外源性单磷酸鸟苷环二聚体对变形链球菌基因表达的影响*☆

背景：前期研究证实变形链球菌内部存在单磷酸鸟苷环二聚体信号通路,该通路介导变形链球菌的生物膜形成及在体外牙釉质表面的黏附。 目的：以基因芯片技术分析单磷酸鸟苷环二聚体对变形链球菌生物学特性的影响。 方法：以外源性单磷酸鸟苷环二聚体干预变形链球菌UA159,提取其总RNA,并以标准菌株的总RNA作为对照,与变形链球菌全基因组芯片杂交,筛选差异基因。 结果与结论：外源性单磷酸鸟苷环二聚体干预后,变形链球菌中glgA、glgB、msmF、gftA、lacG、lepB、rgpAc、bacC 、apt69个基因表达上调,Hrc、ProC、HprT、Pdp、Glk、cdsA共6个基因表达下调。所获得的差异基因主要与细胞趋向性和生物膜形成、信号转导、糖代谢、等途径相关。说明单磷酸鸟苷环二聚体影响变形链球菌的致龋性。 关键词：基因芯片;单磷酸鸟苷环二聚体(c-di-GMP);信号通路;变形链球菌;生物膜;致龋性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.08.027     

变形链球菌gcp基因敲除菌株表达谱基因芯片

背景：前期研究中经证实变形链球菌内部存在单磷酸鸟苷环二聚体信号通路,构建了变形链球菌gcp基因敲除菌株。 目的：比较变形链球菌野生菌种和gcp基因突变菌株基因表达的差异情况,筛选与生物膜相关的基因,进入后续研究。 方法：提取两种细菌的总RNA,反转录后分别用cy3和cy5染色。与基因芯片杂交后,扫描结果,进行数据分析,获取差异基因信息,对筛选的基因进行Real-Time PCR验证。 结果与结论：差异基因主要与糖代谢、生物膜形成有关,选择了2个基因进行验证,PCR结果与芯片结果相符合。变形链球菌gcp基因敲除后,突变菌株ahpC基因表达上调,磷酸转移酶系统基因表达下调,说明这2个基因与c-di-GMP信号通路的下游途径相关。     

口腔修复膜材料在牙种植中引导骨再生的效应

背景:海奥口腔修复膜作为可降解的脱细胞真皮基质,是用于修复口腔黏膜及软组织缺损的材料,由于具有可降解、易于制备、保存时间长、运输和贮存方便、成骨效果好等优点,现在也己开始作为引导骨再生材料用于种植.目的:验证海奥口腔修复膜在种植中作为屏障膜引导骨再生的临床效果.方法:选择种植术区存在骨缺损的患者72例,均为单颗牙缺失,按随机原则分为对照组和试验组,分别采用博特医用胶原膜和海奥口腔修复膜行"引导性骨再生"技术修复骨缺损.骨移植物均为天博骨粉,术后1,3个月进行X射线检查及临床检查.二期手术时,对新生骨组织量进行评估.结果与结论:二期手术时,72例患者的种植体均已与骨组织形成骨结合,试验组平均骨生长效果为92%,对照组平均骨生长效果为91%,所有种植体均顺利完成种植义齿修复.修复后随访3～24个月,种植体均能成功地恢复咬合功能.结果提示海奥口腔修复膜在牙种植中引导骨再生的效果与博特医用胶原膜相当,在临床上可以作为骨再生引导膜使用.     

