转化生长因子β在胃癌细胞内的表达

目的：观察胃癌细胞内转化生长因子（ＴＧＦ）β的表达情况,探讨胃癌发展过程中ＴＧＦβ的可能作用。方法：４２例经胃镜活检、病理检查证实为胃癌。４４例浅表性胃炎的活检组织,采用免疫细胞化学方法—ＳＰ法显示ＴＧＦβ１及β２,其表达强度采用等级表示（由弱到强依次为－、±、＋、＋＋、＋＋＋）。结果：在４２例胃癌患者,ＴＧＦβ１无１例强阳性（＋＋＋）,中度阳性（＋＋）１例,低度阳性（＋）１０例,可疑阳性（±）３例,阴性（－）２８例,阳性率为２６．２％。ＴＧＦβ２强阳性（＋＋＋）５例,中度阳性（＋＋）１６例,低度阳性（＋）１３例,可疑阳性（±）２例,阴性（－）６例;阳性率为８１．０％。４４例浅表性胃炎患者,ＴＧＦβ１无１例阳性（＋～＋＋＋）,可疑阳性（±）４例,阴性（－）４０例。ＴＧＦβ２无１例中度阳性及强阳性（＋＋～＋＋＋）,低度阳性（＋）１０例,可疑阳性（±）１例,阴性（－）３３例;阳性率为２２．７％。胃癌患者的ＴＧＦβ１、β２阳性率均明显高于浅表性胃炎,ＴＧＦβ２的阳性率在胃癌更高于ＴＧＦβ１。结论：ＴＧＦβ１,尤其是ＴＧＦβ２表达的增强是胃癌恶性演变的一个标志。     

浅谈原位杂交的体会

原位分子杂交技术原理十分简单 ,但在操作过程中 ,实验条件的控制对结果的影响甚大 ,作者在大量的实际工作中摸索出一套比较成熟的方法 ,并经多次验证 ,结果满意 ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本　肝细胞癌及其癌旁肝组织、口腔疣状癌和宫颈癌组织分别取自湘雅医院肝胆外科、口腔科和妇产科 ,10 %福尔马林液固定 ,常规石蜡包埋 ,4μｍ厚的连续切片于 6 0℃烘烤 2 4ｈ备用。1.2　试剂　诱导型一氧化氮ｍＲＮＡ(ｉＮＯｍＲＮＡ)原位杂交试剂盒购自博士德生物公司 ;ＨＰＶ16 / 18ＤＮＡ原位杂交试剂盒购自中山生物技术公司 ;蛋白酶Ｋ系德…     

急性高容量血液稀释对OLV犬血管外肺水的影响-温度稀释法与重量分析法的比较

目的采用温度稀释法(PiCCO系统)单肺通气(OLV)下急性高容量血液稀释(AHHD)对犬血管外肺水(EVLW)的影响,并应用重量分析法验证其结果的准确性.方法16只健康成年杂种犬,随机分为双肺通气(DLV)组和OLV组,每组8只.肌肉注射氯胺酮8 mg·kg-1麻醉后,注射硫喷妥钠、维库溴铵快速诱导插管后,行间歇正压通气(吸入氧浓度为100%).置入颈外静脉导管及股动脉热稀释导管,与PiCCO监测仪连接,用低于8℃的生理盐水5 ml快速推入颈外静脉导管,进行数据监测.OLV组右开胸行左肺单侧通气,操作完成后稳定15 min,经犬外周静脉以80 ml·kg-1·h-1的速率输入6%中分子羟乙基淀粉,分别将红细胞压积(Hct)降至25%(H1)、20%(H2)、15%(H3)水平.达到H3水平后立即静脉注射大剂量硫喷妥钠将实验犬处死,摘取左右侧肺.分别在麻醉后即刻(C1)、开胸OLV后(C2)、用闭胸器将胸腔闭合后(C3)、Hct稀释至H1、H2、H3时监测心率(HR)、平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)、心输出量(CO)、胸内血容量(ITBV)、全心舒张末容积(GEDV)、EVLW;以重量分析法检测EVLW.结果与C1比较,DLV组CVP、CO、GEDV、ITBV在H1～3时、EVLW在H2～3时升高(P＜0.05或0.01),OLV组各时点差异无显著性(P＞0.05).与C2比较,OLV组在C3、H1～3时CVP、在H1～3时CO、GEDV、ITBV、EVLW升高(P＜0.05或0.01);DLV组各时点差异无显著性(P＞0.05).OLV组在H2～3时EVLW高于DLV组(P＜0.05).OLV组在H3时有3例出现临床肺水肿症状.应用温度稀释法所测得的EVLWT与重量分析法所测的EVLWG显著相关(DLV组r2=0.60,P＜0.05;OLV组r2=0.53,P＜0.05),但两组EVLWT数值均略大于EVLWG.结论温度稀释法测定的EVLW要高于重量分析法,两者测定值显著性相关;ITBV更能直接反映OLV下心脏前负荷的变化;犬开胸OLV下AHHD至Hct为20%时将导致EVLW急剧增加,开胸OLV下6%中分子羟乙基淀粉AHHD比DLV的EVLW增加,应注意避免肺水肿的发生.     

