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61.
目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤组织中的表达及意义。方法构建人上皮性卵巢癌3AO裸鼠皮下移植瘤模型;设阴性对照组及早、中、晚期3个肿瘤组,应用免疫组化方法及流式细胞术(FCM)检测正常组织及移植瘤卵巢癌组织中cyclinD1的表达。结果 3AO卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型平均成瘤率91.7%。正常组织cyclinD1表达阴性或弱阳性,而卵巢癌组织中cyclinD1呈过表达(54.63%)。早、中、晚期卵巢癌组织中cyclinD1阳性表达率分别是35.00%、55.60%和73.30%,肿瘤细胞凋亡率分别是7.97%、3.45%及1.83%,Mean值分别是23.15、37.31、63.28。结论 cyclinD1在卵巢癌组织中呈过表达,且其表达与移植瘤生长增殖呈正相关,cyclinD1的表达与卵巢癌发生发展关系密切。 相似文献
62.
目的 观察急性髓性白血病(AML)患者外周血Notch信号相关基因的表达变化,并探讨其临床意义.方法 初诊AML患者30例(初诊组)、完全缓解AML患者30例(缓解组)、健康体检者24例(正常组),采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测其外周血Notch1 mRNA、Delta4 mRNA、Jagged2 mRNA、HES1 mRNA.结果 与正常组比较,初诊组Notch1 mRNA、De1ta4 mRNA、Jagged2 mRNA、HES1 mRNA表达水平升高(P均<0.05),缓解组HES1 mRNA表达水平亦升高(P<0.05).结论 AML患者外周血Notch信号相关基因表达水平高于正常体检者,外周血Notch信号相关基因检测有助于AML的诊断. 相似文献
63.
小剂量金喜素与顺铂、VP16及5-FU对人卵巢癌细胞株生长抑制作用的实验研究 总被引:4,自引:1,他引:4
目的 :探讨小剂量国产盐酸拓扑替康 (金喜素 )与顺铂 (cDDP)、足叶乙甙(VP16 )及 5 -氟尿嘧啶 (5 -FU)对人卵巢癌细胞株 3AO细胞生长抑制的作用。方法 :采用MTT法观察上述药物单用及联合使用对 3AO细胞生长的影响 ,并评价药物的联合作用。结果 :相当于临床用药浓度的金喜素 (80 0ng/ml)及其半量浓度 (40 0ng/ml)与cDDP、5 -FU或VP16联合应用对 3AO细胞具有显著的协同生长抑制作用 ,较各药单用组抑制率显著提高。半量金喜素联用即可达到全量联用时的抑制效果。结论 :小剂量金喜素与cDDP、5-FU或VP16具有协同抑制 3AO细胞生长的作用 ,可为临床小剂量应用提供参考 相似文献
64.
逆转录病毒载体介导双自杀基因治疗肝细胞肝癌的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
我们将 2种最重要的自杀基因TK与CD基因整合在一起 ,以脂质体和逆转录病毒为载体 ,介导转入肝癌细胞HCC 990 3[1] ,最大限度地消除肿瘤细胞对治疗药物的耐药性 ;同时 ,降低前药的毒副作用。1 材料与方法 :质粒pWZLneoCDglyTK、pWZLneoTK由澳大利亚布里斯班皇家医院基因治疗中心惠赠。HCC 990 3肝癌细胞系由本课题组建立。CD与TK基因转染PA317包装细胞和肝癌细胞系HCC 990 3,脂质体介导的CD与TK基因转染PA317包装细胞。测定逆转录病毒滴度 ,逆转录病毒转染HCC 990 3细胞 ,RT PCR测… 相似文献
65.
脂质体介导转染的绿色荧光蛋白基因在骨髓基质细胞内的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究脂质体转染法对骨髓基质细胞进行基因修饰的可行性。方法在体外分离和扩增大鼠骨髓基质细胞,用脂质体转染法介导绿色荧光蛋白基因进入到骨髓基质细胞内,荧光显微镜下检测荧光蛋白的表达,台盼兰排斥试验检测转染细胞的活力。结果绿色荧光蛋白可以在大鼠骨髓基质细胞内表达,转染效率为(28.9±3.6)%;脂质体法转染后的细胞活力为(93.6±4.8)%。结论脂质体转染法可以介导外源基因进入到骨髓基质细胞内表达。 相似文献
66.
目的 研究染料木黄酮(genistein)在人小细胞肺癌H446细胞系中的抗肿瘤作用并探讨其分子机制.方法 以不同浓度genistein(10、25、50、75、100.μmol/L)处理H446细胞,采用CCK-8法、流式细胞术、质粒转染、Western blotting及Real-time PCR等技术检测genistein对细胞增殖、凋亡、细胞周期分布以及FoxM1及其下游靶基因表达的影响.结果 genistein引起H446细胞发生药物浓度相关性增殖抑制、凋亡增加及G2/M期细胞周期阻滞(P<0.05),此过程伴随FoxM1及其靶基因survivin、cyclinB、cdc25B的表达降低(P<0.05),而FoxM1过表达可部分拮抗genistein的抗肿瘤增殖作用(P<0.05).结论 genistein可通过诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞抑制H446细胞的增殖,而抑制FoxM1通路是其在小细胞肺癌中发挥抗肿瘤作用的机制之一. 相似文献
67.
