巨细胞病毒即刻早期及晚期基因片段的检测

自巨细胞病毒ＡＤ１６９株感染细胞中提取的ＤＮＡ，应用聚合酶反应技术，在自行设计及合成的两对特异性引物引导下，成功地扩增出ＨＣＭＶ即刻早期及晚期基因片段，模索了最佳Ｔａｑ酶、Ｍｇ＾２＋浓度及退火温度的反应条件，并建立了同一体系中同时检测ＨＣＭＶＩＥ及Ｌ基因片段的方法。     

用聚合酶链反应技术检测冠状动脉粥样硬化斑块组织中人巨细胞病毒DNA

用聚合酶链反应技术检测冠状动脉粥样硬化斑块组织中人巨细胞病毒ＤＮＡ舒先红陈瑞珍杨英珍近年来，动脉粥样硬化的病毒病因学作用日益受到人们的重视。有研究表明人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）在动脉粥样硬化发生发展中起重要作用。本研究利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测...     

扩张型心肌病中嗜铬粒蛋白A的表达及其与心肌纤维化的关系

目的 观察嗜铬粒蛋白A(chromogranin A,CGA)在扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)患者中的表达、心肌纤维化程度及二者间的关系,初步探讨CGA在心肌纤维化进程中的作用.方法 取DCM心脏移植患者的心肌组织标本作为研究对象,排除心脏疾病的脑外伤尸检心肌组织标本作为对照.利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测心肌中CGA及Ⅰ型胶原纤维(COL Ⅰ)、Ⅲ型胶原纤维(COL Ⅲ)、ADAMTS-1的mRNA表达,并分析其基因学相关性.免疫组织化学技术鉴定心肌中CGA的分布位置及其表达强弱变化.运用苦味酸天狼猩红特异染色和偏振光显微镜显像,并辅以图像分析软件计算心肌胶原容积积分(CVF).并对CGA与心肌纤维化的相关性进行形态学上的比较.结果 real-time PCR证实心肌中CGA-mRNA和COL Ⅰ-mRNA、COLⅢ-mRNA、ADAMTS-1-mRNA三者均具有相关性,相关系数分别为0.729、0.95、0.665.免疫组织化学结果表明,DCM患者心肌中CGA表达增加(P<0.05).DCM患者心肌CVF高于正常心肌(P<0.001).形态学上,CGA呈现阳性的部位及其分布密集区域的附近,心肌纤维化明显.结论 DCM心肌中CGA的表达与心肌纤维化具有相关性,推测DCM患者心肌组织中CGA的表达水平影响着心肌纤维化的发展.     

急诊栓塞治疗产后大出血产妇的护理

目的:总结产后大出血产妇急诊栓塞止血治疗的护理方法。方法:对2010年1月~2012年2月我院收治的34例继发性出血产妇进行急诊栓塞治疗,并根据治疗进行护理。结果:34例产妇阴道出血量明显减少,无病例需要进行子宫切除,无严重并发症或感染情况。4例产妇有臀部疼痛,经过护理后,疼痛有所缓解。结论:采取子宫动脉内栓塞治疗继发性出血产妇效果明显,对产妇进行护理干预,有利于减少并发症的发生,值得在临床上推广使用。     

妇产科护理中感染的相关因素分析

目的:对妇产科护理中的感染问题进行分析,提高患者对该疾病的认识,并更好地配合治疗。方法:对我院2010年~2012年收治的264例妇产科患者进行回顾性分析,所有患者按照《医院感染诊断标准》进行诊断,并对诊断结果进行分析。结果:妇科手术144例患者中感染30例,感染的主要原因包括呼吸道、泌尿系统、胃肠道。产科手术120例患者中感染20例,感染的主要原因包括切口出现感染、呼吸道感染。另外,感染情况会随着患者年龄增大而出现升高趋势。结论:医护人员必须要多与患者进行沟通,及时掌握患者的状态和需求,并对患者的实际情况进行护理,尽量避免感染现象的发生。     

