糖尿病患者高密度脂蛋白与受体结合的研究

目的和方法：对糖尿病Ⅰ组（ＨｂＡ１ｃ为７０６％±０６０％）Ⅱ组（ＨｂＡ１ｃ为１１９７％±１６５％）各７例及对照组（ＨｂＡ１ｃ为４８５％±０２０％）６例的高密度脂蛋白（ｈｉｇｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＤＬ）糖化进行检测，同时将ＨＤＬ抗血清提纯为抗ＨＤＬＩｇＧ并用辣根过氧化物酶（ｈｏｒｓｅｒｄｉｓｈｐｅｒｉｏｘｉｄａｓｅ，ＨＲＰ）标记。用酶联免疫受体法测定ＨＤＬ与培养的人胚肺成纤维细胞（ｈｕｍａｎｌｕｎｇｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ，ＨＬＦ）受体特异结合。结果：Ⅰ、Ⅱ组及对照组糖化值分别为３９２６±８１０、７２９４±６４０和２０４０±１１０Ｇｌｙｃｏｇｒｏｕｐ／ＨＤＬ，Ⅰ、Ⅱ组ＨＤＬ的细胞受体特异结合低于对照组（Ｐ＜００１），Ⅱ组低于Ⅰ组（Ｐ＜００１）。结论：糖尿病患者ＨＤＬ糖化高于正常人，但其与细胞受体的特异结合却下降     

溶血性贫血的生化基础

溶血性贫血是由于红细胞破坏加速,超过造血补偿能力范围时所发生的一种贫血。正常红细胞呈双凹圆盘形状,在循环中能生存120天左右。它具有很大的可塑性和抗摩擦、撕拉的能力,能通过比它直径(8微米)小得多的微循环管道(可小到0.5微米)。正常红细胞的这种特性有赖于:(1)红细胞膜结构和功能的正常;(2)红细胞内酶和能量代谢的正常;(3)血红蛋白结构的正常。任何一方面发生异常都可使红细胞的完整性受到损害而导致溶血。这种异常可由红细胞内在的缺陷引起,也可由红细胞外部的因素所致。为了反映疾病的主要矛盾,本文拟从红细胞内、外因素两方面来讨论溶血性贫血的生化基础。红细胞内因素又分为细胞膜、代谢酶和珠蛋白三方面缺陷;红细胞外因素则包括物理、化学、生物、免疫等因     

小鼠肝脏芳香酰胺酶分子中唾液酸对酶稳定性及催化性质的影响

作者观察了小鼠肝脏芳香酰胺酶分子中唾液酸残基对酶稳定性及催化性质的影响,发现酶的唾液酸残基去除后,对尿素失活率不变,对热稳定性可见降低;但是Co~(2+)激活程度、氨基酸(Phe、Met、Leu)抑制程度与抑制常数以及对底物L-亮氨酰β-萘胺的Km值等都保持不变,说明糖链末端唾液酸尽管携带负电荷但并不妨碍底物、Go~(2+)和氨基酸等与酶分子相应部位的结合,因此可推测唾液酸至少不影响活性部位局部的立体结构。     

全反式维甲酸抑制反义N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V转染的SMMC7721肝癌细胞蛋白激酶B的表达

目的 探讨全反式维甲酸（ATRA）诱导反义N－乙酰氨基葡萄糖转移酶V转染的SMMC 7721肝癌细胞（简称AS－GnT-V/7721)凋亡机制。方法 用Hoechst染色检测ATRA诱导细胞凋亡情况，并应用Northern Blot和Western Blot检测ATRA诱导AS－GnT-V/7721细胞凋亡过程中bcl-2及蛋白激酶B(PKB)的表达。结果 Hoechst 33258染色结果显示ATRA处理AS－GnT-V/7721细胞24h后，细胞发生凋亡。Western Blot检测发现，ATRA处理AS－GnT-V/7721细胞不改变bcl-2的表达，但抑制PKB蛋白表达。ATRA处理AS－GnT-V/7721细胞24h后PKB蛋白即明显降低（约为原来的32%)，处理48h后PKB蛋白几乎检测不到。Northern blot检测发现，ATRA处理AS－GnT/V7721细胞12h,PKB mRNA即有所下降，24h时PKB mRNA约为原来的48％,处理48h,PKB mRNA减少至原来的15％。而ATRA处理对照细胞，bcl-2及PKB表达均不变。结论 ATRA诱导AS－GnT-V/7721细胞凋亡过程中PKB的表达下降，而bcl-2表达不变。提示，ATRA诱导AS－GnT-V/7721细胞凋亡可能是由于抑制PKB表达，而与bcl-2无关。     

α—1,6—岩藻糖转移酶活力在7721人肝癌细胞及HL—60白血病细 …

研究肝癌细胞和白血病细胞诱导分化时α－１，６岩藻糖转移酶的改变。方法采用生物素标记受体糖链，用ＬＣＡ亲和层析柱分离被核心岩藻糖化的产物，并以辣根过氧化酶标记的亲和素与柱上的产物了后测定洗脱液中ＨＲＰ的活力，可代表α－１，６－ＦｕｃＴ活力。     