HCV NS3对人肝细胞磷酸化酪氨酸相关蛋白表达的影响

目的:研究HCV NS3对人肝细胞磷酸化酪氨酸相关蛋白表达的影响。方法:通过脂质体稳定转染分别建立表达HCV NS3蛋白的pRcHCNS3/QSG细胞，空白质粒转染细胞pRcCMV/QSG。用Western Blot和免疫细胞化学分别检测磷酸化p44/42，磷酸化p38，磷酸化SAPK/JNK在pRcHCNS3/QSG细胞和pRcCMV/QSG细胞及未转染的QSG7701细胞的表达差异及细胞内的定位;免疫共沉淀实验检测HCV NS3对磷酸化酪氨酸蛋白表达水平的影响。结果:pRcHCNS3/QSG细胞，pRcCMV/QSG细胞，未转染的QSG7701细胞抽提的总蛋白中均可检测出磷酸化p44/42，磷酸化p38，磷酸化SAPK/JNK的表达，阳性信号定位于细胞核。上述3种蛋白在pRcHCNS3/QSG细胞的表达较pRcCMV/QSG细胞和未转染的QSG7701细胞表达增强，其磷酸化酪氨酸蛋白的表达也较其他两对照组增强。结论:HCV NS3可能通过影响酪氨酸蛋白激酶的表达及活性，使一系列受酪氨酸蛋白激酶调节的蛋白质如MAPK分子异常磷酸化而活化，激活下游信号转导通路，导致肝细胞无限增殖和肿瘤形成。     

医科院校仪器设备管理存在问题及对策

随着医科院校教育形势的不断发展，院校仪器设备等硬件条件得到了进一步改善，尤其是“211”工程建设院校，由于资金投入增加，仪器设备建设发展较快。近3年来，我校仪器设备建设投入增加了2，57亿元，仪器设备总值每年平均增加幅度达到11％，设备总值达到了8，74亿人民币。仪器设备的优良率达到了89．41％，与1999年我校仪器设备普查时相比，上升了4．5％。     

不同剂量氟吗西尼对全麻后苏醒期双频指数的影响

脑电双频指数(bispectral index BIS)是唯一通过美国FDA的麻醉深度检测指标,可用来测定药物的镇静和催眠深度[1].氟吗西尼是苯二氮革类药物的特异性拮抗剂,此药在临床上用于麻醉后催醒已有多年.本文旨在比较不同剂量的氟吗西尼对麻醉后苏醒期BIS的影响,进而指导临床麻醉中氟吗西尼的合理用药.     

慢性细菌性前列腺炎病原学调查

目的：了解慢性细菌性前列腺炎与病原菌的关系及细菌耐药性，为前列腺炎提供诊断及治疗依据。方法：对慢性前列腺炎患者的前列腺液进行细菌培养和药敏试验，并进行分析。结果：198例中有124例培养出细菌，阳性分离率为62．6％。共检出病原菌124株，细菌种类分为8种，革兰阳性球菌占69．4％，以金黄色葡萄球菌为主；革兰阴性杆菌占30．6％，以大肠埃希菌为主。药敏试验结果表明：前列腺炎病原菌对常用抗生素耐药率较高，葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的分离率分别为38．9％和45．8％，肠杆菌科细菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）细菌分离率为31．8％。结论：应重视前列腺炎病原菌及耐药性的监测，才能针对性进行治疗。     

肝细胞癌组织中PTEN和p27蛋白的表达

目的　研究肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma,HCC)组织中 PTEN和 p2 7蛋白的表达。　方法　利用免疫组织化学技术检测 65例 HCC中 PTEN和 p2 7蛋白的表达。　结果　在 HCC中 ,PTEN和 p2 7蛋白的阳性率分别为 60 %(3 9/ 65 )和 5 3 .85 % (3 5 / 65 ) ,PTEN蛋白阴性表达率 40 % (2 6/ 65 ) ;PTEN和 p2 7蛋白的阳性表达强度之间呈明显正相关(r=0 .7461) ;PTEN和 p2 7蛋白的阳性表达强度与 HCC的分化程度明显相关 ,分化愈差 ,表达愈强 (p<0 .0 1) ,但与患者年龄、性别及肿瘤大小无关。　结论　在 HCC的发生及进展过程中 ,PTEN蛋白表达的缺失和降低可能导致 p2 7蛋白表达减少 ,使其不能有效发挥细胞周期负调控因子的抑瘤作用 ,使得瘤细胞具有更高的恶性程度     

非霍奇金淋巴瘤组织中PTEN和p27蛋白的表达

目的 :研究非霍奇金淋巴瘤组织中PTEN和p2 7蛋白的表达作用。方法 :利用免疫组织化学技术检测77例淋巴结非霍奇金淋巴瘤 (non Hodgkin’slymphoma ,NHL)中PTEN和p2 7蛋白的表达。结果 :在NHL中 ,PTEN和p2 7蛋白的阳性率分别为 90 .9% (70 / 77)和 5 1 .9% (4 0 / 77) ;PTEN和p2 7蛋白的阳性表达强度之间呈明显正相关 (r=0 .6 84 1 ,P <0 .0 1 ) ;低度恶性组PTEN和p2 7蛋白的阳性表达强度均明显高于高度恶性组 (P <0 .0 1 ) ;B细胞性NHL中PTEN和p2 7蛋白的阳性表达强度与T细胞性NHL比较无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :在NHL的进展过程中 ,PTEN蛋白表达的缺失和降低可能导致p2 7蛋白表达减少 ,使其不能有效发挥细胞周期负调控因子的抑瘤作用 ,使得瘤细胞具有更高的恶性程度