一种简易可行的激光捕获显微切割样本RNA质控方法

目的 建立一种简易可行的激光捕获显微切割样本RNA质控方法.方法 分别提取捕获样本和染色前、染色后1和2 h、持续捕获1和2 h切片及残余组织的RNA,琼脂糖电泳检测;激光捕获显微切割(LCM)样本RNA的产率可通过理论值初步估计.结果 当染色前后、捕获后的切片或切片残余组织RNA质量完好时,捕获样本的RNA质量完好,实时定量PCR亦获得了良好的扩增结果.结论 使用琼脂糖凝胶电泳分别检测染色前后、捕获后的切片或切片残余组织RNA的质量,可以从不同的环节和过程对捕获样本RNA进行间接检测,该方法简单方便有效,并可进一步用于LCM样本蛋白质及DNA等大分子的质控.     

右美托咪定对咪达唑仑所致神经干细胞增殖、分化和凋亡改变的影响

目的 研究咪达唑仑对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖、分化及凋亡的毒性作用及右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)能否缓解咪达唑仑的神经毒性作用. 方法 分离培养孕14～15 d大鼠胚胎大脑皮质NSCs,将NSCs接种于培养板中,培养24 h后,将其按照完全随机分组法分为3组:对照组(C组)、咪达唑仑组(M组)、Dex联合咪达唑仑组(M+D组).分别采用咪达唑仑、Dex联合咪达唑仑处理培养的第一、二代NSCs 24 h,采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT)]比色法检测细胞活力,溴脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)掺入法检测细胞增殖,免疫细胞化学法观察NSCs分化情况,原位末端标记法(terminal dUTP nick-end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡. 结果 与对照组比较,咪达唑仑干预NSCs 24 h可降低细胞活力(对照组0.214±0.006,咪达唑仑组0.187±0.002)、减少细胞增殖[(对照组(35.7±1.0)％,咪达唑仑组(27.6±1.0)％]、增加细胞凋亡[对照组(5.7±0.8)％,咪达唑仑组(7.8±1.1)％](P＜0.01),但对NSCs分化没有显著影响(P＞0.05);与咪达唑仑处理比较,Dex联合咪达唑仑干预NSCs 24 h,可增加细胞活力[M+D组0.233±0.007]和细胞增殖[M+D组(35.7±1.1)％]、减少细胞凋亡[M+D组(5.3±1.0)％](P＜0.01),但对NSCs向神经元和星形胶质细胞分化无明显影响(P＞0.05). 结论 Dex可缓解咪达唑仑抑制NSCs增殖、促进细胞凋亡的作用,但不影响其向神经元和星形胶质细胞方向分化.     

红景天苷通过抑制凋亡相关蛋白的表达保护缺氧对培养神经干细胞的损伤

目的观察红景天苷对缺氧损伤成年大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)组织分离培养神经干细胞凋亡比例和Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白表达的影响。方法原代培养成年大鼠SVZ神经干细胞,不同浓度红景天苷预处理24 h后,干细胞厌氧工作站缺氧损伤48 h。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞活力;显微镜下观察各组细胞形态;TUNEL染色和流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞内Bax,Bcl-2和caspase-3蛋白的表达变化。结果红景天苷预处理可显著改善缺氧损伤后的细胞生长状态和活力,降低缺氧引起的细胞凋亡率的升高(P<0.05);拮抗缺氧损伤导致的细胞Bcl-2/Bax蛋白比例的下降,降低活化的caspase-3蛋白的表达(P<0.05)。结论红景天苷通过抑制神经干细胞的凋亡,保护缺氧对神经干细胞的损伤,其机制可能与调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2和caspases-3的表达有关。     

重症肌无力患者报告结局指标量表的研制——计量心理学测评

目的：为考察用于中西医临床疗效评价的重症肌无力（myasthenia gravis, MG）患者报告结局指标（patient-reported outcome, PRO）量表的科学性,对其计量心理学特征进行评价。 方法：用MG-PRO量表对200例样本（100名健康人和100名重症肌无力患者）进行自评量表式调查,应用经典测量理论和项目反应理论方法对其信度、效度、个体差异指数和条目功能差异（differential item functioning, DIF）等计量心理学特征进行考评。 结果：经典测量理论分析结果显示,总量表以及各领域的分半信度系数大于0.7,各领域Cronbach＇s α系数大于0.80;每个方面与其所属领域的相关系数均大于其与其他领域的相关系数。从结构效度来看,探索性因子分析提取出4个主成分,反映了生理、心理、社会、治疗4个领域,累计贡献率为55.54%;重症肌无力患者与健康人在每个方面的测评结果比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。项目反应理论分析结果显示,每个模型的个体差异指数均大于0.8,所有条目都没有一致性DIF和非一致性DIF。 结论：MG-PRO量表反映了WHO关于生存质量的内涵和重症肌无力患者的特殊问题,而且具有良好的信度（分半信度、内部一致性信度）和效度（内容效度、结构效度、区分效度）,具有良好的项目反应理论模型的计量心理学特征。     

