人活化血小板单抗导向血栓免疫偶联物的制备及性质研究

目前血栓部位的检测技术大都存在着检测速度慢,灵敏度低,易造成误诊等不足。如果采用高亲和特异性的血栓单抗与核素标记相结合的导向显像方法进行检测,会使检测迅速、灵敏,使血栓的临床检测方法获得突破。单克隆抗体ＳＺ５１对血栓部位活化的血小板α颗粒膜糖蛋白ＧＭ...     

从生产胰岛素后的猪胰残渣中提取制备胰酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶的研究

在党的无产阶级教育方针指引下,从我国国民经济实际需要出发,我们在学校教学、科研、生产三结合基础上选择了胰脏综合利用这一研究课题,从生产胰岛素后的猪胰残渣中制备了胰酶、结晶胰蛋白酶、糜蛋白酶和具有高度专一性的胰蛋白酶抑制剂等多种生化药品,为扩大胰岛素和胰酶的生产开辟了一条新途径。通过调查了解,目前国内还没有一种较好的方法能从胰脏中同时大量制得胰岛素和各种酶类。几种产品不能同时兼得,造成互争原料,在一定程度上影响胰岛素的生产。国外曾报道从牛胰脏残渣中提取牛胰蛋白酶等,但因收率较低,方法繁杂,成本高,未见在生产中广泛     

锌诱导扁藻类金属硫蛋白的初步研究

用不同浓度的ＺｎＳ４对绿藻门（ｃｈｌｏｒｏｐｈｔａ）、绿藻纲（ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｃｅａｅ）、塔形藻亚目（Ｐｙｒａｍｉｍｏｎａ－ｄｌｎｅａｅ）、局藻科（Ｐｌａｔｙｍｏｎａｄａｃｅａｅ）、扁藻属（Ｐｌａｔｙｍｏｎａｓ）、亚心形扁藻（Ｐｌａｔｙｍｏｎａｓ ｓｕｂｃｏｒｄｉｆｃｒｍｉｓ）进行诱导培养,当 ＺｎＳＯ４浓度在１ｍｍｏｌ·Ｌ～－１以上时,随着ＺｎＳＯ４浓度的升高,扁藻的生长率逐渐降低,扁藻不能耐受８ｍｍｏｌ·Ｌ－１以上的ＺｎＳＯ４。对类ＭＴ提取液进行原子吸收测定,结果表明扁藻类ＭＴ的合成随着ＺｎＳＯ４浓度的升高而增大,诱导效果明显。用１ｍｍｏｌ·Ｌ～－１ＺｎＳＯ４诱导培养扁藻,每克湿藻能获得 ２．１ｍｇ类ＭＴ。     

小鼠金属硫蛋白-I的表达对HeLa细胞耐药性的影响

Hp SV2 - neo质粒作为载体 ,在 Eco RI酶切位点上插入小鼠金属硫蛋白 (MT- I)基因 ,然后用 DNA-磷酸钙介导的基因转移法将重组质粒转染 He L a细胞 ,经筛选得到表达 MT- I的抗性细胞克隆。经检测 ,G418抗性细胞内有 MT的特异性表达 ,表达量是未转染细胞的 2 .6倍。用不同浓度顺铂、阿霉素处理细胞 ,观察 MT- I基因的表达与 He L a细胞耐药性的关系。结果表明 :0 .1μmol/ ml顺铂作用细胞 72 h后 ,顺铂对转染和未转染 MT细胞的生长抑制率分别为 34%和 82 % (P<0 .0 5 ) ;半数细胞生长抑制浓度 (IC5 0 )分别为0 .144和 0 .0 6 1μmol/ ml,二者相差 2 .36倍。用 0 .2μmol/ ml阿霉素作用细胞 72 h后 ,对转染和未转染细胞的生长抑制率分别为 18%和 2 5 % ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结果表明 ,MT与肿瘤细胞的耐药性有一定相关性     

在大肠杆菌表达体系中以包涵体形式存在的真核生物蛋白质的分离…

在大肠杆菌中表达的含义二硫键真核生物的重组蛋白，往往以包涵体的形式存在，存在于包涵体的重组蛋白，因分子内及分子间二硫键的错配，而常常导致重组蛋白无生物活性，着重介绍了一些从包涵体中分离在正确配对的二硫键重组蛋白新的技术条件，总结了含有二硫键真核生物重组蛋白的不同分离和复性步骤及方法，并对重组蛋白在体外折叠的机理进行了探讨。     

