人脑胶质瘤P73等位基因缺失及转录水平的实验研究

目的 :探讨P73等位基因缺失及转录水平是否与胶质瘤发生有关。方法 :运用DNA限制性酶切片段长度多态性 ,在 5 6例胶质瘤 正常组织标本对中进行P73等位基因杂合子的鉴定并确定胶质瘤中P73等位基因杂合性缺失率 ;运用半定量RT PCR分析P73 mRNA在胶质瘤中的相对表达水平。结果 :胶质瘤中P73等位基因杂合性缺失率为 14 .3 % ;胶质瘤与正常对照中P73 mRNA的表达水平无显著差别。结论 :人脑胶质瘤的发生可能与P73基因异常无关。     

人脑胶质瘤中PTEN基因突变和蛋白表达的研究

目的 :研究人脑胶质瘤中PTEN蛋白表达和PTEN基因突变情况。方法 :应用免疫组化技术和聚合酶链反应 -单链构象多态性分析 (PCR SSCP)技术 ,检测 10 2例人脑胶质瘤中PTEN蛋白表达及PTEN基因突变。结果 :PTEN阳性染色主要定位于细胞质中。 10 2例中PTEN蛋白表达 5 5 / 10 2(5 3 9% ) ,高分化组 (Ⅰ级和Ⅱ级 ) 32 / 39(82 1% )与低分化组 (Ⅲ级和Ⅳ级 ) 2 3/ 6 3(36 5 % )之间差异有极显著意义 ,P <0 0 1;4 2例胶质母细胞瘤中共有 11例发生PTEN基因突变 ,突变率为 2 6 % (11/ 4 2 ) ;6 0例其他胶质瘤中仅 1例发生突变 ,胶质母细胞瘤突变率显著高于其他胶质瘤 ,χ2 =11 6 2 ,P <0 0 1。结论 :PTEN基因突变或缺失在人脑胶质瘤的发生发展中起重要作用 ,与肿瘤恶性分化程度密切相关     

诱导型一氧化氮合成酶在迟发性血管痉挛中的作用

目的　以大鼠迟发性脑血管痉挛模型为基础研究诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)在迟发性血管痉挛发展中的作用。方法　 3 2只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组 ,实验组枕大池二次注血诱导迟发性脑血管痉挛 ,对照组枕大池注射生理盐水。第 8天行脑血管造影 ,枕大池抽取脑脊液测一氧化氮 (NO)浓度。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )法和免疫组织化学法测定并评价iNOSmRNA和蛋白质在基底动脉、大脑中动脉和皮质中的表达。结果　颅内动脉血管减影提示对照组颈内动脉颅内段、大脑中动脉 (MCA)明显变细 ,大脑中动脉中段直径 (MD)与镫骨动脉中段直径 (SD)之比衡量大脑中动脉的管径显示实验组MCA管径较对照组MCA管径减少 3 0 %。对照组脑脊液中NO浓度为 (11.70± 2 .62 ) μmol/L ,实验组脑脊液中NO的浓度为(5 5 .67± 12 .84)μmol/L。iNOSmRNA和蛋白质表达于基底动脉、大脑中动脉和皮质 ,其中基底动脉表达最强。 结论　iNOS作为迟发性脑血管痉挛发展中的关键因素参与血管壁的迟发性损伤。     

星形细胞瘤中环氧化酶-2 mRNA及蛋白表达的意义

目的 :探讨星形细胞瘤组织中环氧化酶 2 (COX2 )蛋白、mRNA的表达及其与病理级别的相关性。方法 :用原位杂交的方法检测星形细胞瘤组织中COX2mRNA的表达情况 ;用免疫组化SP法检测同等标本中COX2蛋白的表达情况 ;并将表达情况与星形细胞瘤病理级别作相关性分析。结果 :COX2蛋白在星形细胞瘤表达的染色积分为 4 .5 6± 2 .32 ,正常脑组织染色积分为 1.2 1± 1.18,二者相比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ;低度恶性组(Ⅰ ,Ⅱ级 )染色积分为 1.84± 1.4 6 ,高度恶性组 (Ⅲ ,Ⅳ级 )染色积分为 6 .37± 3.6 2 ,二者相比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。COX2mRNA在星形细胞瘤表达率为 6 2 .6 9% ,在正常脑组织中呈阴性表达 ,二者比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ;COX2mRNA在低度恶性组和高度恶性组中表达率分别为 37.14 % ,87.5 % ,二者比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :COX2蛋白、mRNA在星形细胞瘤组织中高度表达 ,且表达率与病理级别密切相关 ;从基因水平和蛋白水平说明COX2基因在星形细胞瘤的生长和病理进程中发挥着重要作用。     

成体神经干细胞培养方法的建立

目的 探讨体外建立培养成体神经干细胞(MSC)的方法.方法 从6周龄大鼠脑组织中分离神经干细胞,用神经干细胞培养液[DMEM/F12培养液添加1%N2、2%B27、20 μg/L表皮生长因子(EGF)和20μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]使其稳定增殖,10%胎牛血清诱导其贴壁分化.倒置显微镜下观察神经干细胞形态学变化;流式细胞仪检测神经干细胞表面标记物巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇酶(NSE,成熟神经元的特异性标志)、半乳糖脑苷脂(Galc-C,成熟少突胶质细胞的标记物)的表达.结果 分离所得细胞能在体外传代培养,流式细胞仪检测显示Nestin阳性细胞为97.6%,细胞经胎牛血清诱导分化后能形成NSE、Galc-C阳性细胞.结论 采用无血清的神经干细胞培养液能培养出具有分化潜能的成体神经干细胞.     

