线粒体及其自噬在精子发生过程中的作用研究

精子活力是衡量精液质量和男性生育能力的一个重要临床指标。精子运动所需能量来自线粒体呼吸链的氧化磷酸化,线粒体形态、数目、酶活性、DNA完整性及活性氧（ROS）产生等的改变都影响精子生理功能。线粒体自噬是一种选择性的细胞自噬途径,作为一种清除损伤的线粒体和过量产生的ROS的防御机制,确保细胞内线粒体功能稳定,促进应激环境中细胞的存活。因此,推测精子细胞可能通过线粒体自噬这一特异性的选择途径清除异常线粒体以保护精子细胞生存并维持精子活力,自噬参与了精子的发生过程。     

HMG-CoA 还原酶基因多态性与血浆血脂的关系

目的 探讨3—羟—3甲基戊二酰辅酶A(3—hydroxy—3—methylglutaryl coenzyme A，HMG—CoA)还原酶基因多态性在中国汉族人群中的分布及其与冠心病(coronary heart disease,CHD)的关系。方法 用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法分析HMG—CoA还原酶基因第2内含子区ScrFl酶切多态性。结果 ScrFl多态位点等位基因A、a频率在CHD组和正常对照组分别为0．519、0．481和0．440、0．560。基因频率分布符合Hardy—Weinberg平衡定律。ScrF1酶切多态性基因型频率、等位基因A、a频率在组间比较差异无显著性(P＞0．05)，但是，基因型为AA的冠心病患者，其血浆极低密度脂蛋白、胆固醇水平显著高于其他基因型患者(P＜0．05)。中国人ScrFl多态位点A、a等位基因频率与欧洲白人比较差异有显著性(0．44vs0．55，0．56vs0．45，P＜0．05)，可能由于标本的种族来源不同所致。结论 ScrFl酶切多态性与CHD无相关性(P＞0．05)，但是，患者组AA基因型与血浆极低密度脂蛋白、胆固醇水平密切相关(P＜0．05)。     

糖氧剥夺/再灌注抑制L2.3神经干细胞N-Myc-DLL3-Notch信号系统

目的建立L2.3神经干细胞糖氧剥夺/再灌注损伤模型,探讨糖氧剥夺/再灌注是否可以抑制L2.3神经干细胞N-Myc-DLL3-Notch信号系统。方法体外培养的L2.3神经干细胞经历糖氧剥夺(OGD)6h,再灌注(R)16h,建立OGD/R模型。分别在OGD前、OGD6h、OGD6h再灌注16h,用western blot方法检测Notch1、NICD、DLL3和N-Myc蛋白表达情况。结果与糖氧剥夺/再灌注前比,糖氧剥夺6h,再灌注16h可下调Notch1、NICD、DLL3和N-Myc蛋白表达。结论糖氧剥夺/再灌注损伤可抑制L2.3神经干细胞N-Myc-DLL3-Notch信号系统     

大鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养改良方法的研究

目的 改进大鼠大脑皮质星形胶质细胞(astrocyte, AS)的体外培养方法,为进一步研究奠定基础.方法 选取生后3 d的Sprague-Dawley大鼠的大脑皮层,常规分离纯化AS,低密度种植,培养箱中孵育1 h后换瓶,24 h后换液,细胞融合成单层后传代,传代后维持在含10%胎牛血清DMEM培养基中培养,并在长时期内不给予更换或补加培养液.采用 GFAP/DAPI免疫荧光法鉴定AS细胞.结果 体外培养的纯化大鼠大脑皮层AS,表现为细胞突起细长、胞体明显缩小、形态多样的纤维型AS,最后细胞突起之间相互连接形成AS网络.GFAP/DAPI免疫荧光染色结果示GFAP阳性细胞达98%以上.结论 大鼠大脑皮质AS的体外培养改良方法培养的AS体外形态、发育特点均与在体内AS基本一致,且纯度较高,为进一步进行AS的研究创造了条件.     

重组腺病毒介导TIMP-1对人肝癌细胞系体外侵袭的影响

[目的]探讨人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(hTIMP-1)过表达对人肝癌细胞系HepG2体外侵袭的作用。[方法]构建携载hTIMP-1全长cDNA的重组腺病毒AdhTIMP-1,转染HepG2细胞,利用MTT、细胞生长曲线及BoydenChamber检测hTIMP-1对HepG2细胞体外增殖和侵袭能力的影响。[结果]成功构建重组腺病毒并实现体外表达,转染HepG2细胞,对其体外增殖及侵袭有明显抑制作用,细胞增殖率为49%,穿膜细胞相对百分率为(8.4±1.2)%(P<0.01)。[结论]hTIMP-1的过表达能有效抑制人肝癌细胞系HepG2的体外侵袭,可望用于肝癌基因治疗的研究。     

幽门螺杆菌诱导人胃上皮细胞(GES-1)自噬的研究

 摘要:目的 观察幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞后自噬的发生及变化情况,为进一步研究幽门螺杆菌感染后诱发自噬反应的相关研究奠定基础。方法 采用中性红摄入法确定H. pylori感染细胞的最佳浓度,以此浓度分别感染细胞,通过Western Blot检测感染不同时间LC3与p62的表达情况,免疫荧光染色检测自噬体。使用自噬抑制剂3MA、E64d、 pepstatin A干预后,观察感染后自噬变化情况。结果 H. pylori (22695) 感染GES-1细胞最佳浓度为m.o.i=400。感染后2小时即可观察到自噬的发生,且呈时间依赖性,于8小时到达高峰,24小时开始恢复基础水平。使用3MA阻断自噬,自噬体明显减少,且细胞形态欠佳。使用E64d和pepstatin A处理后自噬也受到一定程度的抑制。结论 H. pylori（22695）能够诱导人胃上皮（GES-1）发生自噬,且可被自噬抑制剂所抑制。     

