胶质母细胞瘤组织中TRAIL受体表达的研究

目的研究TRAIL受体(TRAIL receptor,TRAIL-R)在胶质母细胞瘤中的表达,并探讨其临床意义。方法联合采用免疫组织化学和RT-PCR方法检测胶质母细胞瘤及正常脑组织中TRAIL-R的表达。结果25例胶质母细胞瘤均表达死亡受体(death receptor,DR)4和DR5,11例(44.0%)表达诱骗受体(decoy receptor,DcR)1,5例(20.0%)表达DcR2,而20例正常脑组织普遍表达DcR1和DcR2。胶质母细胞瘤组织中DR的高表达以及DcR的低表达不同于正常脑组织中DR的低表达及DcR的高表达,两者间差异有显著性(P<0.01)。RT-PCR显示,25例胶质母细胞瘤组织分别有22例(88.0%)DcR1和15例(60.0%)DcR2在mRNA水平呈阳性表达,DcR在转录水平的表达明显高于翻译水平(P<0.01)。结论胶质母细胞瘤中普遍存在DR的高表达和DcR的低表达,DcR在胶质母细胞瘤中限制性表达的调控位于转录后水平。这可能为胶质母细胞瘤的凋亡诱导治疗提供新的靶点和策略。     

食管鳞癌组织中淋巴管生成2种检测方法比较

目的:探讨人食管鳞癌组织中淋巴管生成灵敏的检测方法.方法:分别采用免疫组化SP法(以血管内皮生长因子受体-3为淋巴管特异性标记物)和酶组织化学法检测49例食管鳞癌组织和癌旁组织中淋巴管密度(分别记为LVDi与LVDe).结果:癌组织中LVDe的表达和癌旁组织中LVDi、LVDe的表达在有、无淋巴结转移时差异均有统计学意义(P＜0.01).有淋巴结转移癌组织中LVDi与LVDe之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论:酶组织化学法可较好地显示食管鳞癌组织中的淋巴管.     

8—Cl—cAMP对人恶性胶质瘤TJ899细胞c—myc基因表达的影响

目的：观察８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ对人恶性胶质瘤ＴＪ８９９ＸＬＥＱ ｃ－ｍｙｃ基因表达的影响。方法：体外分组培养ＴＪ８９９细胞，采用原位杂交方法观察实验组和对照组ＴＪ８９９细胞ｃ－ｍｙｃ基因表达情况。结果：加８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ的实验组校不加８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ的对照组ＴＪ８９９细胞ｃ－ｍｙｃ基因表达降低。结论：８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ可下调ＴＪ８９９细胞ｃ－ｍｙｃ基因表达。     

超声造影剂及超声辐照对TIMP-1 siRNA在肝纤维化大鼠肝组织中表达的影响

目的观测超声造影剂及超声辐照对TIMP-1 siRNA质粒转染肝纤维化大鼠肝组织内TIMP-1基因表达的影响。 方法采用二甲基亚硝胺（DMN）方法建立大鼠肝纤维化模型，72只造模大鼠在第6周随机均分成3组，质粒组（P组）、质粒＋造影剂及超声照射组（P＋U组）、对照组。2d、6d及12d后各组分别随机取8只处死、取肝、肾、肺、脑、心肌组织快速冷冻切片，荧光显微镜下观察各组织内TIMP-1 siRNA荧光表达；FQ—PCR测定肝组织TIMP-1 mRNA表达。 结果2d后，P组肝、肾、肺、脑、心肌组织内均有少量TIMP-1 siRNA绿色荧光表达，组间无显著差异，P＞0．05；P＋U组肝组织内TIMP-1 siRNA荧光表达明显增强，较其它组织差异显著，P＜0．001。P组及P＋U组肝组织TIMP-1 mRNA表达量均较对照组明显降低，P＜0．001；P＋U组降低较P组显著，P＜0．001；P＋U组6d时TIMP-1 mRNA表达量最低，后依次为48h、12d。 结论TIMP-1 siRNA对肝纤维化大鼠TIMP-1基因表达抑制作用明显；超声造影剂及超声辐照能够明显增高基因转染效率，并有将基因载体靶向定位于肝组织释放的作用。     

