靶向VEGF发夹状RNA对宫颈癌HeLa细胞抑制作用的研究

目的:运用RNAi技术下调血管内皮生长因子(VEGF)在HeLa细胞中的表达,观察其对肿瘤细胞凋亡的影响,为人宫颈癌治疗提供理论依据。方法:设计并构建针对VEGF的携带绿色荧光蛋白(GFP)发夹状RNA(shRNA)质粒表达载体(PGPU6/GFP/Neo-shRNA),脂质体法转染HeLa细胞;荧光显微镜观察GFP的表达,并计算转染效率;RT-PCR检测HeLa细胞VEGF的表达,筛选出靶序列;再用流式细胞仪法检测细胞凋亡。结果:构建的PGPU6/GFP/Neo载体成功转入HeLa细胞;转染48h后,HeLa-shVEGF1组HeLa细胞VEGFmRNA表达的抑制率为75.0%;与HeLa组和HeLa-shNC组相比,HeLa-shVEGF1组HeLa细胞凋亡率明显增加,P<0.01。结论:本研究构建的PGPU6-shRNA表达载体携带GFP便于观察细胞的转染情况,且不影响U6启动子的转录,同时有效沉默了VEGF基因,明显增加HeLa细胞的凋亡,为未来肿瘤的治疗提供新途径。     

低剂量罗红霉素治疗慢性鼻窦炎并发鼻息肉的效果及对患者鼻腔通气、流涕量的影响

目的：探讨低剂量罗红霉素治疗慢性鼻窦炎并发鼻息肉的效果及对患者鼻腔通气、流涕量的影响。方法：选取2019年1月—2021年6月以来我院收治的102例慢性鼻窦炎并发鼻息肉患者,依据随机数字表法分为研究组和对照组,各51例。对照组应用常规药物治疗,研究组应用低剂量罗红霉素治疗。比较两组治疗疗效、生活质量评分、治疗满意度、临床症状改善情况、嗅觉功能缺损评分以及鼻腔总阻力。结果：研究组生理机能、生理职能、躯体疼痛、精神健康、总体健康各维度生活质量评分高于对照组（P<0.05）;研究组治疗总有效率为96.1%,高于对照组的77.6%(P<0.05);研究组治疗满意度为94.1%,高于对照组的70.6%(P<0.05);研究组头痛、鼻塞、流涕、嗅觉减退占比低于对照组（P<0.05）;治疗后,两组鼻腔总阻力及嗅觉功能缺损评分低于治疗前,且研究组低于对照组（P<0.05）。结论：慢性鼻窦炎并发鼻息肉患者应用低剂量罗红霉素治疗可有效增强治疗疗效,并促进患者各项临床症状均改善,还能使鼻腔总阻力明显减轻,确保患者鼻腔通气能尽快恢复正常,并在一定程度上增强患者对治疗的满意度,从而...     

圆弧青霉提取物诱发人羊膜细胞程序外DNA合成及合成抑制的研究

从食管癌高发区河南省林县的粮食中,分离出5株圆弧青霉(Penicillium cyclopiumWestling)用大米做培养基,25℃培养两周,经氯仿:甲醇等连续提取后,得到棕褐色膏状提取物。用其中的4株,诱发出了人羊膜FL细胞株的程序外DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis,UDS)与DNA合成抑制(DNA Synthesis Inhibition,DSI),与溶剂对照比较,具有显著性差异(P<0.05),并在一定程度上存在剂量效应关系;加S_9后,其生物学活性明显降低,推测此提取物中含有能引起人羊膜细胞DNA损伤的直接诱变剂。     

唐氏综合征产前筛查及诊断研究进展

唐氏综合征是新生儿最常见的染色体疾病,近年来有关唐氏综合征的产前筛查及产前诊断方式发展迅速。其中产前筛查方法由最初的超声、唐氏筛查,到现在的无创DNA及尿多肽,其方法逐渐趋于无创性,准确率也逐渐提升;产前诊断也向精准、短耗时、多基因发展。本文介绍了近几年临床常用的产前筛查方法及产前诊断方式和最新的研究进展,并对常用的筛查及检查方法进行综述。     

联合培养中心肌细胞诱导结状神经节神经元的迁移及P物质的表达

目的：探测联合培养中心肌细胞对迷走神经结状神经节神经元的迁移和P物质表达的影响作用。方法：建立Wistar大鼠结状神经节与心肌细胞联合培养的模型,用倒置相差显微镜观察结状神经节与心肌细胞培养不同时间的活细胞生长状况。联合培养72、96h,用Holmes还原银染色法观察神经元的迁移,用免疫组织化学法观察P物质的表达。结果：联合培养72、96h,与单纯培养的结状神经节组织块相比,结状神经节与心肌细胞联合培养的标本中神经元迁出的数目明显增多（P＜0.05）。结状神经节与心肌细胞联合培养96h,探测到了P物质免疫反应阳性神经元和神经纤维。而在单纯结状神经节组织块培养72、96h以及结状神经节与心肌细胞联合培养72h的标本中,均没有探测到P物质的表达。结论：联合培养中心肌细胞可诱导神经元的迁移和神经递质P物质的表达。神经元在形态学上的发育成熟可能需要72h就可以完成,而在联合培养中神经递质合成的发育成熟则需要96h。神经元在形态学上的发育成熟并不能代表神经递质合成的发育就已经完成。这一结果对于进一步研究心肌细胞的选择性神经支配以及神经与心肌的相互作用开辟了一条新的研究途径。     

