儿童腹泻病原菌检测及大肠杆菌基因型分析

目的 了解不同检测方法对儿童腹泻病原菌的检出情况及易感致泻性大肠杆菌的基因型特征.方法 收集2013年5-10月在感染消化科就诊的腹泻患儿粪便标本,选择性培养基分离培养大肠杆菌、志贺菌和沙门菌,同时直接进行3种病原菌检测;采用8对特异性引物对大肠杆菌进行基因型分析.结果 122例腹泻标本中细菌培养法检出率为大肠杆菌80.3％,志贺菌25.4％,沙门菌24.6％;标本DNA直接PCR法为大肠杆菌84.4％,志贺菌41.0％,沙门菌49.1％.大肠杆菌基因型检测为EHEC (47.5％)、EPEC(17.2％)、EAEC(4.9％)、ETEC(3.3％)、EIEC(0.8％).结论 与培养法相比,标本DNA直接PCR法可以提高检出率,建议细菌培养法和PCR法联合应用以互补优势.2013年夏季北京地区儿童腹泻的主要病原菌为大肠杆菌,基因型以EHEC和EPEC为主.     

慢性髂静脉闭塞的血管腔内治疗

目的 总结慢性髂静脉闭塞血管腔内治疗的技术要点及注意事项.方法 回顾性分析2006年2月至2010年8月15例慢性髂静脉闭塞的患者血管腔内治疗的临床资料.患者年龄35～81岁,平均(62±7)岁,病变均位于左下肢.患者临床CEAP分级:3级占33.3%,4级40%,5级13.3%,6级13.3%.患肢深静脉造影显示:15例患者左髂静脉完全闭塞,14例累及股总静脉;9例股浅静脉阻塞;对于股浅静脉阻塞的患者,均可见股深静脉显影.结果 术中、术后无重大并发症.1例因股静脉穿刺点不合理导致腔内治疗失败,技术成功率93.3%.支架平均长度(18.4±1.2)cm.12例(80.0%)患者支架延伸至腹股沟韧带远端.术后平均随访时间(11.6±2.4)个月,术后6个月支架一期通畅率92.9%.其中10例(66.7%)症状完全缓解;3例(20.0%)改善,1例(6.7%)症状无明显改善,1例(6.7%)症状恶化.结论 运用血管腔内技术治疗慢性髂静脉闭塞,方法安全,效果确切,近期通畅率满意.

Abstract：

Objective To present clinical results of endovascular treatment of total iliac vein occlusions and to discuss the technique details of this treatment. Methods From Feb 2006 to Aug 2010,15 patients with chronic total occlusive lesions of the iliac vein and adjacent vein segments underwent endovascular treatment. Average age was (62 ±7) years (range 35 to 81 years), the male/female ratio was 12: 3. Clinical score of CEAP was grade 3 in 33. 3%, grade 4 in 40%, grade 5 in 13. 3%, and grade 6 in 13.3%. Venography showed left iliac vein was occluded in all 15 patients, common femoral vein was occluded in 14 patients, and superior femoral vein was occluded in 9 patients, however profounder femoral vein was patent in these patients with superior femoral vein being occluded. Results No postoperative major morbidity or mortality was seen. The technique success rate was 93. 3%. Treatment failure was caused in one case for a wrong selection of the femoral vein approach site. The average length of stent was 18. 4 cm.In 12(80. 0% ) stents crossed the inguinal ligament. The average follow-up time was 11.6 ± 2. 4 months.The primary patency rates of the stents at 6 months were 92. 9%. 10 (66. 7% ) patients were asympotomatic, 3(20% )were improved, 1 (6. 7% ) was unchanged, and 1 (6.7%) was worse, compared to before intervention. Conclusions Endovscular recanalization and stent placement is a safe and effective treatment for chronic total occluded iliac veins, with good patency, significant symptom resolution, and minimal morbidity in the short term follow-up.     