X线钼靶联合超声检查在乳腺肿块鉴别诊断中的价值

目的探讨X线钼靶联合超声检查在乳腺肿块鉴别诊断中的价值。方法选择女性BI-RADSⅣ级病变乳腺肿块患者100例。所有病例均经临床常规查体、X线钼靶检查、超声影像学检查,并与病理分析结果对比。回顾性分析X线钼钯检查、超声影像检查表现,总结两种检查方式的诊断特点,比较两者检查的准确率、漏诊率、误诊率。结果在肿块检出方面,X射线钼靶检查影像学特征主要为片状致密影、结节状影及钙化影等影像学表现,诊断阳性率为70.73%;超声检查表现多为内部呈现低回声的圆形、椭圆形肿块、中央部存在或不存在沙砾样的钙化结节影,边缘清晰或不清,诊断阳性率为83.73%,超声检出乳腺肿块的结果优于X线钼靶(P<0.05);两者联合检查时,阳性诊断结果提升至95.12%,与X线钼靶、超声单项检查相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。在钙化点的检出中,X线钼靶单独检查的诊断阳性率明显高于超声检查(P<0.05),两者联合应用诊断阳性率显著高于单独检查(P<0.05)。X线钼靶检查的诊断准确率为79.00%,误诊率为13.00%,漏诊率为8.00%;超声检查准确率为70.00%,误诊率为16.00%,漏诊率14.00%;两者联合应用诊断准确率明显高于单一检查,误诊率与漏诊率均明显低于单一检查(P<0.05)。结论超声影像与X线钼靶对乳腺BI-RADSⅣ级病变的检查均有部分的漏诊及误诊,对于一些诊断难点的鉴别诊断存在盲区,二者联合则可优势互补,减少乳腺BI-RADSⅣ级病变漏诊、误诊的发生,协助准确诊断乳腺良、恶性肿块。     

前哨淋巴结活检术辅助手术治疗乳腺癌及对腋窝淋巴结分期的预测作用

目的探究前哨淋巴结活检术(SLNB)辅助手术治疗乳腺癌及对腋窝淋巴结分期的预测效果。方法选取2018年1月至2020年12月本院收治的82例乳腺癌患者作为研究对象,随机分为两组,各41例。对照组采用腋窝淋巴结清扫术与乳腺全切术治疗,观察组根据前哨淋巴结活检术病理结果确定是否对患者实施腋窝淋巴结清扫术治疗。比较两组手术时间、住院时间、血清肿瘤标志物及并发症发生率,并探究前哨淋巴结活检术对淋巴分期的预测价值。结果观察组手术时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组血清肿瘤标志物水平比较差异无统计学意义;治疗后,观察组血清肿瘤标志物水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组并发症发生率为12.20%,低于对照组的39.03%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组前哨淋巴结活检检出率为97.56%(40/41),在每例患者中发现1~3枚前哨淋巴结,前哨淋巴结共57枚。通过开展HE染色和连续切片,发现前哨淋巴结阳性率为41.46%(17/41),其中微转移4例。结论乳腺癌患者开展手术治疗前行前哨淋巴结活检术,能有效评估腋窝淋巴结情况,准确判断是否开展腋窝淋巴结清扫术,降低患者术后并发症发生率,缩短手术时间与住院时间,促进机体恢复。     

三伏天穴位敷贴疗法防治咳喘病的研究

三伏天穴位敷贴疗法是在＂冬痛夏治＂思想指导下防治咳喘的中医药特色手段,有独特的优势,此篇论述从敷贴药物、穴位、时间等论治三伏天穴位敷贴疗法防治咳喘病的中医外治进展.     