胚胎大鼠神经干细胞培养方法的改进

分别以DMEM/F12、2?7、20 ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子、20 ng/ml的表皮生长因子无血清培养液和5%胎牛血清培养液预先培养大鼠神经干细胞(NSCs)2~3 d后,换为无血清培养液;应用倒置显微镜和免疫细胞化学法对其进行观察和比较。结果用含胎牛血清培养液培养的NSCs聚球速度较无血清培养液明显加快,可提前3~4 d观察到NSCs球。细胞染色证实细胞系巢蛋白阳性,经血清培养液诱导分化后部分呈抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性,部分呈抗胶质纤维酸性蛋白阳性,表明可分化为神经元和胶质细胞。认为含血清培养液预先培养可以加快细胞培养速度,是获得NSCs的经济有效方法。     

坏死梭杆菌导致Lemierre综合征1例

患者男性, 21岁, 主因"间断发热、寒战伴头晕头痛2周"于2021年11月18日急诊收入院。患者诉2周前进食烧烤后出现发热, 体温最高可达42℃,伴畏寒、寒战、咽痛、头晕、头痛、乏力, 就诊于本院耳鼻喉科后, 查体见扁桃体有脓点, 快测降钙素原(procalcitonin, PCT)为37.27 ng/mL, 胸部CT检查未见异常, 考虑诊断为"急性化脓性扁桃体炎", 先后给予左氧氟沙星、阿奇霉素抗感染及甲泼尼龙控制炎症后上述症状未见明显好转, 为进一步治疗, 收入急诊病房治疗, 既往体健, 入院时查体:体温41℃, 脉搏98次/min, 呼吸频率23次/min, 血压120/60 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa), 患者神志清楚, 急性病容, 精神较差, 颈部浅表淋巴结触及肿大, 右侧较大约2.0 cm ×0.5 cm, 左侧较大约1.3 cm×0.7 cm, 质软, 活动度好, 界限清楚, 有压痛, 表面皮肤无红肿, 无破溃, 双肺呼吸音清, 未闻及干湿性啰音, 心脏听诊无杂音, 腹软, 无压痛及反跳痛, 双下肢无水肿。血常规检查白细胞计数10.49×109/L,中性...     

月见草油抵抗多囊卵巢综合征大鼠卵巢氧化应激

目的 探讨月见草油(EPO)对高脂饮食联合来曲唑所致多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠激素水平、代谢水平、氧化水平以及卵巢组织中NAD-依赖性去乙酰化酶Sirtuin-1(SIRT1)/转录因子叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路表达的影响。方法 72只大鼠共分为6组,12只为正常对照,其余60只大鼠喂食高脂饲料(40%脂肪)8周,并在喂食方案的最后3周,联合浓度为1 mg/(kg·d)的来曲唑灌胃21 d,制备PCOS大鼠模型。模型制备结束后经尾部血清激素水平分析,每组剔除偏差较大的模型大鼠2只,并把正常对照组和模型制备成功的大鼠分为6组,每组10只,分别为正常对照组、PCOS模型组、二甲双胍组、EPO小剂量组、EPO中剂量组、EPO大剂量组。ELISA方法和生化酶法检测各组血清空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、睾酮(T)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA),苏木精-伊红(HE)染色观察各组卵巢形态,免疫组织化学和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测卵巢组织SIRT1/...     

疏肝调中汤加减对肝胃不和证慢性胃炎患者胃功能及炎症因子表达的影响

目的：研究慢性胃炎辨属肝胃不和证患者运用疏肝调中汤加减的疗效。方法：采用前瞻性研究,选择2019年1月-2020年12月就诊的60例慢性胃炎且辨证属肝胃不和证的患者,采用随机数字表法,分为对照组和治疗组,每组30例。对照组予胃苏颗粒治疗,治疗组予疏肝调中汤治疗。对照组30例予胃苏颗粒治疗,治疗组30例予疏肝调中汤治疗。连续治疗1个月后进行指标评价。结果：治疗后,治疗组中医证候积分、胃功能三项（胃泌素-17、胃蛋白酶原Ⅰ、胃蛋白酶原Ⅱ）、血清炎症因子（表皮生长因子、白细胞介素-32、转化生长因子-β1）低于对照组（P <0.05）,一氧化氮高于对照组,慢性胃炎患者报告结局指标量表之慢性胃炎模块（SSDPRO-CG）评分优于对照组（P <0.05）,总有效率高于对照组（P <0.05）。结论：疏肝调中汤加减治疗肝胃不和证慢性胃炎可有效调节患者的胃功能及炎症因子水平,显著提升疗效,使患者的生活质量获得较大改善。     

儿童视力自动检测系统在婴幼儿视力评价中的初步应用

目的: 采用北京大学第一医院与北京大学信息科学技术学院、心理与认知科学学院共同研制开发的儿童条栅视力自动检测系统(AACP)对婴幼儿视力进行测量, 探讨该系统的应用价值。方法: 前瞻性临床研究。于2018年2月至2021年10月利用北京大学多个院系联合研制开发的AACP, 对5个月～6岁儿童进行视力自动检测, 并同时使用条栅视力检测卡(TAC-II)进行人工检测, 将2种检测所得结果做对比研究。采用Wilcoxon检验进行2种视力间的差异比较, Spearman相关进行相关性分析, Bland-Altman图进行一致性分析。结果: 33例(66眼)3～6岁儿童全部完成AACP与TAC-II的双眼视力检测, 其中30例(54眼)儿童完成AACP与TAC-II的单眼视力检测, 双眼视力检查完成率100%, 单眼检查完成率90.0%。194例(388眼)5～30个月龄婴幼儿中, 141例(282眼)完成2种检测方法的双眼视力检测并得到有效数据, 完成率为72.7%。33例3～6岁儿童的AACP与TAC-II双眼视力及单眼视力均呈正相关(r=0.40, P=0.021;r=0.55, P<...