连翘果实化学成分积累动态的研究

<正>连翘为木犀科植物连翘Forsythia suapensa (Thunb.)Vahl的干燥果实。连翘的化学成分主要为挥发油类、连翘苷和连翘酯苷等木脂素类、齐墩果酸和熊果酸等三萜酸类等。在中医临床应用中,按采收期不同,连翘药材可分为青翘和老翘2种。但长期以来青翘的采摘时间不明确,有时还存在“抢青”现象,使连翘药材的质量不稳定;同时,在连翘规范化     

正交试验法优选柴胡中柴胡皂苷提取工艺

目的:以柴胡中柴胡皂苷a及柴胡皂苷d含量为评价指标,优选柴胡最佳提取工艺.方法:采用L9(34)正交试验设计对提取方法进行优选,FIPLC-ELSD法测定柴胡皂苷a及柴胡皂苷d含量.采用Agilent TOG8(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(50:50);流速:0.8 mL·in-1;柱温:20℃;ELSD为检测器.结果:最佳提取方法为回流1 h,加5%氨水甲醇30mL.结论:优选出的提取方法经方法学考察符合要求,可为柴胡中化学成分的提取提供参考,使分析结果准确、可靠.     

盾叶薯蓣四倍体株系生化指标及有效成分分析

目的:提高盾叶薯蓣药材的品质.方法:对诱导获得的盾叶薯蓣四倍体株系进行了试管苗生化指标及薯蓣皂苷元含量分析.结果:大部分四倍体株系APX、SOD和POD的活力高于或相近于二倍体株系,可溶性蛋白电泳谱带也表明,四倍体株系与对照株系相比具有一定的差异.经诱导获得的四倍体株系试管苗与对照株系相比薯蓣皂苷元含量有较大差异,大部分四倍体株系薯蓣皂苷元含量都超过了二倍体株系.结论:经诱导获得的四倍体株系在生理生化指标及有效成分含量方面与二倍体表现出明显差异,说明多倍体诱导可以作为盾叶薯蓣优良品种选育的途径.     

氮源和碳源对冬凌草愈伤组织生长及迷迭香酸的积累的影响

目的 研究碳源、氮源对冬凌草愈伤组织生长及其内迷迭香酸积累的影响.方法 改变培养基中蔗糖浓度和碳源种类,考察不同碳源及其浓度对愈伤组织生长和迷迭香酸积累的影响.在总氮源不变的情况下改变NO3-/NH4+的比例,考察不同NO3-/NH4+比例对愈伤组织生长和迷迭香酸积累的影响.结果 蔗糖是冬凌草愈伤组织培养中的最佳的碳源,其浓度为3%时,有利于冬凌草愈伤组织的生长和迷迭香酸的积累;NO3-/NH4+比例为1∶1时,愈伤增值倍数最高;NO3-/NH4+比例2∶1时,迷迭香酸的积累量最大.结论 实验确定了冬凌草愈伤组织培养的最佳碳源种类、浓度及氮源比例,表明不同碳源、氮源对冬凌草愈伤组织生长和次生代谢物合成有显著影响.     

不同炮制方法对香附中香附烯酮和α-香附酮的影响

基于高效液相法考察不同炮制方法对香附中香附烯酮和α-香附酮的含量的变化规律。取不同产地20批的香附,经醋制、四制和酒制炮制后;采用高效液相色谱法(HPLC)测定香附烯酮和α-香附酮的含量;利用单因素方差分析法比较香附不同炮制品的香附烯酮和α-香附酮的含量,采用Spearman相关分析探究香附烯酮和α-香附酮之间的相关性。在不同香附炮制品中,生香附和四制香附之间的香附烯酮含量差异具有统计学意义,生品香附烯酮含量高于四制香附;香附烯酮和α-香附酮含量呈负相关(r=-0.231,P<0.05)。不同产地香附中2种成分含量差异较大,香附烯酮含量经过醋制,酒制和四制后较生香附均下降,α-香附酮含量在醋制中含量较生香附降低,经过酒制和四制后有所升高。且随着香附中香附烯酮含量的升高,α-香附酮含量有一定程度的降低,这对香附不同炮制品的质量评价标准和炮制工艺的选择提供参考。     