甲状旁腺素受体真核表达载体的构建及稳定转染HEK293细胞系的建立

目的构建小鼠甲状旁腺素受体(PTHR)及其突变受体(DSEL)全长结构基因真核表达载体,建立稳定高表达PTHR及DSEL的HEK293细胞系,以应用于甲状旁腺素(PTH)模拟肽活性药物筛选及其信号通路的研究。方法通过双酶切、胶回收方法分别纯化目的片段(PTHR、DSEL基因)和质粒pcDNA3.1(+),二者分别由DNA限制性内切酶EcoRⅠ与NotⅠ双酶切,经T4DNA Ligase连接的方法将PTHR、DSEL基因克隆到质粒表达载体pcDNA3.1(+)中,采用测序方法及DNA限制性内切酶EcoRⅠ与NotⅠ双酶切方法鉴定重组质粒,脂质体转染法将重组体pcDNA3.1(+)-PTHR、pcDNA3.1(+)-DSEL及空质粒pcDNA3.1(+)分别转染至HEK293细胞,经G418筛选抗性细胞克隆,、RT-PCR及ELISA检测转染细胞PTHR、DSEL的表达情况。结果重组质粒经基因测序及DNA限制性内切酶EcoRⅠ与NotⅠ双酶切证实质粒表达载体pcDNA3.1(+)-PTHR、pcDNA3.1(+)-DSEL构建正确。重组体经脂质体法转染HEK293 48 h后,经G418筛选3周得到细胞抗性克隆,ELISA检测到PTHR、DSEL基因在重组质粒表达载体pcDNA3.1(+)-PTHR、pcDNA3.1(+)-DSEL转染的HEK293中成功表达。RT-PCR方法检测到PTHR、DSEL基因在转录水平的表达。ELISA方法检测到重组质粒转染的HEK293中,加入甲状旁腺激素刺激后,PLC、cAMP蛋白表达量远高于空质粒pcDNA3.1(+)转染的HEK293中PLC、cAMP的表达。结论成功构建了稳定高表达PTHR、DSEL的HEK293细胞,该稳定转染细胞系的建立为进一步研究甲状旁腺素受体下游信号通道的分子机制以及筛选其模拟肽作用的活性奠定了实验基础。     

《历代中医肿瘤案论选粹》中乳岩医案用药规律分析

目的:通过分析《历代中医肿瘤案论选粹》收录的乳岩医案,总结其中证治经验。方法:筛选《历代中医肿瘤案论选粹》收录的乳岩医案中有方有药的医案,逐一录入中医传承辅助平台,采用软件集成的数据挖掘方法,对筛选出的医案进行用药规律分析。结果:通过对40个医案进行分析,确定了医案中常用中药出现频次及药物之间的关联规则,挖掘出6个核心配伍和3个新处方。结论:中医对乳岩证治存在一定的规律性,从中医临床医案总结出的乳岩中医证治规律,对临床实践具有一定的指导意义。     

耐多药结核病30例中医辨证分型探讨

通过对30例耐多药结核病患者的定期观察,发现耐多药结核病的中医症状分型大多偏向于体虚兼夹有湿邪,与中医理论长期认识的结核病的病理机制有别,提出中西医结合治疗耐多药结核病的方法应该是在规范的抗结核基础上,增加中医扶助正气,去除湿邪的方药为妥。     

两种镍钛器械根管预备效果的评价

目的:比较机用ProTaper、MTwo与手用ProTaper根管预备效率和根管壁清洁效果。方法:选择新鲜拔除的下颌第一前磨牙80个,随机分为A、B、C、D 4组,分别采用机用ProTaper、MTwo、手用ProTaper和不锈钢K锉进行根管预备,记录每一根管预备完成总时间;收集根管预备过程中推出根尖孔的碎屑,干燥后称重;采用扫描电镜观察预备后根管壁的清洁效果,并进行碎屑和玷污层评分。结果:B组根管预备时间最少,平均41 s,推出根尖孔的牙本质碎屑量也最少,平均为3.1 mg,与其他各组相比有统计学差异(P<0.05)。D组预备时间最多,平均为204 s,推出根尖孔的碎屑量平均为10.35 mg。A组和C组预备时间分别是68 s,73 s,推出根尖孔的碎屑量各为5.45 mg和5.3 mg。用扫描电镜观察根管壁并对各部位进行碎屑和玷污层的评分,各组冠1/3均比根尖部评分低。在同一部位,B组的评分低于其他3组,D组的评分高于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:与ProTaper和传统不锈钢K锉相比,Mtwo器械完成根管预备时间、推出根尖孔的牙本质碎屑量、根管壁清洁度等均优于前两者。