丁酸钠对食管癌细胞NDRG1基因表达的影响

目的了解丁酸钠对食管癌细胞分化相关基因NDRG1表达的影响。方法采用丁酸钠作用于食管癌EC9706细胞，应用原位杂交法和免疫组化SP法检测丁酸钠作用1、3d及5d后NDRG1蛋白和mRNA的表达。结果①丁酸钠作用1～5dNDRG1mRNA表达灰度值，对照组86±15，1d组125±14，3d组142±25，5d组164±21，1、3、5d组与对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）；②丁酸钠作用1—5dNDRG1蛋白表达灰度值，对照组145±18，1d组179±24，3d组188±20，5d组193±26，1、3、5d组与对照组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论丁酸钠可上调EC9706细胞分化相关基因NDRG1表达。促使其分化。     

RNA干扰对EC9706细胞mTOR表达及细胞生长与凋亡的影响

目的:探讨RNA干扰技术对人食管癌EC9706细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长与凋亡的影响.方法:设计合成mTOR siRNA,采用低、中、高浓度(50、100与150 nmoL/L)的mTOR siRNA分别转染EC9706细胞24、48与72 h.同时设无义对照组(转染无义对照siRNA)、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不转染).采用免疫细胞化学与原位杂交法分别检测各组EC9706细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达;应用MTT法检测细胞增殖,计算细胞生长抑制率;应用TUNEL法检测转染24 h时细胞凋亡,计算凋亡指数(AI).结果:转染24、48与72 h,6组细胞mTOR蛋白和mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=24.14,45.78,59.19,P均＜0.001;mTOR mRNA:F=41.42,69.74,43.71,P均＜0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=143.85,172.98,155.01,P均＜0.001);低、中、高浓度组转染不同时间点间比较,mTOR蛋白(F=42.23,29.46,50.22,P均＜0.001)、mTOR mRNA(F=6.48,8.50,4.80,P均＜0.05)及细胞生长抑制率(F=78.77,76.14,52.28,P均＜0.001)差异均有统计学意义.mTOR siRNA转染组EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且mTOR蛋白及mRNA的表达随mTOR siRNA浓度的增加及转染时间的延长而减弱(P＜0.05).不同浓度mTOR siRNA转染组EC9706细胞生长抑制率均高于各对照组,且细胞生长抑制率随mTOR siRNA浓度的增加和转染时间的延长而升高(P＜0.05).转染24 h,6组细胞AI相比,差异有统计学意义(F=442.96,P＜0.001),mTOR siRNA转染组AI均高于各对照组,且高浓度转染组AI高(P＜0.05).结论:mTOR siRNA可有效抑制EC9706细胞mTOR蛋白与mRNA的表达,且能抑制EC9706细胞的增殖并促进其凋亡.     

白藜芦醇对BGC-823细胞人程序化死亡分子5表达及凋亡的影响

目的：探讨白藜芦醇对胃癌BGC-823细胞中凋亡相关基因人程序化死亡分子5（PDCD5）表达的影响,并观察白藜芦醇诱导BGC-823细胞凋亡的效应。方法：分别用25、50、100和200μmol/L的白藜芦醇处理BGC-823细胞24、48和72h后,采用免疫细胞化学和原位杂交方法检测PDCD5表达的变化;运用流式细胞仪和TUNEL法检测细胞凋亡情况。另设空白对照组和溶剂对照组。结果：同一时间点,6组PDCD5蛋白及mRNA的表达差异均有统计学意义（F蛋白=211.881、242.438和184.866,P均〈0.001;FmRNA=207.366、148.411和158.661,P均〈0.001）;同一浓度,24、48和72h时点各组比较,PDCD5蛋白及mRNA的表达差异均无统计学意义（F蛋白=0.950、1.870、2.218和2.232,P均〉0.05;FmRNA=1.267、2.376、1.221和2.292,P均〉0.05）。各组BGC-823细胞凋亡指数比较,差异有统计学意义（F=230.069,P〈0.001）。结论：凋亡相关基因PDCD5可能在白藜芦醇诱导胃癌BGC-823细胞凋亡过程中发挥重要作用。     