川芎嗪对成年大鼠脑缺血再灌注损伤后nNOS的表达和神经的影响

目的 探讨川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织内神经元型一氧化氮合酶免疫阳性细胞表达变化,及其对海马齿状回、侧脑室室下区神经细胞增殖的影响.方法 动物分为正常组、假手术组、对照组、川芎嗪处理组.脑缺血再灌注损伤模型由线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MACO)制成.BrdU标记增殖细胞.免疫组化SABC法测定大鼠脑缺血再灌注损伤后,不同脑区在不同时间段的nNOS、BrdU免疫阳性细胞表达,Western blotting测定大鼠脑缺血再灌注损伤后,不同脑区在不同时间段的nNOS的表达.结果 免疫组化结果显示在大脑皮层、纹状体与尾壳核和海马均有nNOS的表达,Western blotting结果显示,对照组缺血侧各脑区内,nNOS表达较假手术组升高(P＜0.05),并随时间延长而递增.川芎嗪处理组大脑皮层、纹状区与尾壳核nNOS表达1、3 d组比对照组同时段表达降低(P＜0.05).川芎嗪处理组BrdU阳性细胞在侧脑室室下区(SVZ)缺血再灌注1、3 d组明显高于对照组(P＜0.05),川芎嗪处理组BrdU阳性细胞在海马齿状回(DG)缺血再灌注3 d、7 d组高于对照组(P＜0.05).结论 川芎嗪能抑制缺血后脑组织内早期nNOS的表达,对缺血后脑组织具有早期保护作用,并能促进SVZ和DG神经细胞增殖.     

鼻咽癌患者中SF-36量表的信度和效度的研究

目的：评价简明健康调查量表（36-items short form health survey,SF-36）在鼻咽癌患者生存质量应用中的信度和效度。方法：2007年1月21日～2月7日,统一受训的调查员使用SF-36对526例确诊的鼻咽癌患者进行自评量表式调查,并采用相关分析、信度分析和因子分析等统计方法分析量表的信度和效度。结果：SF-36具有较好的分半信度和内部信度;除活力（VT）和社会功能（SF）外（信度系数≥O．6）,各领域的内部信度系数均≥0．7。每务目跟相关领域的相关系数均〉0．53,而且高于该条目与其他领域的相关系数,说明SF36有良好的内容效度和区分效度。所有条目提取的7个主成分分布代表了各个领域,累计贡献达61．18％;8个领域得分提取2个公共因子,解释58．90％的变异。因子分析产生的结果与量表的理论结构假设基本一致。结论：SF-36有较好的信度和效度,可用于评价鼻咽癌患者的生存质量。     

高校大学生的中医健康状况及影响因素分析

目的：了解高校大学生的健康状况及其影响因素，为促进大学生的健康提供科学依据。方法：采用多阶段整群随机抽样方法抽取某高校的大学生，调查了解大学生中医健康状况量表（TCM—HSS）得分、人口学和行为特征，用多重线性回归探索影响因素。结果：共纳入1801名学生，多因素结果发现TCM—HSS总分的影响因素有性别、年级、运动、吸烟、饮水量和社团参与。结论：针对高校学生开展健康管理时，应加强对女生，高年级学生，缺乏运动、吸烟、饮水量和社团参与较少学生的健康干预，最大限度的提高学生的生存质量。     

常见的患者偏好随机对照试验方法介绍与评价

为了解决传统的随机对照试验在临床实际操作过程中面临的患者的偏好、伦理和依从性等,研究者们提出了患者偏好随机对照试验。介绍几种常用的患者偏好设计方案:患者偏好二阶段设计(Wennberg设计、Rücker设计)、全面队列设计(Brewin设计和Olschewski设计)、预随机设计和Korn设计等,并评价各个设计方案的优缺点,以便研究人员和临床医生根据研究目的、疾病特点等特征选择合适的方案。     

中医证候诊断量表研究技术和方法探索

为研究与建立中医证候诊断量表,课题组依托973计划项目基金的资助,以冠心病痰瘀互结证诊断量表的可行性,初步证实:文献系统评价和临床调查是中医证候诊断量表本底资料的重要来源,德尔菲法是筛选中医证候诊断量表条目达成共识的有效方法,层次分析法定权重能实现中医证候量化诊断的目标,采用诊断性试验设计的敏感度、特异度和ROC曲线下的面积来评价中医证候诊断量表的效能,后续研究,证明了这些技术和方法是可行性的,供同行借鉴参考。     

宫内节育器并发异位妊娠36例原因分析

宫内节育器并发异位妊娠者逐年增多,笔者对近5年间接诊的36例患者进行回顾性分析 1一般资料 2001-01/2005-12月,作者医院共收治异位妊娠162例。年龄24～40（27.2±4.6）岁。