目的:探讨Delta4基因在Notch传导机制中的作用。方法:构建pTracer.CMV.Delta4.FLAG载体,瞬时转染COS7细胞、稳定转染CHO细胞,筛选高表达Delta4的稳定CHO细胞系。用Luciferase分析,观察并比较Delta4对Notch1—CHO及Notch2-CHO两个宿主细胞的信号功能活性,与Deha1、Jagged1及Jagged2比较,从而对此基因定性并获知其信号功能活性水平。结果:Western—blot证实pTracer.CMV.Delta4.FLAG可瞬时转染COS7细胞及稳定转染CHO细胞,并根据Delta4蛋白表达条带的强弱筛选高表达Delta4-CHO细胞系。Delta4对Notch1及Notch2均具有信号功能活性,且对后者的活性功能水平大于前者。对Notch1,Delta4的功能活性略低于Jagged2,但高于Deha1及Jagged1;对Notch2,Delta4的功能活性低于Delta1、Jagged1及Jagged2,但亦具有较强的活性水平。结论:建立的Delta4-CHO细胞系功能稳定,Delta4为Notch1及Notch2的配体,且对Notch2的活性水平高于Notch1。 相似文献
68.
奥曲肽紫杉醇偶联物靶向治疗小细胞肺癌的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的合成奥曲肽紫杉醇偶联物(paclitaxel-octreotide conjugates),探讨偶联物对人小细胞肺癌(SCLC)细胞株H446的细胞毒性和靶向性。方法合成分离并纯化奥曲肽紫杉醇偶联物PTX-OCT、2PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT和2PTX-Tyr-OCT,实时定量PCR法检测人SCLC细胞株H446及人成纤维细胞中生长抑素受体(SSTR)的表达,四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色(MTT)法检测不同浓度和时间梯度的偶联药物对H446及人成纤维细胞的抑制率,流式细胞术检测1000nmol/L紫杉醇、PTX-OCT、2PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT和2PTX-Tyr-OCT作用后H446细胞周期和凋亡率的变化。结果 H446细胞中SSTR1~5 mRNA均有较高量的表达,而人成纤维细胞中未检测到SSTR mRNA的表达。奥曲肽紫杉醇偶联物对H446细胞的杀伤作用与紫杉醇相似,具有浓度(1~1000 nmol/L)和时间(24、48、72h)依赖性;而对SSTR阴性的成纤维细胞,偶联药物的毒性作用要明显低于紫杉醇(P<0.05)。流式细胞术分析PTX-OCT、2PTX-OCT、PTX-Tyr-OCT和2PTX-Tyr-OCT作用后,H446细胞周期均停滞在G2/M期。结论奥曲肽紫杉醇偶联药物具有较好的靶向性,在SCLC的治疗中具有重要的应用前景。 相似文献
69.
目的:研究冠状动脉分流(CABG)术后冠状动脉竞争血流对左乳房内动脉(LIMA)桥血流中内皮素(ET)、一氧化氮(NO)含量的影响,探讨动脉桥血管早期衰坏的分子机制。方法:建立猪CABG术后桥血管竞争血流动物模型,利用血流闭塞器造成冠状动脉不同程度狭窄,测量桥血管血流量及方向变化,并采用放射免疫分析法及硝酸还原酶法分别检测LIMA桥血流中ET、NO含量并进行对比分析。结果:冠状动脉左前降支(LAD)近端狭窄程度越轻,LIMA桥血流量越少;LAD近端未完全闭塞时,LIMA桥均出现双向血流。CABG术后LIMA桥血流ET含量明显高于移植前(P<0.05),NO含量明显低于移植前(P<0.05)。LAD近端冠脉竞争血流越大,LIMA桥血流NO含量越低。LIMA桥血流NO含量与LIMA桥血流量呈正相关(r=0.957,P<0.05)。LAD近端30%狭窄时,NO含量明显低于LAD近端90%狭窄及全部闭塞时(P<0.05),LAD近端50%狭窄时,NO含量明显低于LAD近端全部闭塞时(P<0.05)。LIMA桥血流ET含量有随LAD近端冠脉竞争血流增加而升高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:来自未完全闭塞冠状动脉的竞争血流可引起LIMA桥血流量下降,产生双向血流,并导致桥血流中NO含量显著下降。 相似文献
70.
联合应用胸苷激酶基因和胞嘧啶脱氨酶基因对MCF-7细胞的杀伤作用 总被引:1,自引:2,他引:1
目的研究双自杀基因(胞嘧啶脱氨酶基因CD和胸苷激酶基因HSV-tk)的应用对乳腺癌细胞的杀伤作用和旁观者效应。方法脂质体法将CD和HSV-tk双自杀基因转染入PA317细胞,用其病毒上清转染乳腺癌细胞MCF-7,G418筛选出阳性细胞MCF-7/CD tk,然后加入不同浓度的5-氟胞嘧啶(5-Fc)或/和丙氧鸟苷(GCV),MTT法观察其杀伤作用;将不同比例的MCF-7/CD tk和MCF-7细胞混合,联合应用5-Fc和GCV杀伤,观察其旁观者效应。结果单独应用5-Fc或GCV均能对MCF一7/CD tk细胞产生明显的杀伤效应,联合应用可以在较小的剂量下产生更大的杀伤作用;当阳性细胞比例达到20%时即可对半数混合细胞产生杀伤作用。结论双自杀基因的应用对乳腺癌细胞具有明显的杀伤作用.其旁观者效应明显。 相似文献