恶性血液病细胞核因子κB活化及其机制研究进展

核因子kappa B(NF-κB)在炎症反应、免疫应答、胚胎发育、细胞增殖与凋亡、细胞周期调控以及肿瘤的发生与发展中起着非常重要的作用。近几年的研究显示，NF-κB与恶性血液病如白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤的发生关系密切。目前，恶性血液病细胞NF-κB的活化及其机制的研究已日益受到人们的关注，本文就近几年此方面的有关进展作简要的综述。     

IFN-α及其联合GMCSF对CML患者骨髓细胞凋亡相关基因表达的影响

目的 :探讨IFN α及IFN α联合GM CSF调节慢性期慢性粒细胞白血病 (CML CP)患者骨髓单个核细胞(MNCs) bcr abl,bcl 2 和 c myc基因表达的影响。方法 :淋巴细胞分离液离心富集 14例CML CP患者骨髓MNCs,经干扰素 α(IFN α)及IFN α联合粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)培养 2 4h后 ,采用相对定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)及扩增片段光密度扫描分析bcr abl,bcl 2 ,c myc及β actin 基因表达水平 ,配对t检验统计分析组间差异。结果 :IFN α(2 0 0U·ml-1)及IFN α(2 0 0U·ml-1)联合GM CSF(10ng·ml-1)均显著抑制bcr abl基因表达 ;IFN α部分抑制 c myc及 bcl 2 基因表达 ;GM CSF在IFN α作用的基础上部分促进 bcr abl及 c myc基因表达和显著抑制 bcl 2 基因表达。结论 :IFN α及IFN α联合GM CSF均可抑制抗凋亡基因bcr abl和bcl 2基因表达 ,并调节c myc基因表达水平。通过促进细胞凋亡而抑制恶性克隆增长是IFN α或IFN α联合GM CSF治疗CML的可能作用机制。     

蛇毒试剂检测血小板聚集功能的临床应用

蛇毒试剂检测血小板聚集功能的临床应用湖南医科大学附属湘雅医院血液病研究室（４１０００８）解勤之，陈方平，曹萍血小板聚集诱导剂是检测血小板功能的试剂之一。我室从１９９１年５月～１９９３年５月使用广州蛇毒研究所生产的蛇毒试剂（ＰｌａｔｅｌｅｔＡｇｇｒｅｇ...     

预激方案CAG治疗老年初治急性髓性细胞白血病的疗效

目的:评价含粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)的CAG方案治疗老年初治急性髓性细胞白血病(AML)的疗效及不良反应.方法:75例老年初治AML分为CAG预激治疗组及常规方案化疗组,34例患者予以CAG预激方案治疗,41例患者予以常规吡柔比星 阿糖胞苷(TA)或高三尖杉脂碱 阿糖胞苷(HA)方案化疗,所有患者在第1疗程后间歇14 d左右进行第2个疗程.结果:CAG预激治疗组2疗程完全缓解率为67.6%,总有效率达到82.4%,而常规化疗组2疗程的完全缓解率仅为39.0%,总有效率为56.1%;有预后差染色体核型的患者化疗疗效差,CAG预激治疗组的3年无病生存时间长于常规化疗组;CAG预激组除肌肉酸痛发生率较高外,其他血液系统及非血液系统的毒性和不良反应明显少于常规化疗组.结论:CAG预激方案治疗初治AML患者较之传统常规治疗具有化疗强度温和、敏感性好、完全缓解率及有效率高、毒副作用小,可以减少粒细胞缺乏恢复时间、减少合并感染率及增加幼稚细胞对化疗药物的敏感性等优点,推荐使用.     

整合素αⅡbβ与血小板信号分子PP125^FAK磷酸化

目的：探讨整合素aⅡbβ3与血小板信号分子聚焦粘附激酶PP125^FAK磷酸化的关系。方法：采用免疫沉淀、SDS－PAGE和Western blots等方法,观察在凝血酶刺激时3种不同条件①正常人血小板;②用抗αⅡbβ3单克隆抗体阻断正常血小板;③αⅡbβ3缺陷的血小板无力症患者血小板下血小板PP125^FAK磷酸化反应。结果：正常人血小板PP125^FAK发生磷酸反应;αⅡbβ3单抗阻断正常血小板其PP125^ FAK磷酸化明显减弱,但仍可见微弱磷酸化反应;血小板无力症患者血小板PP125^FAK未见磷酸化反应。结论：PP125^FAK磷酸化依赖于血小板活化和αⅡbβ3结构及功能的完整。整合素αⅡbβ3介导了血小板外－内信号传导,αⅡbβ3缺陷可影响这种信号传导,抗αⅡbβ3单抗不能完全阻断PP125^FAD磷酸化。     

