SH-SY5Y神经细胞APP高表达对胆碱酯酶活性影响

目的研究类阿尔茨海默病(AD)神经细胞模型中APP异常代谢下胆碱酯酶活性变化,探讨AD的发病机制。方法采用脂质体转染法将含有瑞典家族性AD双突变的淀粉样蛋白前体蛋白APP670/671基因(APPSWE)转染至神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中;利用实时荧光定量PCR方法和Western blotting的方法测定APPmRNA、可溶性APP(αAPPs)和总APP蛋白表达水平;采用改进的Ellman比色法测定细胞培养基中乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)及丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase,BuChE)活性。结果转染APPSWE质粒的SH-SY5Y细胞APP总mRNA和蛋白表达水平显著升高,αAPPs分泌量下降。转染组SH-SY5Y细胞与对照组相比,AChE和BuChE活性都升高。结论体外神经细胞实验证明APP蛋白过度表达能升高AChE和BuChE的活性,其机制可能与APP蛋白代谢紊乱使Aβ升高及下调αAPPs分泌有关。     

SH-SY5Y神经细胞中尼古丁受体α3亚单位基因表达抑制与APP代谢的关系

目的 用RNA干扰技术抑制神经型尼古丁受体(nAChR) α3亚单位基因表达并观察对神经细胞淀粉样蛋白前体蛋白(APP)代谢的影响.方法 设计并体外合成α3 nAChR的特异性编码siRNA序列的寡核苷酸,退火后克隆至pSliencer 3.1-H1 neo质粒中,构建重组质粒α3 nAChR pSilencer 3.1-H1 neo.将α3 nAChR pSilencer 3.1-H1 neo转染SH-SY5Y细胞,用含G418的培养液筛选,挑选阳性克隆后采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方法检测转染细胞中α3 nAChR mRNA 及蛋白表达水平的变化;并测定分泌型 APP、总 APP 蛋白表达的变化.结果 成功构建α3 nAChR siRNA表达质粒,转染后经G418筛选获得稳定转染重组质粒的细胞克隆株,与对照组相比,α3 nAChR mRNA 及蛋白表达量均降低(抑制率分别为98%和66%);分泌型APP表达下降,总APP水平比较表达水平无显著性差异.结论 α3 nAChR siRNA表达质粒能特异性抑制α3 nAChR 基因表达,α3 nAChR可能通过增加α-分泌酶对APP的切割发挥神经保护作用.     

外源性H2S对血管性痴呆模型大鼠海马组织H2S浓度和胱硫醚β-合酶表达的影响

目的 探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2 S)对血管性痴呆(vascular dementia,VaD)大鼠海马组织H2 S浓度和胱硫醚 β-合酶(cystathionineβ-synthase,CBS)表达的影响.方法 采用改良四血管法制作大鼠VaD模型,应用随机数字表法分为假手术组、模型组、小剂量和大剂量NaHS组,再按照模型制作后时间进一步分为1 d、7 d和30 d亚组.小剂量和大剂量NaHS组分别模型制作后每日腹腔注射NaHS 30μmol/kg和100μmol/kg,假手术组和VaD模型组每日腹腔注射等体积生理盐水.应用Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,应用实时免疫荧光聚合酶链反应检测海马组织CBS mRNA表达,应用蛋白质印迹法检测海马组织CBS蛋白表达.结果 Morris水迷宫实验显示,模型组、小剂量和大剂量NaHS组逃避潜伏期均较假手术组显著延长(P均<0.05),穿越平台次数均较模型组显著减少(P均<0.05),小剂量和大剂量NaHS组逃避潜伏期均较模型组显著缩短(P均<0.05).模型组、小剂量和大剂量NaHS组海马H2 S含量均较假手术组显著降低,但小剂量和大剂量NaHS组显著高于模型组(P均<0.05).模型组、小剂量和大剂量NaHS组海马CBS mRNA和蛋白表达均显著低于假手术组(P均<0.05),且小剂量和大剂量NaHS组与模型组无显著差异.结论 外源性H2 S能改善VaD大鼠学习记忆能力,可能与增高海马组织H2 S含量有关,但对CBS表达无影响.     

外源性H2S对血管性痴呆大鼠缺血再灌注后神经元线粒体损伤及其相关信号通路的影响

目的 以二血管(2-VO)法制作血管性痴呆(VaD)大鼠模型,探讨神经元自噬及相关信号通路的变化及外源性硫化氢(H₂S)的神经保护作用。方法 改良2-VO结扎SD大鼠双侧颈总动脉制作VaD模型,按缺血进程急性缺血期、缺血损伤期、损伤恢复期共设置1、7、30 d 3个时间段,每个时间段各有假手术(Sham)组、模型(VaD)组、阳性对照[尼莫地平(Nimodipine)组、硫氢化钠(NaSH)低剂量(Low-NaSH)组、NaSH高剂量(High-NaSH)组。为保持药物处理时间一致,1 d及7 d,各组术前灌胃给药30 d, 30 d各组术后灌胃给药30 d, VaD组和Sham组生理盐水灌胃,Nimodipine组Nimodipine灌胃给药,Low-NaSH组、High-NaSH组NaSH灌胃给药。利用水迷宫检测30 d各组学习记忆能力。Western印迹检测海马神经元线粒体蛋白中Beclin1、P62、蛋白激酶B(Akt)、P-Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、P-mTOR表达。结果 术后1 d,与Sham组比较,VaD组Beclin1、P-Akt...     

