α-黑色素细胞刺激素类似物LK-FS024调控小鼠体重作用的研究*

目的:观察α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)类似物LK-FS024调控小鼠体重的作用和机制。方法:昆明种小鼠按体重、性别随机分组:生理氯化钠溶液(NS)对照组,α-MSH组(0.17 mg.kg-1),LK-FS024低、中、高剂量(0.017,0.17,1.7 mg.kg-1)组,SHU9119组(已知的黑素皮质素受体3和4阻滞剂,剂量0.17 mg.kg-1),α-MSH SHU9119组(剂量均为0.17 mg.kg-1),LK-FS024中剂量 SHU9119组(剂量均为0.17 mg.kg-1),每组10只,雌雄各半。各组小鼠先用高脂饲料连续喂养15 d以上,然后给药组侧脑室内注射给药,5μL.次-1,qd,连续14 d。对照组注射等体积的NS。每天称量小鼠体重,观察记录小鼠一般状况,如活动、理毛、进食、睡眠等。给药14 d后各组小鼠均空腹采血检测血糖、三酰甘油、胆固醇等指标。结果:给药d7开始,α-MSH组和LK-FS024中、高剂量组小鼠体重明显下降。LK-FS024中剂量 SHU9119组和α-MSH SHU9119组给药后体重均逐渐增加,与NS对照组比较没有显著差异(P>0.05),但均显著低于而SHU9119组(P<0.05)。给药14 d后LK-FS024中剂量组的血糖、血胆固醇和三酰甘油均显著低于NS对照组(P<0.05,P<0.01),但LK-FS024中剂量 SHU9119组血糖、血胆固醇无明显变化,仅三酰甘油显著低于NS组(P<0.01)。结论:LK-FS024可以显著降低小鼠体重和血糖、胆固醇、三酰甘油,作用机制可能与黑素皮质素受体3和4相关。     

乙醇对颈上神经节神经元Ca2+通道的作用

目的 探讨乙醇对颈上交感神经节神经元(SCGs)电压依赖性Ca2+通道(VDCC)的作用.方法 分散、培养新生12h内大鼠SCGs,应用全细胞膜片钳技术观察乙醇对SCGs VDCC的作用.结果 培养SCGs的VDCC类型以N-型为主,约占(73.31±16.31)%(P＜0.01,n=7).在钳制电位-70 mV,刺激电压-70～40 mV,波宽100ms的条件下,乙醇可逆性抑制SCGs VDCC,该作用具电压依赖性及浓度依赖性,其IC50为(257.36±20.56)mmol/L.乙醇可使VDCC的失活曲线显著左移,但不改变其激活曲线及电流的衰减.结论 乙醇对SCGs VDCC呈抑制作用,且可改变其通道特性,这可能是乙醇神经毒性的机制之一.     

六甲溴铵阻断交感神经元烟碱受体的机理

使用膜片钳全细胞记录技术，观察了六甲溴铵(C₆)对培养新生大鼠颈上交感节(SCG)神经元烟碱受体的阻断作用，并对其作用机理进行了研究. 本实验发现C₆对神经元烟碱受体的抑制作用具有明显的浓度依赖性和电压依赖性，可明显加速烟碱受体的失敏，提示C₆主要以阻断受体开放离子通道的方式拮抗烟碱受体.     

Physostigmine blocked nicotinic acetylcholine receptors in rat sympathetic ganglion neurons

目的：研究毒扁豆碱阻断交感节神经元烟碱受体的作用机理．方法：以培养的新生大鼠颈上交感节神经元为标本，使用全细胞膜片箝技术，观察毒扁豆碱对交感节烟碱受体选择性激动剂ＤＭＰＰ诱发电流的影响．结果：毒扁豆碱（５－２０μｍｏｌ·Ｌ－１）以浓度依赖性方式抑制ＤＭＰＰ诱发电流，促进诱发电流的衰减，其抑制作用没有电压依赖性，毒扁豆碱２００μｍｏｌ·Ｌ－１不能激活烟碱受体．结论：与骨骼肌烟碱受体相比，交感神经元烟碱受体表现出不同的药理学特性．毒扁豆碱通过作用于变构位点抑制交感神经元烟碱受体，不影响其开放的离子通道和激动剂结合位点．     

