甲状腺运载蛋白-胆管癌血清中表达下调的蛋白

目的 胆管癌发病率不高,但恶性程度高,早期诊断困难,迄今缺乏临床诊断可用的分子标志物.实验利用SELDI技术寻找胆管癌新的血清标志物.方法 对60例胆管癌、146例肺癌、65例喉癌、58例喉咽癌、49例胆管良性疾病和53例正常人血清样品进行蛋白芯片检测.对候选蛋白进行质谱鉴定,并结合免疫共沉淀和ELISA技术筛选出胆管癌新的候选标志物.结果 通过Biomarker WizardTM软件分析显示13.71×103,13.83×103和13.99×103的蛋白峰在胆管癌患者血清样品中明显低于对照组.通过1-D胶分离、质谱鉴定和免疫沉淀分析,显示这3个差异蛋白峰为野生型甲状腺运载蛋白(native TTR)和它的两个变体(cysTTR和glutTTR).ELISA和SELDI技术分析上述血清样品均发现TTRs在胆管癌血清中的表达下调.结论 采用SELDI技术首次筛选并鉴定出TTRs,表明其可能作为胆管癌诊断的候选血清标志物.

Abstract：

Objective As SELDI-TOF-MS (Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) has been broadly used to screen biomarkers for a variety of diseases, the identification and validation of the revealed biomarkers requires more focused attention.Method In this paper, the serum samples from 60 cholangiocarcinoma, 146 lung cancer, 65 LGC and 58 LPC, 49 benign diseases of hepatobiliary and 53 normal individuals were analyzed by SELDI-TOF-MS. Results Among a set of proteins automatically selected as specific biomarkers by Biomarker Wizard software, three protein peaks, with molecular weights of 13. 71 × 103 , 13.83 × 103 and 13. 99 ×103 , were found significantly decreased in cholangiocarcinoma samples. The candidate biomarkers obtained from Tricine-SDS-PAGE gel bands by matching the molecular weight with peaks on CM10 chips were identified by Mass spectrometry as the native transthyretin(native TTR),cysTTR and glutTTR.These preliminary results were further proven by immunoprecipitation using commercial TTR antibodies. This allowed us to re-measure the TTR levels in all the groups more simply by ELISA assay. It showed a firm consistency between ELISA and SELDI analysis. In addition, while TTR levels in cholangiocarcinoma were found to be lower than those in normal healthy controls, TTR levels in benign diseases of the hepatobiliary system were found to be higher than those in healthy controls.Conclusion TTR could be a biomarker that better discriminates cholangiocarcinoma patients from the benign diseases compared to other biomarkers presently available.     

红景天甙对体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞组织化学及其超微结构的影响

采用定量细胞化学方法及透射电子显微镜观测了红景天甙对不同代龄二倍体细胞内酸性磷酸酶（ＡｃＰａｓｅ）、脂褐素及其超微结构的影响。结果提示，红景天甙能降低第４５代以后细胞ＡｃＰａｓｅ的活性，第５５代以后细胞内脂褐素的含量，并能阻抑细胞超微结构的衰退性变化。由此推断，红景天甙对二倍体成纤维细胞具有一定的延缓衰老作用。     

性激素对喉癌细胞株HEp—2体外增殖的影响

本实验采用葡萄糖包被活性炭技术，观察小牛血清和葡聚糖包被活性炭处理的小牛血清对人喉癌细胞株细胞体外增殖的作用，及该细胞对睾酮，１７β－雌二醇和孕酮的剂量依赖性，结果表明该细胞是雄性素敏感型细胞，同时也是性激素非依赖型细胞，睾酮在１ｎｍｏｌ／Ｌ和１０ｎｍｏｌ／Ｌ浓度对该细胞的增殖有促进作用，孕酮和１７β－雌二醇无此作用。证明该细胞株是研究喉癌与性激素关系的适合的体外模型，为喉癌的内分泌治疗提供了参考     

睾酮与喉癌细胞株HEp—2增殖的实验研究

本实验采用葡聚糖包被活性炭技术，研究了ＨＥｐ－２细胞体外增殖的生长曲线及其对睾酮的剂量依赖性。结果表明，ＨＥｐ－２细胞是睾酮非依赖型细胞，也是睾酮敏感型细胞。     

超抗原SEB和MBP对人外周血T淋巴细胞增殖及粘附分子表达的影响

超抗原ＳＥＢ和ＭＢＰ对人外周血Ｔ淋巴细胞增殖及粘附分子表达的影响１３００２１白求恩医科大学基础医学院肖雪媛刘早霞１杨崇敬２杨贵贞１白求恩医科大学第二临床医院；２长春市第五医院自１９８９年命名以来，超抗原已成为免疫学领域研究的前沿课题之一。国外对它生物...     

人参皂甙对手术应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及免疫靶器官中肾上腺皮质激素释放素、ACTH阳性细胞数的影响

目的和方法为探讨手术应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPAA）和脾脏中肾上腺皮质激素释放素（CRF）和促肾上腺皮质激素（ACTH）阳性细胞数及人参皂甙的调节作用，采用了免疫酶组化和免疫荧光检测方法。结果应激后15～30min，下丘脑、垂体中CRF和ACTH阳性细胞数较正常对照组减少。CRF阳性细胞在60min后逐渐增多，6h时达正常水平；ACTH阳性细胞于3h开始增多，12h时至正常水平。而肾上腺和脾脏内的CRF和ACTH阳性细胞数在应激后60min开始增多，6h达高峰，24h接近正常水平。人参皂甙（GS）组于应激后15～30min时下丘脑、垂体中CRF和ACTH阳性细胞数多于应激组，但肾上腺和脾脏变化不明显。结论GS可能通过作用于中枢神经内分泌细胞而抑制CAA和ACTH的释放。     

红景天甙对体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞组织化学及其超…

采用定量细胞化学方法及透射电子显微镜观察了红景天甙对不同代龄二倍体细胞内酸性磷权酶（ＡｃＰａｓｅ）脂褐素及其超微结构的影响，结果提示，红景天甙能降低第４５代以后细胞ＡｃＰａｓｅ的活性，第５５代以后细胞内脂褐素的含量，并能阻抑制超细胞微结构的衰退性变化，由此推断，红景天甙对二倍体成纤维细胞具有一定的延缓衰老作用。     

性激素对喉癌细胞株HEp－2体外增殖的影响

本实验采用葡聚糖包被活性炭技术，观察小牛血清和葡聚糖包被活性炭处理的小牛血清对人喉癌细胞株细胞体外增殖的作用，及该细胞对睾酮，１７β－雌二醇和孕酮的剂量依赖性。结果表明该细胞是雄激素敏感型细胞，同时也是性激素非依赖型细胞。睾酮在１ｎｍｏｌ／Ｌ和１０ｎｍｏｌ／Ｌ浓度对该细胞的增殖有促进作用，孕酮和１７β－雌二醇无此作用。证明该细胞株是研究喉癌与性激素关系的适合的体外模型，为喉癌的内分泌治疗提供了参考依据。