大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达

目的：克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤（PC12）细胞中的表达。方法：从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3-flag质粒中。Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染PC12细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果：Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3-flag/Kir2.3转染PC12细胞24 h后有Kir2.3的过表达,且至少持续72 h。结论：成功构建了大鼠野生型Kir2.3基因的真核表达载体,获得了瞬时表达大鼠野生型Kir2.3基因的PC12细胞克隆,为进一步研究Kir2.3的生物学功能以及Kir2.3在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。     

鱼藤酮及神经肽PACAP27对PC12细胞PAC1受体及内源性PACAP表达的影响

目的:探讨神经毒素鱼藤酮及神经肽PACAP27作用大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)后,PC12细胞自身PAC1受体及自身内源性垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)的表达变化.方法:采用定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测PC12细胞PAC1受体和PACAP mRNA表达.结果:鱼藤酮(250 nmol/L)可使PAC1受体 mRNA的表达增高;神经肽PACAP单独作用或与鱼藤酮和(或)PAC1受体拮抗剂PACAP 6-27联合作用时均对PAC1受体的表达无影响(P＞0.05);鱼藤酮(250 nmol/L)可使内源性PACAP mRNA的表达增高(P＜0.05),神经肽PACAP单独作用对内源性PACAP mRNA的表达无影响(P＞0.05),而与鱼藤酮和(或)PAC1受体拮抗剂PACAP6-27联合作用时均可使内源性PACAP mRNA的表达增高(P＜0.05).结论:在鱼藤酮作用下,PC12细胞自身可以通过增高PAC1受体及内源性PACAP的表达部分代偿细胞的损伤.     

5-HT1A受体激动剂减轻GluR1Ser831磷酸化和改善帕金森病异动症的研究

目的:探讨5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT对左旋多巴诱发的异动症细胞学与行为学效应。方法:6-羟基多巴胺立体定向注射至大鼠前脑内侧束建立帕金森病(PD)动物模型。对模型成功的PD大鼠进行两套实验:第1套实验中3组PD大鼠接受每日2次左旋多巴(50mg穔g-1加苄丝肼12.5mg穔g-1)腹腔注射,持续22d。在第23天左旋多巴注射前,3组PD大鼠先分别接受8-OH-DPAT、8-OH-DPAT 5-HT1A受体阻断剂WAY-1006350.1mg穔g-1及溶剂;第2套实验中2组PD大鼠每日2次分别接受左旋多巴/苄丝肼 8-OH-DPAT与左旋多巴/苄丝肼 溶剂,持续22d。评估剂峰旋转次数;采用蛋白印迹法检测纹状体区谷氨酸受体亚型GluR1亚细胞分布及GluR1Ser831磷酸化的表达情况。结果:8-OH-DPAT减轻了PD大鼠的剂峰旋转次数。5-HT1A受体阻断剂WAY-100635与8-OH-DPAT联合应用则消除了8-OH-DPAT的效应。此外,8-OH-DPAT能调节与异动症相关的GluR1的亚细胞分布且明显降低GluR1Ser831的磷酸化水平。结论:8-OH-DPAT是通过5-HT1A受体起作用的,激动5-HT1A受体的药物可能对于PD异动症治疗及预防有益。     

后牙近远中垂直向纵折的保存治疗——附50例报告

<正>后牙纵折是较为常见的牙体疾患,近远中垂直向纵折型不仅波及髓室底、根分叉,而且常常伴有原发根尖周病变,治疗较为复杂。本文收集了后牙近远中垂直向纵折型50例疗效观察,报告如下。 临床资料 一般资料:本组中男33例,女17例,男女之比为2:1。年龄最小26岁,最大70岁,多数在30～50岁之间,高峰在40～50岁。有牙髓病治疗史32例,占64％,隐裂病史18例,占36％,同时并有高尖陡坡7例,占14％。发生牙位以上颌第一、第二磨牙最多34例,占68％,下颌第一、第二磨牙9例,占18％。上颌第一、第二双尖牙7例,占14％。牙折后就诊天数1～7天37例占74％,8～14天9例占18％,大于15天4例,占8％。     