多硫代二酮哌嗪类化合物C87体外对肿瘤细胞生长的抑制作用及对活性氧产生的影响

目的研究多硫代二酮哌嗪类化合物C87对肿瘤细胞生长的影响及其可能机制。方法用磺酰罗丹明B法观察C87 0.05~1μmol·L-1与A549,HCT116,He La和SMMC7721作用24,48和72 h对肿瘤细胞存活率的影响,并计算50%生长抑制浓度(GI50);用流式细胞术检测C87 0.1~2.5μmol·L-1作用HCT116和He La细胞6 h,C87 2.5μmol·L-1作用0~6 h活性氧(ROS)的生成量;用流式细胞术检测C872.5μmol·L-1伴随给予抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)作用HCT116和He La细胞6 h ROS的生成量;用SRB法观察C87 0.05~1μmol·L-1伴随给予NAC作用24和48 h对HCT116细胞存活率的影响。结果C87 0.05~1μmol·L-1作用24,48和72 h,可明显抑制A549,HCT116,He La和SMMC7721细胞存活(P<0.05),且具有浓度依赖性(72 h,r2=0.946,0.989,0.973和0.984,P<0.05);C87 1μmol·L-1与上述4种肿瘤细胞作用24,48和72 h能时间依赖性地抑制细胞存活(r2=0.983,0.956,0.951和0.873,P<0.05)。C87 0.25~2.5μmol·L-1与He La细胞和HCT116细胞作用6 h,可诱发细胞内ROS产生,且呈浓度依赖性(r2=0.760,P=0.045;r2=0.987,P=0.001);C87 2.5μmol·L-1作用0.5~6 h,诱导ROS的产生呈时间依赖性(r2=0.886,P=0.017;r2=0.994,P=0.000)。给予抗氧化剂NAC后能明显抑制C87引起的He La细胞和HCT116细胞ROS生成(P<0.05),NAC 5和10 mmol·L-1可明显逆转C87引起的HCT116细胞死亡,GI50值明显增大,作用24 h时GI50为1.446和1.134μmol·L-1(C87处理组为0.513μmol·L-1);处理48 h时GI50为0.882和1.166μmol·L-1(C87处理组为0.333μmol·L-1)。结论化合物C87对A549,HCT116,He La和SMMC7721肿瘤细胞的生长具有抑制作用,其机制可能与其诱导细胞内氧化应激有关。     

二氢-β-刺桐啶碱对交感神经元烟碱诱发电流的抑制作用

目的 :观察二氢 -β-刺桐啶碱对培养的新生大鼠颈上神经节细胞烟碱诱发电流的抑制作用。方法 :用气压给药和膜片钳全细胞记录技术比较烟碱诱发电流幅度。结果 :二氢 -β-刺桐啶碱竞争性拮抗烟碱作用 ,其平衡解离常数约为0 015mmol/L。结论 :二氢 -β-刺桐啶碱是交感神经元烟碱受体的竞争性拮抗剂     

敲减酸感受离子通道1a致细胞抗酸性能力增强机制的初探

目的:通过酸感受离子通道(acid sensing ion channels,ASICs)1a敲减的细胞模型,探讨ASIC1a亚基表达抑制后细胞抗酸性能增强的可能机制.方法:使用RNA干扰技术,选择性敲减大鼠神经胶质瘤细胞(C6)和新生大鼠海马神经元中ASIC1a亚基,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验,观察不同条件下细胞抗酸能力的改变.结果:在酸性条件下,敲减ASIC1a亚基可明显提高C6细胞的耐酸能力.使用ASICs非选择性拮抗剂氨氯吡咪与选择性敲减ASIC1a亚基相比,在提高C6细胞抗酸能力方面没有显著差异.提高胞外Ca2 浓度可加重pH值下降造成的细胞损伤.结论:与其他亚基相比,ASIC1a亚基与酸中毒造成的细胞损伤关系最为密切,其机制与胞外Ca2 内流有关,提示ASIC1a可能是潜在的抗酸靶分子.     

从噬菌体随机十二肽库中筛选NF-κB(p65)亲和肽的研究

目的：采用噬菌体展示技术筛选核转录因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）亚基p65亲和肽。方法：以p65亚基为靶分子，利用噬菌体随机十二肽库进行亲和筛选，用ELISA法进行阳性克隆结合特异性验证。结果：经过3轮亲和筛选后，随机挑选15个噬菌体克隆，对其亲和力做ELISA试验，其中6个克隆显示较强的阳性结果。将上述6个阳性克隆DNA测序，序列均为CGTCAGCCTCGGCGAATAAGTATCCGAAGGAGTAAA，相应的氨基酸序列为FTPSDTYSPRLT。竞争性ELISA的结果显示，抑制率随p65亚基浓度的增大而升高。结论：从噬菌体随机肽库中筛选到能与NF-κBp65亚基特异性结合的克隆，并确定了其核心序列。     

交感节前神经元生物电活动的离子机制

<正> 交感节前神经元(SPN)是不同水平高位交感中枢的最后传出通路,并且对来自中枢和外周的信息以及自身活动,有着复杂的整合功能。近年来,许多神经生理学者对 SPN 生物电活动的离子机制,进行了广泛、深入地研究,为阐明 SPN 的生理功能奠定了基础。     

脂氧合酶代谢与肺癌研究进展

脂氧合酶(LOX)是非血红素铁双加氧酶,能催化底物生成各种类花生酸物质,在肺癌预防和治疗中发挥重要作用,有望成为新的抗肺癌药物作用靶点。根据氧分子插入底物的位点不同,人类LOX主要分为5-LOX、12-LOX和15-LOX,5-LOX和12-LOX具有促进肺癌细胞生长和肿瘤转移的作用,而15-LOX的两种亚型15-LOX-1和15-LOX-2主要具有抗肺癌的作用。本文主要综述了各种LOX代谢通路在肺癌发生发展中的作用特点。此外,还介绍了LOX依赖氧化应激、过氧化物酶体增殖物活化受体和P53的抗肺癌机制及其作为肺癌药物作用靶点的研究进展。