β-磷酸甘油诱导体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞的钙化

目的:研究β磷酸甘油对体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞的钙化作用。方法:采用组织块培养法体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞。细胞分为钙化组和正常组。钙化组加入10mmol/Lβ磷酸甘油,0.1μmol/L胰岛素及50μg/L维生素C（钙化培养基）诱导细胞钙化,继续培养14d。茜素红S染色观察钙结节计数并测定细胞钙沉积含量。采用四唑盐比色法（MTT）测量细胞增殖。结果:钙化组钙结节计数为（7.4±3.8）%,较正常组（4.3±1.9）%显著增加（P<0.05）;细胞钙沉积含量为（5.4±0.4）mmol/g蛋白,较正常组（1.2±0.5）mmol/g蛋白显著增加（P<0.05）。MTT检测细胞增殖,钙化组细胞增殖为0.071±0.011,较正常组0.040±0.009明显增加（P<0.01）。结论:β磷酸甘油能诱导体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞的钙化,钙化能促进平滑肌细胞的增殖。     

后凸成形术对老年多椎体骨质疏松压缩骨折的选择治疗21例观察

[目的]探讨依据术前MRI检查结果对老年多椎体骨质疏松压缩骨折行选择性椎体后凸成形术的疗效.[方法]自2003年6月～2006年12月老年多椎体骨质疏松压缩骨折21例57椎,采用根据术前MRI信号改变判断疼痛性椎体和陈旧骨折椎体,行选择性球囊扩张后凸成形术的治疗方法.对疼痛性椎体采用正常球囊扩张压力和足量骨水泥充填;对陈旧性骨折椎体采用较低球囊扩张压力和少量骨水泥充填,不追求恢复椎体高度.观察术后症状改善、骨折复位情况及有无并发症发生.[结果]21例手术均顺利完成,术后24 h内疼痛均明显缓解.椎体前缘、中部、后缘平均高度术前分别为(1.7±0.9)cm,(1.7±0.7)cm,(2.5±0.9)cm,术后分别为(2.2±0.4)cm,(2.4±0.6)cm,(2.6±0.3)cm,椎体前缘、中部平均高度手术前后差异有统计学意义(P＜0.01).Cobb's角由术前33.7°±10.9°矫正至术后25.9°±9.3°,手术前后差异有统计学意义(P＜0.01).术后平均随访26.3个月,患者疼痛症状均较术前明显改善或消失,未出现严重并发症.[结论]依据术前MRI结果对多椎体压缩骨折采用选择性后凸成形术治疗,临床效果满意,能够缩短手术时间、减少手术并发症、减少射线损害和手术费用,更适于老年多椎体骨质疏松压缩骨折的治疗.     

人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区基因的克隆和序列分析

人破骨细胞生成抑制因子（ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ，ＯＣＩＦ）或骨保护素（ｏｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｎｉｎ，ＯＰＧ），是在１９９７年，分别由两个不同的研究小组通过纯化人胚胎肺纤维母细胞ＩＭＲ－９０条件培养基和测序胎鼠小肠ＣＤＮＡ文库时发现，并根据其具有降低破骨细胞分化和增加骨密度的功能而命名［１，２］。ＤＮＡ测序分析证明，ＯＣＩＦ与ＯＰＧ由同一基因编码［３］。ＯＰＧ／ＯＣＩＦ可抑制破骨细胞分化的最终阶段，抑制成熟破骨细胞的活性并诱导其凋亡，提示ＯＰＧ／Ｏ…     

