒芬太尼是用于妇科病人术后静脉镇痛的理想浓度。     

Jurkat细胞TCR基因重排对 BV CDR3的影响

目的探讨Jurkat细胞TCRBD2-BJ2基因重排对TCRβ链可变区互补决定区3（BV CDR3）可能产生的影响，为深入研究TCR基因重排奠定实验基础。方法RT-PCR扩增TCR BV26个亚家族CDR3区，结合TCR基因扫描（GeneScan）和基因测序技术，监测Jurkat细胞在增殖传代过程中以及在T细胞激活剂和超抗原SEA等刺激诱导后TCR BV CDR3谱系漂移及长度和序列变化。结果表达TCR BV8家族的单克隆细胞株Jurkat，在增殖传代过程中，以及经刺激诱导48或72h后，未监测到有TCR BV8以外的新的BV亚家族出现，BV8 CDR3长度和一级核苷酸序列也未发生变化。结论Jurkat细胞发生的TCR基因重排可能不引起TCR BV CDR3改变，因而对TCR BV CDR3区抗原识别特异性（即抗原特异性漂移）并未产生影响，但并不排除TCR发生改变的可能性。     

系统性红斑狼疮患者外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移和序列鉴定

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移，为SLE的免疫应答机制和个性化治疗研究提供基础。方法 采用免疫扫描谱型分析技术，分析5例正常献血员的CDR3分布特征及5例SLE患者PBMC中T细胞TCRβ链CDR3的优势利用情况，对克隆性增生T细胞的CDR3区进行序列分析。结果 5例正常献血员PBMC TCR BV CDR3谱型均呈高斯分布，5例活动型SLE患者24TCR BV CDR3家族均出现不同的优势表达。对单／寡克隆性增生T细胞B链CDR3区基因进行测序，证实存在不同的CDR3序列。结论 SLE活动期外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系出现明显漂移，提示CDR3的选择性表达可能与SLE的免疫发病机理有关。特异应答的T细胞TCRCDR3序列的确定，将为SLE的发病机制研究和个性化治疗提供新的方法与手段。     

多手指离断再植术后的观察与护理

多手指离断是指两个以上手指同时离断的损伤症状。由于各种原因 ,临床上多手指同时离断的患者越来越多。我科自2 0 0 1年 6月至 2 0 0 2年 7月为 8例多手指离断患者实施了再植术 ,再植成功率为 92 .3 % ,就此将术后观察与护理体会报告如下。临床资料本组共 8例 ,男 6例 ,女 2例 ,年龄为 3～ 5 1岁。指别 :拇指2个 ,食指 9个 ,中指 8个 ,环指 5个 ,小指 2个。伤因 :切割性离断 5例 ,压榨性离断 2例 ,旋转撕脱性离断 1例。共 2 6指 ,再植成活 2 4指。护　　理1.心理护理 :再植病人一般多为意外事故所致 ,对突如其来的多个手指离断 ,加上肉体上…     

T细胞受体二次重排的基础与临床

重组激活基因(RAG)能被诱导再次表达引起T细胞受体(TCR)二次重排,进而在TCR库的形成和丰富中发挥重要作用.二次重排发生于外周者称为受体修正(receptor revision),发生于中枢者则称为受体编辑(receptor editing).研究发现,TCR编辑/修正可存在于肿瘤、感染、移植及自身免疫等疾病状态下,且与疾病发生有密切联系.目前,国内外已有学者利用动物模型或人类细胞研究TCR编辑/修正,并对其机制进行了初步探索.     

人白血病细胞株重组激活基因表达及T细胞受体基因重排的检测

背景：淋巴细胞特异性重组激活基因编码的重组激活基因1与重组激活基因2蛋白是参与V（D）J重排机制的重要的重组酶。除参与V（D）J重排以外，近年的研究结果表明重组激活基因介导的转位作用可能与染色体易位及淋巴性恶性肿瘤的发生有关，但迄今尚未有明确定论。目的：检测重组激活基因、DNA修复因子Ku70／Ku80和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达以及T细胞受体基因重排在人白血病和淋巴癌细胞株的发生情况。设计：重复测量实验。单位：南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所。材料：T淋巴白血病细胞株Jurkat和6T-CEM购自上海细胞生物研究所；T淋巴白血病细胞株Molt-4，皮肤T细胞淋巴癌细胞株HuT102，Burkitt’s淋巴癌细胞株Raji和Daudi以及原髓细胞白血病细胞株HL-60和慢性髓原白血病细胞株K562均由本实验室保存。细胞用含有体积分数0．1胎牛血清的RPMI1640培养基于37℃，体积分数0．05C02条件下培养。方法：实验于2005-10／2006-01在南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所完成。采用反转录聚合酶链反应检测重组激活基因1，重组激活基因2，非同源末端连接装置途径中的DNA修复因子Ku70／Ku80。以及末端脱氧核苷转移酶mRNA表达；采用巢式、半巢式聚合酶链反应、连接介导的聚合酶链反应等方法检测T细胞受体重排删除DNA环和T细胞受体B链重组信号序列两端的断裂点。了解参与V（D）J重排过程的基因表达和T细胞受体基因重排中间体的产生情况。主耍观察指标：重组激活基因、DNA修复因子Ku70／Ku80和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达以及T细胞受体基因重排在人白血病和淋巴癌细胞株的发生情况。结果：反转录聚合酶链反应检测结果显示：重组激活基因1mRNA在4种T细胞株中均被检测到，在两种B细胞株和两种髓性白血病细胞株中未检测到；重组激活基因2和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达仅在Jurkat，Molt-4和6T-CEM3种T细胞株中检测到，但在6T-CEM表达较弱；除HL-60细胞未检测到Ku80表达外，所有细胞株均检测到Ku70和Ku80表达。对4种T细胞株T细胞受体重排中间体检测结果表明：仅在Jurkat细胞中检测到DB2-J132 sjTRECs与DB25’端和3’Rss断点，表明Jurkat细胞发生T细胞受体基因重排。同时发现Jurkat TCR Dβ2-Jβ2重排删除环结合区具有明显的多样性特征。结论：重组激活基因可能与T细胞白血病具有更为密切的关系。Jurkat细胞有可能成为研究重组激活基因与T细胞淋巴性肿瘤的一个潜在的细胞模型。     

尿毒症胆囊切除术护理体会

胆石症是一种常见病多发病,最有效的治疗方法是手术根治,行胆囊切除术,而尿毒症肾性高血压患者患胆石症,施行手术风险大,危险性高。我科2008．6．20收治一名尿毒症肾性高血压患者,伴急性胆囊炎胆石症,并成功实施手术,术后恢复顺利,痊愈出院,继续治疗原有的尿毒症,现将护理体会报道如下。     

监测TCR CDR3漂移的免疫扫描谱型分析技术的建立与鉴定

外周血95％ T淋巴细胞的TCR由α（胚系基因中AV、AJ、AC重排）、β（胚系基因中的BV、BD、BJ、BC重排）两条多肽链组成，不同V（D）J重排后，由V基因末端、J基因前端和V-J（或V—D和D—J）连接时中间插入的核苷酸序列，分别组成了特异的TCRα和8的CDR3基因谱型的多样性。一种CDR3序列代表一个T细胞克隆，测定特定CDR3序列出现的频率可以反映特定T细胞克隆扩增的程度和功能状态。