GPC3真核表达载体的构建及其对肝癌细胞功能的影响

目的：通过构建GPC3增强型绿色荧光蛋白真核表达载体，研究磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（Glypican-3，GPC3）促细胞增殖效应的影响，探讨GPC3基因对肝癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法：应用基因重组技术及限制性内切酶酶切构建并鉴定pEGFP-IRES-N1-GPC3增强型绿色荧光蛋白真核表达载体，经脂质体Lipofectamine^TM 2000介导转染BEL-7404后，通过G418筛选出抗性克隆，应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测GPC3 mRNA在真核细胞中的表达，并在激光共聚焦显微镜下观察目的蛋白在真核细胞内的表达情况，采用免疫荧光法和流式细胞仪检测GPC3对细胞增殖效应的影响。Transwell小室实验检测BEL-7404肝癌细胞的侵袭能力。结果：限制性内切酶酶切分析、重组质粒测序鉴定表明为正确重组子，荧光显微镜下可见转染的真核细胞胞膜区发出强绿色荧光，RT-PCR法表明GPC3在真核细胞中成功表达，转GPC3的BED7404肝癌细胞与对照组相比有促细胞增殖及侵袭和转移效应。结论：构建完成真核表达重组质粒pEGFP—IRES-N1-GPC3；GPC3基因在BEL-7404中成功表达；GPC3可促进肝癌细胞的增殖，其通过增加细胞的侵袭能力而促进肝癌的转移。     

肿瘤转移相关基因MTA1与肿瘤关系的研究进展

转移是恶性肿瘤致死的主要原因之一，它是一系列有序事件的复杂演进过程，受着多种基因正负作用的调控。因此了解肿瘤转移所涉及的基因和基因产物是目前国内外一项重要的研究课题，并取得了一定进展。本文就目前已经成功分离出的肿瘤转移相关基因MTA1（metastasis—associated 1，MIA1）的结构与功能、MTA1基因家族及其与肿瘤的关系等方面研究进展进行综述。     

索拉非尼治疗肝细胞性肝癌45例疗效评价

目的：评价索拉非尼治疗肝细胞性肝癌的疗效及安全性。方法：总结2008年1月至2009年12月应用索拉非尼治疗的45例肝细胞性肝癌患者的临床资料。结果：33例接受过1次以上实体瘤治疗疗效评价标准（RECIST）评价者中,服药后6周RECIST评价时27例肿瘤稳定,5例肿瘤进展,1例肿瘤出现病灶缩小,10例美国东部肿瘤协作组（ECOG）体力状况评分改善;不良反应一般在服药后1～2周左右出现,在所有接受治疗的患者中,共14例发生较严重（3～4级）的不良反应,不能耐受不良反应而减少药物剂量者11例,3例停药。药物不良反应在减少剂量并予一定对症支持治疗后大多可以缓解。结论：索拉非尼可延长晚期肝细胞性肝癌患者的肿瘤无进展生存时间,且耐受性良好,是治疗晚期原发性肝癌的新选择。     

基于TCGA数据库分析肝细胞肝癌组织中HMMR表达与患者临床特征及预后的相关性

目的:研究透明质酸介导的运动受体（hyaluronan-mediated motility receptor,HMMR）的表达与肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的发生发展以及预后的关系。方法:在本研究中,我们通过从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库中下载HCC有关的数据进行生物信息学分析,探讨HMMR表达在HCC发生、发展和预后中的价值。根据HMMR mRNA表达的中位值将患者分为两组(HMMR高表达组和HMMR低表达组),应用Kruskal-Wallis检验和Logistic回归分析HMMR表达与患者临床特征之间的关系,利用Kaplan-Meier和Cox分析观察HMMR表达对HCC患者生存的影响,并进行PPI蛋白互作网络、GO富集和KEGG通路分析。最后通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)验证HMMR mRNA在HCC组织样本中的表达。结果:HCC组织中HMMR的高表达与组织学分级(G3 vs G1,OR=2.675)、癌组织阶段(Ⅲ vs Ⅰ,OR=2.509）、T分期(T4 vs T1,OR=3.568)相关(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,HMMR高表达的HCC预后比HMMR低表达的患者差(P=6.858E-05)。Cox分析显示HMMR高表达是总体生存（overall survival,OS）的危险因素（HR:1.166,95%CI:1.027~1.324,P=0.018）。PPI蛋白互作、GO富集和KEGG通路分析鉴定了与HMMR存在相互作用的10个基因,分别为:FAM83D、CD44、TPX2、PLK4、AURKA、PLK1、NEK2、CDK1、BUB1及DLGAP5,它们主要富集在有丝分裂细胞周期相变的调控、细胞周期过程、ECM-受体相互作用、FoxO信号通路、EB病毒感染等。qRT-PCR结果显示,HMMR mRNA在HCC癌组织中高表达（P＜0.05）。结论:HMMR mRNA的高表达与HCC的发生发展密切相关,是HCC预后不良的独立危险因素。     

树突状细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞体外对自体肝癌细胞杀伤活性的研究

目的:探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对自体肝癌细胞杀伤活性.方法:从肝癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC来激活TIL,观察TIL在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性.结果:DC激活的TIL具有很高的对自体肝癌细胞杀伤活性,杀伤率为(89.39±3.05)%,明显高于未经DC激活的TIL、CD激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率.结论:肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫.     