肺炎支原体P1黏附因子主要抗原表位的表达及其临床应用研究

目的 探索肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1蛋白作为抗原成分在临床血清抗体检测中的应用.方法 通过生物信息学分析P1基因主要抗原决定簇,选择其分值较高的部位进行原核表达、纯化,并进行Western blot鉴定,用纯化后的蛋白免疫小鼠,评价其免疫原性,同时用其作为抗原,采用ELISA方法检测肺炎支原体患儿血清抗体并与全菌体抗原进行比较.结果 成功构建了pET-28C-P1-534原核表达载体,经表达、纯化后获得了相对分子质量为26×103的融合蛋白;Western blot检测其能与Mp阳性血清发生特异性反应;利用纯化的重组蛋白免疫小鼠,能诱导小鼠产生特异性免疫应答,抗体滴度可达 1∶2000;用此蛋白作为抗原成分检测患儿血清,其敏感性和特异性分别为85.00%及97.67%.结论 重组表达的P1-534蛋白具有良好的免疫原性,作为新的抗原成分其敏感性和特异性优于全菌体抗原,为肺炎支原体抗原成分及其蛋白保护作用的研究奠定了基础.

Abstract：

Objective To study the application of P1 adhesin protein epitopes in diagnosis of Mycoplasma pneumoniae(Mp) infected patient. Methods The major epitope(P1-534) of P1 adhesin protein were predicted by ProPred and ANTIGENIC according to its primary structure. The high value fragment was cloned into a constructed recombinant vector. The gene was induced to express fusion protein in E. coli host strain BL21(DE3) and the fusion protein was identified by Western blot. BALB/c mice were immunized with purified protein to test its immunogenicity. Then the purified protein was used as antigen to test the serum of Mp infected patient by ELISA, and compared with the Mp whole cell antigen. Results The P1-534 protein was successfully expressed and purified. ELISA data showed that P1-534 protein could elicit high levels of IgG in immunized mice, the sensitivity and specificity of P1-534 were determined to be 85.00% and 97.67%, while the Mp whole cell antigen were 72.50% and 74.42%. Conclusion The results conformed that the recombinant epitope has certain immunogenicity,and its sensitivity and specificity are better than Mp whole cell antigen. P1-534 protein can be used as an antigen for immunodiagnosis of Mp infection.     

别让您的血管过早硬化

动脉硬化是一种全身性疾病,它是由于输送血液的血管发生了硬化,造成了血管狭窄或闭塞,导致局部组织得不到充足的氧气和营养,致使组织缺氧和坏死,可发生于全身各个部位。而当发生在腿部时,会引起下肢供血不足,行走困难,严重者会导致足部坏死或溃破,临床上称为下肢动脉硬化闭塞症。如治疗不当,甚至有截肢或生命危险。国内有报道称,60岁以上的人群患病率为164％,     

2011年夏季北京地区儿童腹泻病原菌监测结果分析

目的监测分析2011年夏季北京地区儿童腹泻主要病原菌,为该地区儿童腹泻病原的快速诊断与防治提供依据。方法收集2011年夏季在该院感染消化科就诊的腹泻患儿粪便标本,提取粪便标本DNA,设计特异性引物建立PCR方法对易导致儿童腹泻的最常见的3种病原菌进行检测,部分阳性结果测序验证,并与以往腹泻病原菌监测结果进行比较分析。结果在259例腹泻患儿中,总病原菌的检出率为69%,其中致腹泻型大肠杆菌属检出率为64%,志贺菌属检出率为15%,沙门菌属检出率为4.2%;男女儿童致病菌检出率、各年龄组间和急慢性腹泻天数比较差异均无统计学意义。本监测结果显示,致腹泻型大肠杆菌属是目前北京市引起儿童夏季腹泻的主要病原菌,其次为志贺菌属。结论 (1)2011年夏季北京地区引起儿童腹泻的主要肠道病原菌种类发生了明显的变化,以致腹泻性大肠杆菌属为主。(2)该研究建立的快速PCR法可检测多种儿童腹泻易感病原菌。     