大鼠肝、肾组织及小鼠HepA腹水肝癌中丙酮酸激酶同工酶的免疫荧光定位

分别用兔抗大鼠L型或K型丙酮酸激酶(PyK)的抗体为第一抗体,并以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗兔IgG为第二抗体,用双抗体法对正常大鼠肝、肾切片及小鼠HepA腹水肝癌(简称HepA)细胞涂片作免疫荧光染色,借以探讨L型及K型PyK在这些组织中的定位。结果发现:(1)L型PyK主要存在于肝实质细胞,而K型PyK可能主要存在于柯否细胞。(2)HepA细胞的胞浆,被K型PyK抗体染色后呈强烈的荧光。(3)L型PyK仅存在于大鼠肾脏皮质中,而K型PyK在大鼠肾皮质和髓质中均较丰富。以上两型PyK在肾脏中的分布与皮质和髓质的糖代谢特性不同是相一致的。因肾髓质较皮质含有较多的K型PyK,故其氧化率低于皮质,而酵解率和Crabtree效应高于皮质。     

丹参对体外葡萄糖与蛋白质非酶结合的影响

目的研究在体外人血清白蛋白（ＨＳＡ）的非酶糖化反应中，加入丹参对反应的影响。方法用３Ｈ标记的葡萄糖和ＨＳＡ进行非酶糖化反应，定量测定被标记的ＨＳＡ的放射活性，同时用过碘酸钠氧化法测定反应液中Ａｍａｄｏｒｉ产物甲醛释放来比较对照组及含丹参液组的差异。结果丹参组３Ｈ葡萄糖每日掺入ＨＳＡ的量明显低于对照组，反应第８天时丹参组为对照组的５７．７％，甲醛释放量为６１．１％，增加丹参浓度，ＨＳＡ非酶糖化被进一步抑制。结论丹参对体外蛋白质非酶糖化有抑制作用。     

血清碱性磷酸酶的凝集素亲和层析在肝脏疾病鉴别诊断中的应用

血清碱性磷酸酶（ＡＬＰ）通过ＷＧＡ亲和层析柱后，可分成不结合的峰Ｉ和结合的峰ＩＩ两个活力峰，峰Ｉ为肝型（Ｌ－ＡＴＰ），而峰ＩＩ为骨型（Ｂ－ＡＬＰ）。Ｌ－ＡＬＰ在急性肝炎时明显增高；慢性肝炎或肝癌时轻度上升，而肝硬化时变化不大。如将Ｌ－ＡＬＰ再通过欧蔓陀罗凝集素（ＤＳＡ）亲和层析柱，则正常血清Ｌ－ＡＬＰ完全不被ＤＳＡ结合；急性肝炎的血清Ｌ－ＡＬＰ有部分为弱结合；慢性肝炎和肝硬化除弱结合组分外，出现较     

4种药物对醛糖还原酶的抑制作用

筛选有效的醛糖还原酶抑制剂，用于糖尿病慢性并发症的防治。应用体外酶动力学抑制实验，观察了4种药物对牛睾丸纯化醛糖还原酶的抑制作用，双倒数作图法（Lineweaver－Burkplots）确定抑制类型，Dixon和Cor-nish－Bowden作图法求取药物对酶的抑制常数。结果：索比尼尔为非竞争性抑制剂，托瑞斯他为反竞争性抑制剂，黄岑甙、黄连素为混合性抑制剂，抑制常数（Ki）分别为：1.08μmol/L，0.12μmol/L，5．0μg／ml和2.7μg／ml结论：本实验方法简便有效，可用于醛糖还原酶抑制剂的初步筛选。     

H615肝癌和HepA腹水肝癌的酶学比较——Ⅰ.丙酮酸激酶和醛缩酶活力及其同工酶谱的变化

615小棕鼠的H615肝癌(H615)是由我国所建立的一株移植性自发性肝癌模型。在病理形态上是一种分化程度较好的肝细胞癌。小白鼠的HepA腹水肝癌(Hep A)是一种恶性程度较高的肝癌。对这两种肝癌我们测定了丙酮酸激酶(PyK)和醛缩酶(ALD)及其同工酶的活力,观察到(1)在Hep A中PyK及ALD总活力都明显增加,而在H615中仅PyK总活力增加。在两种肝癌中,凡属胎儿型或增殖型的同工酶如K型PyK、A型ALD的比例都较正常肝升高,而属成年型或分化型的同工酶如L型PyK、B型ALD的比例都较正常肝降低,但在H615中的变化不如HepA中的明显。(2)两种肝癌宿主肝的同工酶谱可类似一般肝癌所见到者。提示肝癌细胞可能分泌一类化学物质引起宿主肝中PyK和ALD同工酶谱的变化。