基于中药质量标志物（Q-marker）的金银花指纹图谱体系的构建思路

中药指纹图谱的建立以及谱效关系的研究是目前检控中药质量的重要趋势,其以化学成分系统研究为基础,可用于评价生药、饮片、中成药的真实性、优劣性及稳定性,但受到诸多不稳定因素的影响以及缺乏与传统中医药理论的关联性。而中药质量标志物(Q-marker)的提出,为指纹图谱及谱效关系的研究提供了新的思路和方法。以金银花为例,探究基于中药Q-marker理论指导下,中药指纹图谱评价体系的研究思路与方法的建立。     

基于转录组的夏枯草WRKY转录因子的鉴定和表达特征分析

目的:利用生物信息学方法从夏枯草(Prunella vulgaris)转录组数据中筛选,鉴定夏枯草WRKY转录因子,并对其蛋白特征、表达水平进行分析。方法:从夏枯草转录组数据库中筛选WRKY转录因子,并对蛋白基序、理化性质、功能注释、系统进化、表达特性等进行分析,并预测其功能。结果:从夏枯草中共获得23条WRKY转录因子序列。序列结构分析发现,夏枯草WRKY蛋白均包含一个保守的WRKYGQK模块,通过与拟南芥同源蛋白进行进化分析表明,夏枯草WRKY蛋白可分为I和Ⅱ型2种类型;I组共有7个成员;Ⅱ组共有16个成员,Ⅱ组可进一步分为Ⅱ-b(3个),Ⅱ-c(5个),Ⅱ-d(3个)和Ⅱ-e(5个)4个亚组。夏枯草WRKY蛋白的理化特性分析结果表明,WRKY蛋白的氨基酸数在85～599个之间;相对分子质量在9 527.5～66 438.4 Da;理论等电点在5.01～9.83;其中c13719.graph_c0,c32199.graph_c0,c24547.graph_c0,c37881.graph_c0等可能在夏枯草次生代谢产物合成调控方面发挥一定的作用;c32199.graph_c0,c26537.graph_c0,c23728.graph_c0等可能在夏枯草病原菌的识别和防御中起到作用。使用夏枯草转录组数据库分析了23条WRKY转录因子在其茎、果穗、叶片的表达特性,结果表明不同组织中WRKY基因的表达水平差异显著。结论:该研究首次鉴定了夏枯草的WRKY转录因子家族结构特征和表达特性,为后研究讨夏枯草WRKY转录因子的功能提供了有用的信息。     

光质对冬凌草再生植株生长及次生代谢产物的影响

目的 研究不同光质对冬凌草再生植株生长及次生代谢产物积累的影响.方法 将再生植株置于不同光质的培养箱中,观察不同光质下再生植株的生长情况,并测定其中的次生代谢产物(冬凌草甲素、迷迭香酸)的含量.结果 绿光最有利于冬凌草再生植株生长及其体内冬凌草甲素和迷迭香酸的积累,其次为白光;红光对于冬凌草再生植株的生长及次生代谢产物的积累均不利.结论 不同光质对冬凌草再生植株生长及次生代谢产物(冬凌草甲素和迷迭香酸)积累均有很大影响.     

响应内生真菌侵染的地黄miR166家族鉴定及胁迫下的表达分析

目的：为了鉴定地黄miR166基因家族的成员,明确其家族成员在逆境下的响应模式。方法：采用高通量测序技术获得小RNA数据库,筛选地黄miR166家族成员,利用RNAfold分析其前体结构,DNAMAN和MEGA分别进行保守性和进化性分析;采用TargetFinder软件预测地黄miR166家族成员的靶基因;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）分析其家族成员在响应非生物胁迫中的表达模式。结果：鉴定到5条miR166,前体都具有完整的茎环结构;序列比对结果显示前体和成熟体保守性均较高;预测到48个miR166的靶基因,主要注释到HD-ZIPⅢ家族转录因子;表达特性分析表明,地黄经过内生真菌侵染后,miR160均呈上调表达,在非生物胁迫下其家族成员的表达情况不同,其中rgl-miR166b-5p在旱涝处理组及高低温处理中表达量分别都较空白组显著下调,与在内生真菌侵染下表达模式相反。结论：该研究结果初步明确了地黄miR166家族在响应生物胁迫和非生物胁迫下的表达模式,为地黄今后育种改良及相关研究提供理论依据。