急性下肢动脉重症缺血的疗效分析

目的 探讨急性下肢动脉重症缺血的临床治疗效果.方法 收集2014年1月-2016年7月就诊于上海交通大学医学院附属仁济医院急性下肢动脉重症缺血的病例共39例,依据患者病情分别进行了切开取栓或溶栓或吸栓或球囊扩张或支架置入等腔内治疗,观察其临床治疗效果和并发症.结果 39例患者中,发生死亡18例(18/39,46.2％),其中未手术患者5例,手术患者13例.34例手术者中,行大腿截肢术8例.顺利出院者21例中,失访2例,随访3 ～ 27个月,平均14.3个月.其中死于心脑血管或肿瘤疾病5例,有足下垂表现3例,行足趾小截趾2例,足部或小腿远端感觉缺失3例.结论 尽早采取适当治疗方法,并加强多脏器功能的管理,才能提高急性下肢动脉重症缺血的疗效.     

高同型半胱氨酸血症--血管疾病的一个独立危险因素(文献综述)

由各种原因引起的高同型半胱氨酸血症与血管疾病有着密切的关系。本文就高同型半胱氨酸血症引起的血管疾病及其机制的研究进展作一综述     

B族链球菌表面蛋白LrrG的分段表达及其免疫原性和功能研究

目的研究LrrG蛋白不同片段的免疫原性及保护功能,为B族链球菌(GBS)蛋白疫苗及组分疫苗的研究奠定基础。方法采用生物信息学的方法预测LrrG蛋白的抗原表位,结合该蛋白的一级结构特征构建3个多肽片段(Gn、Gr、Gc)并重组表达;通过免疫动物及萃取组织液检测其免疫原性;体外调理吞噬试验检测各多肽片段的保护功能。结果成功构建和表达纯化了Gn、Gr、Gc多肽片段,且3个多肽片段均可在小鼠血清诱导产生较高水平的特异性IgG抗体,Gn免疫原性好于Gr、Gc。Gr、Gc 30μg剂量的免疫原性均好于其10μg和50μg剂量。除了Gr在肺、直肠组织产生的IgA抗体有较明显升高外,Gn、Gc对黏膜及血清IgA无明显刺激作用。体外调理吞噬试验表明3个多肽片段的抗体均具有促进吞噬细胞对GBS的吞噬功能。Gr、Gc的调理吞噬活性高于Gn,与B细胞表位预测结果相符。结论重组多肽片段均具有较强的免疫原性,在一定免疫剂量范围内,血清特异性IgG水平呈剂量依赖关系;皮下免疫对黏膜免疫影响不大;调理吞噬作用可能是LrrG蛋白具有保护作用的机制,3个多肽片段均具有潜在保护作用,支持将其作为GBS蛋白疫苗及组分疫苗的候选成分。     

下肢静脉曲张何时手术最合适

提起下肢静脉曲张，大家可能不会觉得陌生，其典型表现就是小腿，甚至大腿内侧出现蚯蚓状突起的静脉团。客观地说，下肢静脉曲张并不是一种疾病，而是一个症状，可以由多种疾病引起。目前，医学上将其统称为下肢静脉功能不金。     

肺炎支原体黏附细胞器的结构与功能

肺炎支原体通过黏附细胞器实现在呼吸道的定植,导致社区获得性肺炎等疾病。黏附细胞器由表面结构和内部结构两部分组成。表面结构负责肺炎支原体与宿主细胞表面的结合,包括P1黏附素、P30黏附素、P40、P90。内部结构分为半透明区和核心结构,作用包括细胞器的形成、维持以及力的产生和传递。半透明区负责将碗状/轮状复合体产生的力传递至成对板。核心结构包括终端按钮、成对板和碗状/轮状复合体。终端按钮由HMW3和P65构成,确定肺炎支原体滑动方向。成对板由薄板、厚板组成,作为附着器形成的支架。薄板具备规律的六角形晶格排列,由HMW1和CpsG组成。厚板由HMW2构成。碗状/轮状复合体由P24、P41、P200、TopJ、Lon、MPN387组成,连接黏附细胞器和肺炎支原体的其余部分,负责力的产生或传递。本文就肺炎支原体黏附细胞器及其15个成分蛋白的结构与功能做一简要综述。