脐血CD34^＋细胞体外诱导分化为成熟巨核细胞及产出血小板

背景:据作者查新检索,国外尚无通过体外诱导干细胞生成具有功能的血细胞并形成产品的报道.目的:体外诱导脐血CD34+细胞向成熟巨核细胞分化,并观察血小板产出情况.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于200412006在湘雅医院及湘雅三医院中心实验室完成.材料:脐带来源于足月妊娠健康产妇,由湘雅医院提供.方法:免疫磁珠法分选脐血CD34+细胞,按5×107L-1密度接种于24孔培养板,加入含L-谷氨酰胺、铁饱和的人转铁蛋白、CaCl2、胰岛素、去离子牛血清白蛋白及重组人血小板牛成素的StemPro-34无血清培养基,置于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度条件F向巨核细胞诱导培养14～21d.吸取细胞培养液,离心取上清,再次离心弃上清,余下物质即为细胞培养液中比重较小的血小板样颗粒.同法分离正常富血小板血浆中的血小板.主要观察指标:培养细胞与上清液中血小板样颗粒的形态变化、免疫组织化学染色结果、显微及超微结构观察,血小板聚集情况及CD41的表达.结果:培养第10天,巨核细胞诱导培养体系中出现丝状物质,片有血小板样颗粒产生,第16天达高峰:培养细胞强阳性表达血小板特异件抗原GP Ⅱb Ⅲa:光镜观察培养细胞呈成熟巨核细胞形态,但也可见幼稚巨核细胞样,巨核细胞旁可见血小板样颗粒:电镜观察培养细胞大多呈成熟巨核细胞形态,少量呈凋亡状态,上清液中血小板样颗粒与富血小板血浆中的血小板大小、超微结构基本一致,有的血小板表面光滑,有的则呈现不规则表面.上清液中血小板样颗粒与正常富血小板血浆中的血小板均能对凝血酶产生聚集反应,流式细胞仪检测两者具有同样的CD41高表达率.结论:脐血CD34+细胞能在体外诱导生成高纯度且成熟的巨核细胞,并产出血小板.     

自体造血干细胞移植治疗恶性血液病

近年来，我们应用自体造血干细胞移植治疗恶性血液病６例，报道如下。１　材料和方法１．１　临床资料６例患者均为我科１９９４年１月～１９９８年１２月住院患者，男２例，女４例，年龄１９～３５岁。急性非淋巴细胞白血病５例，恶性淋巴瘤（Ⅳ期）１例，５例完全缓解（ＣＲ１）后６～１２月、１例（ＣＲ２）４月后进行造血干细胞移植。自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）４例，自体外周血造血干细胞移植（ＡＰＢＳＣＴ）２例。１．２　方法ＡＢＭＴ：按常规方法采集自体骨髓，单个核细胞数１．５～２．５×１０８／ｋｇ，体外净化［１］后回输。Ａ…     

血细胞源性组织因子的研究现状

组织因子（TF）是凝血反应的始动因子。经典的凝血学说认为，在血管壁完整的情况下，表达于血管内皮细胞的，TF无法与血液直接接触，循环中因无，TF的存在而不能独立的启动凝血，只有在血管壁破损时，内膜下，TF释放入血方可启动凝血及血栓形成，而此过程中，血细胞成分中除血小板能够提供磷脂催化表面辅助凝血反应外，白细胞和红细胞都只是被动卷入参与了血栓的生成。目前这一观念因外周血中，TF或含，TF微粒的存在而受到挑战。近年的研究认为，在特定情况下，甚至在生理条件下，循环中的，TF也能启动凝血，循环中的，TF主要来源于血液中的一些细胞成分，这些血细胞源性，TF在凝血中的作用正日益受到重视，成为目前研究的热点。     

血小板膜糖蛋白αⅡbA477P（A446P）突变对αⅡbβ3复合物表达的影响（英文）

目的：探讨血小板膜糖蛋白αⅡbA477P（A446P）突变对αⅡbβ3蛋白表达的影响。方法：用重叠延伸PCR法对正常的αⅡb-pcDNA3.1＋质粒载体进行体外定点诱变,构建了αⅡbA477P突变质粒载体;经体外真核细胞COS-7细胞转染试验后,从转录水平、蛋白质水平和膜表面复合物水平检测突变体在真核细胞内的表达。结果：突变的αⅡbA477P（A446P）基因在真核细胞内有转录,Western印迹显示细胞内有αⅡb蛋白的表达,但突变αⅡbA477P（A446P）β3复合物在细胞膜表面的表达量仅为正常αⅡbβ3复合物的12.95%。结论：αⅡbA477P（A446P）显著降低了αⅡbβ3复合物在细胞膜表面的表达,其机制可能是该位点的突变干扰了αⅡb和β3正常结合或者影响了αⅡb蛋白的正常构型。