选择性环氧合酶-2抑制剂对胶质瘤生长的影响

目的　观察选择性环氧合酶 (COX) -2抑制剂塞来昔布对人脑胶质瘤细胞株U2 5 1生长、细胞周期的影响以及对其凋亡的诱导。方法　采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT )比色法检测塞来昔布对细胞生长的抑制 ;用免疫组织化学检测细胞增殖核抗原 (PCNA)的表达 ;用流式细胞仪检测塞来昔布对其凋亡的诱导。结果　MTT检测表明细胞生长抑制率呈现一定的时间、剂量依赖性。PCNA检测发现经塞来昔布处理后PCNA指数明显下降 (P <0 .0 5 )。2 0 0 μmol/L塞来昔布处理胶质瘤细胞 8h后 ,流式细胞仪检测出现典型的凋亡亚二倍体峰 ,且峰值随处理时间的延长而增加 ,细胞凋亡率随处理时间的延长而呈现增加趋势 ,方差分析各组间差异具有统计学意义。结论　塞来昔布能有效抑制体外培养的人脑胶质瘤细胞生长 ,并呈时间浓度梯度 ;塞来昔布能诱导其发生凋亡。     

脑膜瘤MMP-2、MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达及其意义

目的 :研究基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9(matrixmetallo proteinase ,MMP 2、MMP 9)及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase ,TIMP 1)mRNA在脑膜瘤组织中的表达及其与肿瘤浸润性的关系。方法 :用原位杂交法检测 35例脑膜瘤组织中MMP 2、MMP 9、TIMP 1mRNA的表达。比较肿瘤浸润组与非浸润组的差异。结果 :脑浸润组MMP 2、MMP 9表达阳性率较无脑浸润组明显增高 (P <0 .0 5 ) ;MMP 2、MMP 9的表达与硬膜浸润、颅骨浸润无关 (P >0 .0 5 ) ;TIMP 1在各组肿瘤中均高表达 ,但与肿瘤浸润性无关 (P >0 .0 5 )。结论 :MMP 2、MMP 9和TIMP 1在脑膜瘤的脑浸润中起关键作用     

结节性硬化并室管膜下巨细胞星形细胞瘤

患儿，男，12岁，因进行性头昏3个月入院。患儿3个月前开始感到头昏，逐渐加重，无抽搐、呕吐、发热、复视等症状。无家族性遗传病病史。体格检查：智力同同龄儿，神志清楚，双瞳孔0．25cm，等大，光反射灵敏，视乳头无水肿，颜面部见沿鼻梁分布的红色斑疹，后枕部有-5cm×4cm大小的皮脂腺囊肿，脑膜刺激征阴性，四肢肌力、肌张力正常。头部CT检查发现左侧脑室稍高密度占位病变，左侧脑室扩大，双侧脑室室管膜旁见散在结节状高密度影（图1）。头部MRI平扫占位病变表现为位于左侧脑室体部呈稍长T1稍长T2信号的类圆形肿块，散在的结节状影表现为等T1短T2信号，呈烛滴样外观（图2）。增强扫描发现占位病变明显强化，而室管膜旁结节状影无强化（图3）。     

脑膜瘤复发的多因素研究(英文)

目的探讨诸多临床因素和影像学特征对脑膜瘤复发的影响。以便能有效地早期预防和控制脑膜瘤复发,改善其预后。方法回顾1993～1997年武汉大学中南医院神经外科经手术治疗脑膜瘤患者145例,对其临床诊治过程和影像学资料进行回顾性分析,发现其中资料齐全的有83例,分析其临床因素如性别、年龄、手术切除程度、组织学类型和影像学特征如瘤周水肿、肿瘤形状、肿瘤大小、骨质改变、肿瘤部位、钙化、瘤周边界、CT 增强形态。应用 SPSS 11.07软件,进行单因素分析和多因素分析。多因素分析应用二值多元 logic 回归模型,以诸多临床因素和影像学特征作为自变量,复发与否作为因变量。结果经单因素分析显示:肿瘤形状、肿瘤大小、瘤周水肿、组织学类型,手术切除程度、肿瘤部位和 CT 增强形态与脑膜瘤复发有明显关系。多因素分析显示:肿瘤形状、肿瘤大小、肿瘤部位、瘤周水肿、组织学类型、手术切除程度、CT 增强形态是影响脑膜瘤复发的主要因素。其它因素在单因素分析及多因素分析中均显示对脑膜瘤复发无明显影响。结论脑膜瘤手术切除程度、组织学类型和 CT 扫描增强对脑膜瘤复发有明显影响。可作为预测脑膜瘤复发的显著危险因子和标准。