岩黄连对肝癌介入化疗栓塞后肝损害的治疗

经皮穿刺超选择性肝动脉插管药物灌注栓塞术(TACE)是目前治疗不能手术切除的中晚期肝癌常用方法 ,其临床价值已被国内外学者所认可 ,临床逐渐广泛应用。然而 ,TACE可导致肝功能下降 ,损害正常的肝组织 ,甚至可导致或加重肝硬化。岩黄连具有促进肝细胞再生及消炎、利胆 ,提高机体免疫功能 ,增强抗肿瘤作用。为了评价岩黄连对肝癌介入治疗后肝功能损害治疗效果 ,2 0 0 0年 2月至 2 0 0 1年2月我院对 2 3例肝癌行 TACE后采用岩黄连治疗 ,并与常规护肝治疗的 2 3例作对比 ,结果报道如下。1　资料与方法1.1　一般资料 :原发性肝癌 4 6例 ,男…     

microRNA-224在肝细胞癌组织和血浆中表达的相关性

目的 探讨microRNA-224(miR-224)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者癌组织与血浆中表达的相关性.方法 采用qRT-PCR检测20例HCC患者的癌组织、癌旁组织、术前血浆及20例健康人血浆的miR-224表达量,比较癌组织与癌旁组织、HCC患者与健康人血浆miR-224的表达差异,分析miR-224在HCC血浆与癌组织中表达的相关性.结果 ①miR-224在HCC癌组织、癌旁组织、血浆及健康人血浆中的平均表达量分别为(0.14±0.04)、(0.02±0.01)、(1.15±0.26)和(0.11±0.03).癌组织miR-224表达量高于癌旁组织(P＜0.01),HCC患者血浆miR-224表达量高于健康人血浆(P＜0.01);②miR-224在HCC血浆及相应癌组织中的相对表达量呈正相关(P＜0.001).结论 HCC血浆miR-224表达量高于健康人群,并与肝癌组织表达量呈正相关,血浆miR-224有可能成为一种新的血清学指标用于肝癌诊断.     

热消融联合消融灶周边注射CpG ODN抑制小鼠肝癌生长的研究

目的 探讨热消融联合消融灶周边注射CpG ODN治疗对小鼠肝癌的影响及继发免疫效应的抗肿瘤效果.方法 建立Hepa1-6小鼠皮下肝癌动物模型32只,随机分为热消融治疗组、热消融联合CpG ODN治疗组、CpG ODN治疗组和对照组,每组8只.每组各6只接种肿瘤细胞后第7天、第14天给予治疗,测量小鼠肿瘤体积,观察荷瘤小鼠存活率及消融灶内淋巴细胞和HSP70变化,另8只第7天给予治疗,30 d后对侧接种等量肿瘤细胞,1个月后处死,观察小鼠生存状况及对侧肿瘤生长情况.结果 （1）各实验组小鼠观察期内死亡率均低于对照组（P＜0.05）,各实验组对侧均无肿瘤生长,对照组再接种肿瘤生长率为100%（3/3）,两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）;（2）各实验组小鼠与对照组相比,肿瘤体积显著缩小（P＜0.05）,联合治疗组肿瘤缩小更显著;（3）各实验组较对照组有较多淋巴细胞浸润（P＜0.05）,联合治疗组数量最多;（4）各实验组与对照组相比有更多HSP70表达（P＜0.05）,联合治疗组HSP70表达最多,与其余实验组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CpG ODN对荷瘤小鼠具有明显的免疫增强作用,CpG ODN联合热消融治疗小鼠肝癌有效,且能减少复发.     

浅谈如何提高教师在医学院校校本研究中的作用

高等医学教育培养的医学人才,不仅要求医学生具备丰富的医学知识和娴熟的专业技能,而且也要求医学生具备高尚的职业道德,以适应时代和社会的要求。如何将医学生培养成具有高度自律性、医德高尚、知识广博、具有进取意识和良好心理素质、能够适应医学技术发展要求的精尖人才,是医学院校的重要责任。而要完成这些教学任务,现阶段在医学院校实行校本研究有着十分重要的意义。校本研究是指有目的的、有计划的、以学校教师为研究主体,以本校教育教学问题为出发点,解决本校教育教学问题,提高教师的研究水平,带动师资队伍建设水平的提高,推进素质教育,提高教育教学质量为归宿点的教育研究活动。以校为本,是新世纪学校教育改革与发展的全新的教育理念。要实施以校为本的教研,就要充分发挥教师个人、教师集体和教学专业人员的作用。那么,在校本研究中如何发挥教师的作用呢?1宽松自由的学术研究氛围推行以教师为中心、以学校为本位的教研制度,是推进课改实验、提高教师专业水平的必由之路。传统的教研基本是自上而下的,教师很少有机会发表自己的意见,教师只是研究或实验的辅助者、配合者,而不是真正的研究主体,因此教师的积极性、主动性难以发挥。这种管理模式,已经远远不能适应课程改革的需...