胃癌的螺旋CT征象与MMP-9及Cath-D蛋白表达的关系

目的：探讨胃癌螺旋CT征象与基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及组织蛋白酶D（Cath-D）蛋白表达的关系。方法：对52例胃癌患者行螺旋CT平扫及三期动态增强扫描。采用免疫组化SP法检测术后肿瘤组织和正常胃黏膜标本中MMP-9及Cath-D的蛋白表达,分析胃癌组织中MMP-9和Cath-D蛋白的表达与胃癌螺旋CT征象（有无淋巴结转移、Lauren分型及肿块大小）间关系及胃癌组织中MMP-9和Cath-D表达的关联性。结果：胃癌组织中MMP-9和Cath-D蛋白的阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织（χ2分别为55.120、53.626,P均〈0.001）;胃癌组织中有淋巴结转移组MMP-9及Cath-D蛋白的阳性表达率高于无转移组（χ2MMP-9=8.341,P=0.004;χ2Cath-D=7.338,P=0.007）;弥漫型胃癌组织中MMP-9及Cath-D蛋白的阳性表达率高于肠型,差异有统计学意义（χ2分别为4.312、6.175,P〈0.05）。胃癌组织中Cath-D和MMP-9蛋白的表达有关联性（χ2=13.874,rP=0.496,P〈0.05）。结论：MMP-9及Cath-D的高表达与胃癌螺旋CT征象上的Lauren分型和淋巴结转移有关。胃癌中组织MMP-9高表达与Cath-D高表达具有一致性,两者在胃癌的发展中可能起协同作用。     

胃癌组织中KISS-1和基质金属蛋白酶-9蛋白的表达

目的:检测胃癌组织中KISS-1和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达.方法:应用免疫组织化学SP法分别检测45例胃癌组织及配对远离胃癌手术切缘的正常组织中KISS-1和MMP-9蛋白的表达.结果:胃癌组织及配对正常组织中KISS-1蛋白的阳性表达串分别为35.6%(16/45)和88.9%(40/45),2者相比,差异有统计学意义(χ2＝16.531.P<0.001);MMP-9蛋白的阳性表达率分别为60.0%(27/45)和8.9%(4/45),2者相比,差异有统计学意义(χ2＝17.926,P<0.001).胃癌组织中KISS-1和MMP-9蛋白的表达均与胃癌浸润深度及有无淋巴结转移有关(χ2分别为9.652、5.670和9.050、5.351,P均<0.05).胃癌组织中2者的表达有关联(rP=0.469,P<0,001).结论:KISS-1和MMP-9的表达和胃癌的发生发展及浸润转移有关,联合检测2者有望用于胃癌的早期诊断和预后判断.     

巨细胞病毒肝炎患儿血清IL-6、IL-8水平检测的意义

目的探讨巨细胞病毒肝炎(CMV-IgM抗体阳性)患儿血清中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)水平的变化以及在巨细胞病毒肝炎发病机制中的作用。方法应用ELISA法分别检测了69例巨细胞病毒肝炎患儿血清IL-6、IL-8水平,同时测定血清胆红素、谷丙转氨酶(ALT)水平,然后分析它们之间的关系,并与68例健康小儿比较。结果 69例巨细胞病毒肝炎组血清IL-6、IL-8水平明显高于正常对照组(P<0.01);其中31例重症患儿血清IL-6、IL-8水平明显高于38例轻症患儿(P<0.01)。结论巨细胞病毒肝炎患儿血清IL-6、IL-8水平较正常明显增高,并且与肝脏的损伤程度呈正相关。