光疗的新进展——绿光胜于蓝光

70年代初我们在国内首创用蓝光治疗新生儿高胆红素血症(以下简称高胆)取得了良好效果,大大减少了换血机会,此后,全市和全国各地就很快地相继采用,当时市场上的蓝色荧光灯管因需要量剧增而脱销,我们又试用了白光,结果证实白光也能治     

医源性胆胰肠结合部损伤诊治体会

目的探讨医源性胆肠结合部损伤（IBCS）的诊治体会。方法 7例医源性胆肠结合部损伤患者5例术中发现者均应该先解决胆道下端通畅,然后按照单纯性IBCS和复合性IBCS进行处理;2例术后发现者应以清创引流为主。术后均进行支持治疗。结果 1例死亡,6例治愈。结论医源性胆胰肠结合部损伤是一种发生于胆道探查术后的医源性损伤,术中易漏诊,可产生腹膜后严重感染。应根据术中发现和术后发现作不同的治疗。     

退热药对感染性发热患者病程的影响

目的：观察退热药对发热患者病程的影响。方法：将69例感染性发热的患儿随机分为两组，观察组35例，在综合治疗的基础上给予退热药；对照组34例，仅予综合治疗，不用退热药，比较两组病情痊愈时间。结果：观察组平均病程为8．1±3．7天．对照组为6．4±2．8天，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论：退热药可影响病情的恢复。     

折断式加压螺钉治疗老年股骨颈骨折

股骨颈骨折是老年人最常见的骨折之一，由于老年人本身合并症较多，如何缩短卧床时间和减少并发症已成为必须考虑的问题。手术治疗作为主要选择已被人们广泛接受。我院自1995年6月至2001年6月采用尾部折断式加压螺钉(简称折断式加压螺钉)治疗老年股骨颈骨折79例，疗效满意，报告如下。     

深部脑刺激丘脑底核治疗帕金森病大鼠脑中钙调蛋白的变化

目的 研究慢性高频电刺激帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠丘脑底核治疗PD的机制.方法 通过6-羟基多巴立体定向注射至大鼠中脑前脑束建立偏侧PD动物模型,对造模成功的PD大鼠模型丘脑底核进行高频电刺激,观察高频电刺激对PD大鼠行为的影响,并用蛋白印迹法检测纹状体酪氨酸羟化酶(TH)、钙调蛋白Calbindin-28和突触前膜囊泡蛋白(synaptophysin)的表达情况.此外,对接受慢性高频电刺激的6-羟基多巴损伤纹状体双侧PD大鼠的脑片进行免疫组化染色,检测黑质Calbindin-28和突触前膜囊泡蛋白的表达情况.结果 (1)高频电刺激偏侧PD大鼠丘脑底核可使阿朴吗啡诱导的旋转行为减少31%;(2)偏侧PD大鼠损伤侧纹状体内已无TH表达,慢性高频电刺激同侧丘脑底核对纹状体TH缺失无逆转,但增加健纹状体内TH表达量78.6%±9.5%;(3)偏侧PD大鼠损伤侧纹状体内Calbindin-28表达量增加75.4%±15.0%,慢性高频电刺激使其表达量减少43.0%±7.1%;(4)慢性高频电刺激亦显著抑制双侧PD大鼠黑质Calbindin-28表达:假手术大鼠、PD大鼠以及慢性高频电刺激后PD大鼠黑质致密部Calbindin-28阳性神经元分别为74.5±10.2、75.7±15.6和33.1±7.8;(5)慢性高频电刺激未影响黑质和纹状体内突触前膜囊泡蛋白的表达.结论 深部脑刺激治疗PD的机制与调节黑质和纹状体内钙调蛋白Calbindin-28和TH表达量有关.