microRNA在柯萨奇B3病毒诱导的心肌微血管内皮细胞凋亡中的差异表达

目的本研究通过体外培养心脏微血管内皮细胞(CMVECs),经柯萨奇B3病毒(CVB3)感染后,利用miRNA寡核苷酸基因芯片技术筛选差异表达的miRNAs,进一步探讨miRNA在CVB3诱导CMVECs凋亡中的潜在作用机制。方法原代分离培养大鼠CMVECs细胞,以100TCID50CVB3病毒感染48 h后检测Caspase-3活性和细胞凋亡;提取CMVECs细胞RNA,用Agilent大鼠miRNA寡核苷酸基因芯片进行检测,并通过TargetScan、miranda、mirbase和mirdb数据库选取出差异表达明显并与心血管疾病相关的miRNA,经qPCR对其进行验证,通过生物信息学分析预测其调控靶基因;合成miRNA21 mimics转染CMVECs细胞,同时合成miRNA21 inhibitor,与CVB3共转染CMVECs细胞,检测各组细胞Caspase-3活性变化和细胞凋亡。结果 CVB3感染CMVECs细胞48 h后与正常对照组比较Caspase-3活性显著上调(P<0.01),细胞凋亡明显增加;通过基因芯片检测及生物信息学分析后发现,与心血管系统疾病密切相关的miRNA为miRNA21,经qPCR验证结果一致,预测其靶基因为PDCD4;miRNA21mimics转染CMVECs细胞后与正常对照组相比Caspase-3活性显著上调,细胞凋亡增加(P<0.05);而miRNA21 inhibitor与CVB3共转染CMVECs细胞后与CVB3感染组相比Caspase-3活性显著下调,细胞凋亡明显减少(P<0.05)。结论 miRNA21在CVB3感染的CMVECs细胞中的表达有显著变化,并与CMVECs细胞凋亡密切相关,提示miRNA21在CVB3诱导的病毒性心肌炎发病过程中可能起着重要作用。     

全外显子组测序发现一家族性扩张型心肌病致病基因

 目的 对一扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy, DCM)家系行全基因组外显子测序以寻找该家系的致病基因。方法 收集在复旦大学附属中山医院就诊的1位DCM患者及其家系成员的临床资料,采集相关家系成员外周血并抽提DNA,对该家系5名成员行全基因组外显子测序,寻找致病基因,用Sanger测序对家系其他成员进行验证。结果 通过对家系患者与正常人测序结果比对分析,同时经过多个生物数据库数据过滤,发现LMNA基因6号外显子上存在的杂合突变 c.961 C>T (p.Arg321Ter)为该家系的可能致病基因突变。LMNA c.961 C>T无义突变导致LMNA编码蛋白质过程提前终止,相应蛋白质功能异常,进而导致该家系中此突变基因的携带者出现心功能异常。结论 本研究应用全基因组外显子测序从一DCM家系中发现其致病基因及突变位点:LMNA c.961 C>T (p.Arg321Ter),突变导致该家系相关成员心功能异常。此位点在汉族人群中尚属首次报道。     

病毒性心肌炎心内膜心肌活检组织中多种病毒基因检测的初 …

目的 在病毒性心肌炎心内膜心肌活检中组织中同时检测肠道病毒（ＥＶｓ）、腺病毒（ＡＤＶ）、人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）、单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ－１）以及Ｅ－Ｂ病毒（ＥＢＶ）的存在。方法 利用ＰＣＲ技术检测８例病毒笥民炎患者心内膜心肌活检组织中多种病毒基因片段。结果 ６例病理学检查证实为心肌炎的标本中，３例肠道师毒ＲＮＡ阳性，２例ＡＤＶ阳性，其中１例二者均阳性；２例病理学不支持心肌炎者中，１例ＥＢ阳性。     

扩张型心肌病的细胞骨架蛋白异常表达及与肠道病毒的关系

目的 :旨在明确扩张型心肌病 (DCM)心肌细胞骨架蛋白的异常表达情况及与肠道病毒 (EV)感染的关系。方法 :对 1 1例DCM患者应用PCR及RT PCR方法检测心肌EVRNA ,免疫荧光间接法检测心肌细胞骨架蛋白dystrophin及α /δ /γsarcoglycan、β dystroglycan。结果 :1 1例DCM中有dystrophin异常 2例 ,β dystroglycan、α sarcogly can、δ sarcoglycan、γ sarcoglycan异常各 1例 (其中 β dystroglycan与δ sarcoglycan同时受累 1例 )。细胞骨架蛋白dys trophin、β dystroglycan、sarcoglycans(α 、δ 、γ )在DCM病变心肌中表达明显降低和 (或)发生崩解 ,但在 2例正常心肌组织中均表达正常。DCM心肌内EVRNA的阳性率高达45 .5 % ( 5 /1 1 ) ,其中 2例dystrophin异常者均为EVRNA阳性。但β dystroglycan与α /δ /γ sarcoglycan异常者EVRNA为阴性。 结论 :DCM衰竭心肌中有多处细胞骨架蛋白的异常表达 ,并可能与EV感染有关     

中重度阿尔茨海默病患者的综合护理体会

阿尔茨海默病(Alzheimer S disease,AD)是由于大脑器质性病变所致的一种智力损害综合征,好发于老年人,临床表现为进行性智力衰退、记忆和认知障碍、视觉空间辨认缺失及精神症状等.目前AD尚无有效治疗方法,随着病程进展,患者失去自理能力,加之现代生活节奏加快,患者家属缺乏护理常识,家庭照料难以全面,有可能发生家居安全意外,给患者家庭造成沉重的心理负担,渴求专业护理.