脑源性神经营养因子通过PI3K/Akt/mTOR信号途径对胚鼠缺氧神经元的保护作用

目的 探讨脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对缺氧(oxygen deprivation,OD)神经元的保护作用是否与激活自噬有关,其信号通路是否通过PI3K/Akt/mTOR途径。方法 1)建立胚鼠神经元OD损伤模型;CCK-8法观察不同浓度BDNF对OD神经元细胞活性的影响;2)检测OD神经元1,3,5 h自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达,情况观察BDNF对OD神经元的保护作用是否与自噬有关;3)检测p-Akt,p-mTOR,p-p70S6K以及LC3II的表达,对比BDNF与自噬激活剂雷帕霉素(mammalian target of rapamycin,Rapamycin)对Akt/mTOR/p70S6K的影响,以及自噬被3-MA抑制后,BDNF对Akt/mTOR/p70S6K的影响。结果 1)50 μg/L BDNF可对OD神经元起保护作用(P<0.05),100 μg/L BDNF效应次之;2)BDNF和/或Rapamycin在下调p-Akt/p-mTOR/p-p70S6K表达的同时可上调LC3II的表达;当3-MA抑制自噬后,BDNF对LC3II的上调作用被抑制。结论 BDNF通过PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信号途径激活自噬,发挥对OD神经元的保护作用。     

吸入性糖皮质激素辅助肺泡表面活性物质对胎粪吸入综合征患儿血气指标、肺部炎症吸收效果及并发症的影响

目的探讨吸入性糖皮质激素辅助肺泡表面活性物质(PS)对胎粪吸入综合征(MAS)患儿血气指标、肺部炎症吸收效果及并发症的影响,为临床治疗提供参考。方法选取2015年3月-2017年3月收治的100例MAS患儿为研究对象,按照随机数字表分为A组和B组,每组各50例。A组患儿给予PS气管内注入,B组患儿在此基础上给予吸入性糖皮质激素辅助治疗。比较两组患儿的近期疗效、吸氧时间、住院时间、肺部炎症吸收率、治疗前后血气分析指标水平及并发症发生率。结果B组患儿近期治疗总有效率显著高于A组(P0.05)。B组患儿吸氧时间和住院时间均显著短于A组(均P0.05),肺部炎症吸收率显著高于A组(P0.05)。治疗后2、6、12及24 h,B组患儿血气分析指标均显著优于A组(均P0.05)。A组和B组治疗后2、6、12及24 h的氧合指数(OI)和动脉血氧分压与肺泡氧分压比值(PaO_2/FiO_2)均显著优于治疗前(均P0.05)。B组患儿并发症发生率显著低于A组(P0.05)。结论吸入性糖皮质激素辅助PS治疗MAS可有效缓解相关症状及体征,加快病情康复,促进肺部炎症吸收,改善血气分析指标,并有助于降低并发症发生风险。     

国内近10年儿科教学模式的研究热点—基于文献关键词的可视化分析

目的　将共词聚类分析法引入儿科教学模式的现状研究,通过对近十年来该领域文献的可视化分析,总结国内在该领域研究的热点及知识结构,为儿科教学的进一步发展提供参考。方法　于2017年7月在中国知网和万方数据库以“儿科”和“教学模式”为主题词搜索文献,限定期刊年限为2006年1月至2017年6月,通过人工筛选出符合研究标准的文献,利用Word、Bicomb 2.0对关键词进行整理,统计出高频关键词。采用SPSS 20.0描绘聚类分析图,用Ucinet 6.0和Newdraw描绘共现网络分析图,展现高频关键词之间的关系。结果　最终纳入文献367篇,提取高频关键词31个,与儿科数学相关的频率最高的关键词是“PBL教学法”。该领域的研究大致可分为四类：儿科实习及见习中的教学方法、儿科教学培养及评估的内容、儿科护理专业的教学方法及教学方法改革的对象。位于共现网络图中心区域的关键词有“PBL教学法”“多媒体教学”“案例教学法”及“护理”。结论　近十年来,多种教学方法的实践探究是国内儿科教育模式研究的主要内容。PBL是该领域的研究热点,多与多媒体、案例引导等相结合应用于儿科教学中。此外,循证医学在儿科教学中的应用也逐渐受到重视。     

端粒/端粒酶与代谢综合征及其发展起源的关系

代谢综合征(metabolic syndrome,MetS)是由遗传因素和环境因素共同决定的,以中心性肥胖、胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)、高血糖、高血压、血脂异常等多种代谢性疾病合并出现的一组症候群,是心脑血管疾病、糖尿病等重大非传染性疾病的早期病变,此外还与癌症、血管性痴呆、肾脏微血管病、多囊卵巢综合症等疾病密切相关[1].不仅成人MetS患病率高,近年来,MetS在青少年中的患病率亦呈逐年升高趋势,已成为公众健康的严重威胁.