邦消安治疗胆汁反流性胃炎临床观察

胆汁反流性胃炎是一种动力紊乱性疾病 ,发病率较高 ,而机制不完全清楚 ,有研究认为与胃窦动力低下 ,十二指肠胃反流有关。邦消安是一种促进胃肠运动的中成药 ,有较好的导滞消积 ,保护胃肠功能的作用。本文旨在观察邦消安对胆汁反流性胃炎的疗效。对象与方法一、对象及分组1、正常对照组 15例 ,无临床症状 ,胃镜下黏膜呈桔黄色 ,无充血水肿 ,幽门螺杆菌检查阴性 ,排除其他疾病 ;2、胆汁反流性胃炎组 38例 ,幽门螺杆菌检查阴性 ,参考曾锦章等探讨[1] 的标准 ,胃底黏液糊呈现黄色或绿色 ,ｐＨ值 >3,胃液甘胆酸>5 .8ｍｇ/Ｌ。二、方法1、标本的…     

综合治理后燃煤污染型地方性氟中毒病区人群血脂水平改变

目的 检查经综合治理后的燃煤污染型地方性氟中毒(地氟病)病区人群血脂改变(包括总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白),寻找经综合防治措施后病区人群病情好转的健康判别指标.方法 2011年,在贵州省毕节市选择燃煤污染型地氟病病区人群,按综合治理时间长短和病情轻重分为4个组,轻病区+治理短组(98例)、轻病区+治理长组(70例)、重病区+治理短组(61例)、重病区+治理长组(164例);在贵阳市选择非地氟病病区人群(125例)作为对照组.两组人群空腹采血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清中总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白含量.结果 轻病区+治理短组、轻病区+治理长组、重病区+治理短组、重病区+治理长组人群血清总胆固醇水平[(5.75±3.16)、(5.56±2.86)、(7.25±3.84)、(6.51±3.48)mmolL]、甘油三酯水平[(256±1.45)、(2.98±1.50)、(3.20±1.65)、(2.94±1.49)mmol/L]均高于对照组[(3.97±1.80)、(1.25±0.97) mmol/L,P均＜0.05],而高密度脂蛋白水平[(0.72±0.40)、(0.96±0.60)、(0.46±0.27)、(0.81±0.43)mmol/L]明显低于对照组[(1.15±0.67) mmol/,P均＜0.05];在综合治理时间较长的地氟病轻、重病区人群,仅高密度脂蛋白水平较综合治理时间较短的氟中毒轻、重病区人群明显改善(P均＜ 0.05).结论 通过综合治理,地氟病病区人群血清中高密度脂蛋白的水平明显增高,其机制可能与综合治理后减弱氟对心血管的损伤有关,但对血清总胆固醇和甘油三酯水平无明显影响,人体血清中高密度脂蛋白水平可考虑为评估综合治理后病区人群血脂水平改善的指标.     

胃肠道多发性淋巴瘤性息肉病1例

患者,男,54岁,因间断使血近1年,于2006年1月入院.患者以间断便血为主,无腹痛,无恶心呕吐,无腹泻,进食好,无消瘦.体检:一般情况尚可,心肺无异常,腹软,肝脾肋下未触及,全腹部未触及包块,下肢无水肿.     

骨髓间充质干细胞治疗血管性痴呆大鼠行为学及海马CaM、CaMK Ⅱ表达水平的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSCs)侧脑室移植治疗血管性痴呆(vascular dementia,VaD)模型对大鼠行为学及海马钙调蛋白(calmodulin,CaM)、钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)表达的影响。方法以全骨髓贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSCs);流式细胞仪对所培养BMSCs进行表面抗原鉴定;成纤维生长因子(basic fibroblast growth factorbfic,b FGF)和丁羟基茴香醚(beta hydroxy acid,BHA)诱导BMSCs分化为神经元细胞,并对诱导后的细胞,进行神经元特异性的免疫组化鉴定;采用改良四血管法制备Va D模型,设立对照组,造模4 w后将VaD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、BMSCs治疗组。观察4 w后实验大鼠的行为学表现及应用Real-time PCR检测海马CaM、CaMKⅡ表达水平。结果 BMSCs治疗组行为学表现有明显改善。其海马CaM、CaMKⅡmRNA表达比模型组降低(P<0.05)。结论侧脑室移植BMSCs显著改善VaD大鼠行为学表现,并使其海马CaM、CaMKⅡ表达降低。     

以癫痫为首发症状的系统性红斑狼疮17例临床分析

目的 :研究以癫痫为首发症状的系统性红斑狼疮 (SLE)的临床特点。方法 :对1 7例以癫痫为首发症状的系统性红斑狼疮患者进行临床分析。结果 :SL E早发癫痫多为青年女性 ,且以大发作为主 (1 1 /1 7)。结论 :以癫痫为首发症状的系统性红斑狼疮 (SLE)早期诊断困难 ,对青年女性癫痫患者应进行定期随访 ,注意排除 SLE的可能     

过敏性紫癜误诊为急性阑尾炎1例

病人,男,18岁。腹痛1周,腹泻3 d,加剧伴发热、恶心、呕吐2 d。查体:急性痛苦病容,浅表淋巴结未触及肿大,四肢皮肤可见紫癜,关节无异常,腹软,脐周、麦氏点压痛,反跳痛可疑,未触及包块,移动性浊音阴性,肠鸣音活跃。W BC 17.3×109/L,N 0.76。腹部平片未见异常,血淀粉酶、肝肾功能、电解质、血沉、尿粪常规均正常。肥达、外-斐反应阴性。抗“O”326 IU/m l。B超提示右下腹包块,少量腹腔积液。右下腹CT提示升结肠及回盲部肠壁增厚、水肿,结肠后间隙少量渗出积液。入院后诊断为急性阑尾炎,予抗感染治疗,但症状无明显改善,遂转外科行阑尾切除…