利用蛋白质指纹图谱技术检测硒诱导金属硫蛋白实现大鼠肝纤维化防护作用

【目的】探索硒诱导金属硫蛋白及其对大鼠肝纤维化防护作用的蛋白质指纹图谱改变。【方法】利用表面增强的激光解析离子化-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术测定硒对金属硫蛋白的诱导,寻找大鼠肝纤维化的异常蛋白表达标志并评估硒代金属硫蛋白的防护作用。【结果】IMAC-Cu蛋白质芯片6279 Da和6650Da处特征性MT蛋白质表达增强证实硒对MT的高诱导作用;肝组织点样的WCX2芯片5 140Da综合峰的两峰与正常组相对应处比较明显倒置,血清点样的H4芯片7 105 Da左右的蛋白质出现高表达,4 820Da左右的蛋白质表达受抑,三种图谱变化是大鼠酒精性肝纤维化的相关信号蛋白;硒诱导MT增高后上述异常表达均有改善,说明有机硒对肝纤维化有防护作用。【结论】组织和血清的蛋白质指纹图谱可以作为肝纤维化疗效监测和评价的一类标志物,为今后进行更多的药物或方法筛选奠定了一种可以尝试的试验模式。     

运动训练对大鼠骨骼肌和肝脏金属硫蛋白诱导和金属离子代谢的影响

观察了耐力游泳训练对大鼠骨骼肌和肝脏金属硫蛋白(Metallothionein,MT)诱导性的影响,以及训练大鼠力竭性游泳后,MT和锌、铜、铁、锰、钙、镁等金属离子含量的动态变化,探讨了它们之间的关系。结果显示耐力性游泳训练可使大鼠骨骼肌和肝脏MT的基础水平升高。训练大鼠力竭性游泳后,骨骼肌和肝脏中诱导合成的MT的峰值提前出现,表明运动训练可加快MT的诱导合成。MT较高的基础水平和快速的诱导合成,可能是训练促进运动恢复的生理机制之一。训练大鼠力竭性游泳后,骨骼肌锌、铜、锰和肝脏锌、铜、锰、铁的变化趋势与MT的变化趋势较为一致,表明MT可能参与了这些金属离子的代谢。MT可能通过调节金属离子代谢,在机体的运动恢复中发挥重要作用。     

金属硫蛋白与肿瘤

金属硫蛋白（ＭＴ）是一类富含半胱氨酸的低分子量结合蛋白。近年来许多有关ＭＴ的研究表明ＭＴ在肿瘤的发生和治疗过程中起一定的作用,倍受科研人员和临床医生的关注。此方面的研究主要包括：１．ＭＴ减轻抗肿瘤药物毒副作用的可能性研究;２．ＭＴ在癌症发生中的作用;３．ＭＴ与癌细胞获得性抗药性的关系。     

金属硫蛋白的α、β结构域与铅结合形式及稳定性的研究

为研究金属硫蛋白与铅的相互作用 ,从基因工程菌 (BL2 1菌 )中分别提取并纯化结合了镉的金属硫蛋白α和β结构域 ,用酸解的方法脱去蛋白中的金属镉 ,然后用Sephadex G2 5纯化分别得到脱金属的α和 β结构域硫蛋白 (apo α MT和apo β MT)。在apo α MT和apo β MT中分别加入不同比例的铅 ,待反应完全后 ,用紫外吸收光谱法研究它们的巯基金属簇结构。经紫外吸收光谱图研究证明 :α结构域与铅反应可产生两种形式的结合物 ,一种为结合 4个铅的MT(Pb4 α MT) ,另一种则为结合 7个铅的MT(Pb7 α MT) ,而 β结构域与铅反应仅生成一种结合 3个铅的产物 (Pb3 β MT)。同时 ,通过与DTNB反应测定了它们的速率常数 ,结果表明结合了 4个铅的α结构域比另外两个产物的稳定性好。该研究对进一步探讨金属硫蛋白与铅反应的机理及其排铅功能提供了有力的证据。     

小肠三叶因子对盐酸诱导的大鼠胃溃疡的预防和治疗作用

目的　探讨克隆表达的rh ITF在模拟胃肠道条件下的稳定性和抗胃溃疡的作用机制。方法　采用质谱法及盐酸诱导的大鼠胃溃疡模型 ,测定rh ITF在模拟胃肠道条件下的结构稳定性和大鼠腺胃粘膜损伤级别 ,损伤指数及胃酸度 ,胃蛋白酶活性及胃排空能力。结果　酸对rh ITF相对分子量没有影响 ,胃蛋白酶仅从N端切除 6个氨基酸残基。rh ITF可明显降低大鼠腺胃粘膜损伤级别和损伤指数 ,但对胃酸分泌 ,胃蛋白酶活性及胃排空能力没有影响。结论　rh ITF在体外对酸和胃蛋白酶有一定的抗性 ,其对胃溃疡的治疗和预防作用不是通过降低攻击因子 (酸和蛋白酶 )和影响胃的自主运动实现的。