辛伐他汀对PTHrP诱导的破骨细胞性骨吸收及小鼠颅盖骨代谢的影响

[目的]探讨辛伐他汀对体外甲状旁腺素相关肽（PTHrP）诱导小鼠的破骨细胞骨吸收功能的作用及其小鼠骨代谢的影响。[方法]采用PTHrP诱导小鼠骨髓细胞培养破骨细胞和小鼠颅盖骨培养体系，检测辛伐他汀作用8d后破骨细胞骨吸收陷窝和培养上清钙的变化；检测小鼠颅盖骨培养上清碱性磷酸酶和钙含量，组织学观察小鼠颅盖骨形态学变化。[结果]辛伐他汀体外可明显抑制PTHrP诱导小鼠的破骨细胞骨吸收陷窝的形成及培养上清钙的释放，辛伐他汀体外可增强小鼠颅盖骨培养上清碱性磷酸酶的活性，组织学观察到辛伐他汀使小鼠颅盖骨矿化增强。[结论]辛伐他汀体外不仅可促进小鼠颅盖骨的成骨活性，并且可明显抑制PTHrP诱导小鼠的破骨细胞骨吸收功能，对骨吸收性疾病有着重要的防治作用。     

破骨细胞分化因子胞外区的克隆表达与纯化

目的　破骨细胞分化因子的克隆 ,重组蛋白的表达及纯化。方法　自 1g死胎肝组织中提取总RNA ,反转录cDNA后作为模板 ,设计上下游引物 ,多聚酶链反应 (PCR)扩增出目的片段。将PCR产物克隆至组氨酸标签的融合蛋白表达载体 pProEXTM HTc ,并送测序。在异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导下 ,可以稳定表达出破骨细胞分化因子胞外区蛋白 ,用镍离子交换柱纯化该蛋白。结果　逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR )扩增出特异的目的条带 ,75 0bp大小。测序结果完全正确。诱导后可以表达重组蛋白 ,相对分子质量为 3 2× 10 3 。结论　RT PCR可以简便的扩增目的基因。重组破骨细胞分化因子蛋白可以通过大肠杆菌原核表达载体诱导表达得到。     

先天性脊柱侧凸合并椎管内占位的诊断和治疗

目的 :探讨先天性脊柱侧凸合并椎管内占位的发病率、临床表现、影像学特征及手术治疗效果。方法 :回顾性分析2007年1月~2016年6月于西京医院骨科接受手术治疗的495例先天性脊柱侧凸患者的临床资料,其中7例合并椎管内占位。男5例,女2例;年龄11~31岁,平均19.14±7.52岁。MRI检查示7例全部位于胸段椎管内。5例位于髓内,1例位于髓外硬膜内,1例髓内及髓外硬膜内均有侵及。根据患者临床表现及影像学特征,诊断为先天性脊柱侧凸合并椎管内占位。7例患者均行一期后路脊柱侧凸矫形及椎管内占位切除术。随访观察治疗效果,疗效评价指标包括侧凸矫正率、手术并发症、椎管内占位复发情况。结果:术后随访27~99个月,平均49.7±32.9个月。先天性脊柱侧凸合并椎管内占位患者占本单位先天性脊柱侧凸患者的1.41%。术前行MRI检查,椎管内占位均准确定位;4例定性诊断与术后病理诊断一致。7例均行术后病理学检查,示畸胎瘤2例,表皮样囊肿2例,皮样囊肿1例,支气管源性囊肿1例,毛细胞型星形细胞瘤1例。术后冠状面主弯矫正率(55.05±18.75)%,术后矢状面主弯矫正率为(41.53±19.43)%。末次随访未见明显矫形丢失。术后有1例患者出现暂时性神经损害,半年后恢复;1例患者术后出现脑脊液漏,引流7d后治愈。1例患者于术后5年随访时发现椎管内占位复发,再次行椎管内占位切除术。结论:先天性脊柱侧凸合并椎管内占位发病率低;临床表现、影像学检查及病理学检查对其诊断均有重要价值。一期手术治疗先天性脊柱侧凸合并椎管内占位是安全有效的。     

辛伐他汀对PTHrP诱导破骨细胞形成及小鼠颅盖骨代谢的影响

目的:探讨辛伐他汀对体外甲状旁腺素相关肽(PTHrP)诱导小鼠的破骨细胞骨吸收功能的作用及其小鼠骨代谢的影响。方法:采用PTHrP诱导小鼠骨髓细胞培养破骨细胞和小鼠颅盖骨培养体系,检测辛伐他汀作用8d后破细胞骨数目和培养上清钙的变化;检测小鼠颅盖骨培养上清碱性磷酸酶和钙含量,组织学观察小鼠颅盖骨形态学变化。结果:辛伐他汀体外可明显抑制PTHrP诱导小鼠的破骨细胞骨吸收陷窝的形成及培养上清钙的释放,辛伐他汀体外可增强小鼠颅盖骨培养上清碱性磷酸酶的活性,组织学观察到辛伐他汀使小鼠颅盖骨矿化增强。结论:辛伐他汀体外不仅可促进小鼠颅盖骨的成骨活性,并且可明显抑制PTHrP诱导小鼠的破骨细胞骨吸收功能,对骨吸收性疾病有着重要的防治作用。     

维生素D3和华法令诱导的大鼠动脉钙化模型特点

目的探讨维生素D3联合华法令对大鼠动脉钙化的作用,为心血管疾病的康复预防措施介入提供基础研究数据.方法实验选用12只4周龄雄性SD大鼠,随机分为钙化组和正常组,每组6只.钙化组给予皮下注射维生素D3 3×105 U/(kg·d),持续3 d,同时华法令15 mg/(100g·12 h),持续4 d,制备大鼠动脉钙化模型.取腹主动脉制成石蜡切片von Kossa染色观察动脉钙化情况,同时取胸主动脉按RT-PCR方法检测骨保护素的表达,另取右侧胫骨测量骨密度.结果钙化组大鼠主动脉yon Kossa染色见中膜有成片或局灶黑色深染区域,为主动脉的钙化部位.正常组主动脉壁骨保护素mRNA相对含量[(45.6±0.6)%]明显高于钙化组[(24.6±0.4)%](P＜0.05).正常组大鼠胫骨骨密度[(0.108±0.032)g/cm2]高于钙化组[(0.082±0.038)g/cm2],但差异无显著性意义(P＞0.05).结论华法令和维生素D3能诱导大鼠主动脉中膜钙化,钙化的主动脉局部骨保护素的表达水平降低.     

人 BMP2和 OPG共表达真核载体的构建与骨质疏松基因治疗相关性的研究

Boneisadynamictissue，thelevelofbonemassreflectsthebalanceofboneformationandresorption，whichinvolvesthecoor－dinateregulationofbone－formingcells（osteoblasts）andbone－resorbingcell（osteoclasts）．Avarietyoflocalgrowthfactorsandcytokinesaswellassystemicpeptideandsteroidhormonesregulatethedifferentiationofimmatureprecursorcellsandtheactivityofmaturecellsinboththeosteoblasticandtheosteoclasticlineage，suchasbonemorphogeneticprotein－２（BMP－２）andosteoprotegenin（OPG）犤１犦．Inaddition，…     

半椎体后方结构的形态分析

[目的]研究半椎体后方结构的形态变异.[方法]运用Mimics软件观察2008年9月～2010年4月西京医院脊柱外科收治的34例含有半椎体的先天性脊柱畸形患者的脊柱三维CT图像.分析半椎体后方结构的形态及其与前方椎体和邻椎的空间关系.[结果]34例患者共有53个半椎体.其中颈段2个,胸段37个,腰段14个.半椎体后方结构的形态有以下几种类型:(1)单椎弓根半椎板型33个;(2)单椎弓根双椎板型5个;(3)双椎弓根双椎板型9个;(4)错配型5个;(5)无后方结构型1个.半椎体椎板与邻椎椎板全分节36个、部分分节14个、未分节2个.16个半椎体椎板的分节情况与前方椎体不一致.[结论]半椎体的后方结构形态存在变异,了解这些变异有助于判断其形成机制、预测其自然史、完善治疗方案并保证手术的顺利实施.