骨髓间充质干细胞表达的hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白的提纯及功能鉴定

目的:用hVEGF_(121)/EGFP真核质粒转染骨髓间充质干细胞,提纯其表达的hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白,并体外检测其功能.方法:用课题组前期工作构建的pEGFP-N_2-hVEGF_(121)重组质粒提取质粒DNA.通过阳离子脂质体介导pEGFP-N_2-hVEGF_(121)重组质粒DNA转染体外培养的骨髓间充质干细胞,使用荧光显微镜检测hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白表达.用Amicon超滤离心管纯化融合蛋白.结果:荧光显微镜下观察到转染pEGFP-N_2-hVEGF_(121)重组质粒的骨髓间充质干细胞,Westen blot证实转染骨髓间充质干细胞的培养液中存在hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白表达.MTT试验证实人脐静脉内皮细胞数量在hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白组明显多于对照组(P<0.05).Miles实验证实hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白增加血管壁的通透性.结论:①携带hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白表达基因的真核表达质粒,在骨髓间充质干细胞中获得表达.②骨髓间充质干细胞表达的hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白在体外具有野生型血管内皮细胞生长因子的功能.     

ShRNA对大鼠心肌细胞ROCK1和ROCK2表达的沉默作用

背景：已有研究发现,ROCK1和ROCK2参与了细胞的凋亡过程,由此假设下调ROCK1和ROCK2表达能抑制心肌细胞凋亡。 目的：验证ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA转染能否有效沉默大鼠心肌细胞内ROCK1和ROCK2基因的表达,并筛选沉默效率最高的shRNA。 方法：以ROCK1和ROCK2为靶基因,分别构建了3个特异性shRNA重组质粒,转染这些shRNA后观察其对SD大鼠心肌细胞中ROCK1和ROCK2的沉默作用,并筛选出沉默效率最佳的shRNA。 结果与结论：Western Blot结果显示,与对照组相比,3个重组质粒ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染均能明显降低SD大鼠心肌细胞中ROCK1和ROCK2的表达(P < 0.05或P < 0.01),其中ROCK1-shRNA1和ROCK2-shRNA2的沉默效率最高(P < 0.05),分别为(82.15±7.53)%和(89.42±5.81)%。这表明ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA转染能有效沉默大鼠心肌细胞内ROCK1和ROCK2基因的表达,并筛选出了沉默效率最高的shRNA。     

稳定表达人热休克蛋白22内皮细胞株的构建和鉴定

背景：热休克蛋白22的应激表达可能对缺氧复氧内皮具有一定的保护作用。 目的：建立稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。 方法：EcoRⅠ/kpnⅠ双酶切鉴定真核表达重组质粒pEGFP-N1-HSP22。脂质体法以重组质粒pEGFP-N1-HSP22转染人脐静脉内皮细胞,G418筛选,获得G418抗性单克隆细胞。用荧光显微镜、RT-PCR及Western-blot检测热休克蛋白22在人脐静脉内皮细胞中的表达。 结果与结论：经双酶切电泳检测重组质粒pEGFP-N1-HSP22符合预期大小片段。稳定转染的单克隆人脐静脉内皮细胞中,荧光显微镜观察到每个细胞均有绿色荧光蛋白表达,RT-PCR和Western-blot检测到热休克蛋白22mRNA和蛋白表达。说明成功获得稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株。     

安置生理性超搏器15例临床分析

我院自1993年1月以来为15例患者安置了ＡＡＩ和ＤＤＤ生理起搏器,占同期安置数的156%,取得了较好效果,报告如下。1　资料和方法1·1　临床资料　对象为1993年1月至1997年6月收住本院的患者。男8例,女7例,年龄31～69岁(平均563岁)。心律失常类型:病窦综合征(ＳＳＳ)8例,Ⅲ度房室传导阻滞(Ⅲ度ＡＶＢ)4例,Ⅱ度Ⅱ型ＡＶＢ2例,另1例为肥厚梗阻型心肌病(ＨＯＣＭ)。1·2　安置起搏器类型　15例均使用美国ＣＰＩ公司起搏器。其中ＡＡＩ8例,ＤＤＤ7例。1·3　起搏导管植入途径　15例患者均经锁骨下静脉穿刺法植入电极导管。植入ＤＤＤ起搏器者,2根…     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的新技术

骨髓间充质干细胞移植是治疗心肌梗死的新途径之一,其技术和方法不断发展.诸如建立更好的大型活体实验动物模型;改进对植入细胞的标记追踪技术;进一步研究细胞植入的适宜方式和时间等.骨髓间充质干细胞移植和基因疗法相结合可能得到叠加的治疗效果.     

静坐时间与心脑血管病死亡关系的前瞻性队列研究

目的 探讨静坐时间对心脑血管病死亡的影响。方法 采用前瞻性队列研究方法,选取2013-2014年“中国重要心血管病患病率调查及关键技术研究”在江西地区调查的年龄≥35岁社区居民12 608人进入随访队列。基线问卷调查获得静坐时间,通过电话随访、乡镇卫生院公共卫生科和村医信息报告及江西省疾病预防控制中心死亡监测系统获得死亡事件。应用Cox比例风险模型评估死亡风险。结果 共纳入研究对象11 744人进行分析,平均随访(5.4±0.9)年(63 297.8人年),随访期间发生死亡事件796例,其中心脑血管病死亡事件373例。静坐时间<6、6～8和>8 h/d组心脑血管病死亡事件发生率分别为2.9%(273/9 645)、3.9%(63/1 595)和5.4%(37/684),组间差异有统计学意义(χ²=13.57,P<0.01)。Kaplan-Meier曲线显示,三组间心脑血管病累积死亡风险差异有统计学意义(Log-Rank χ²=17.27,P<0.01)。Cox回归分析显示,调整混杂因素后,高龄、体质量指数(BMI)增加...     

射频消融治疗快速性心律失常的进展

射频消融治疗快速性心律失常的进展程晓曙，罗伟（江西医学院二附院心内科南昌３３０００６）ＰｒｏｇｒｅｓｓｏｎＴｒｅａｔｍｅｎｔｏｆＲａｐｉｄＡｒｒｈｙｔｈｍｉａｗｉｔｈＲａｄｉｏｆｒｅｑｕｅｎｃｙＡｂｌａｔｉｏｎＣｈｅｎｇＸｉａｏｓｈｕ，ＬｕｏＷｅｉ（...     

经皮球囊二尖瓣成形术的并发症及防治体会

经皮球囊二尖瓣成形术的并发症及防治体会程晓曙罗伟吴清华吴延庆程应樟岳晓军李菊香苏海（第二附属医院心内科南昌３３０００６我院自１９９１年１２月以来，使用国产橡胶尼龙球囊导管为１０４例风心病二尖瓣狭窄（ＭＳ）患者施行了经皮球囊二尖瓣成形术（ＰＢＭＶ）。在...     

生而不息,欣欣向荣——写在《江西医药·心血管论文专辑》开篇前

两千多年前,伟大的教育家孔子就用这句话给世人指明了生命存在的意义.生命是一个动态的过程,花开花落,斗转星移,有过繁盛,有过消沉,但那孜孜不倦的探索脚步却始终没有停止.人生如此,对于一份优秀的刊物也是一样,生无所息,不为名利,勇于创新,才能欣欣向荣.     

卵泡抑素样蛋白与心血管疾病

卵泡抑素样蛋白(follistatin-like protein,FSTL)是细胞外基质糖蛋白,因为与卵泡抑素高度同源,共同拥有富含半胱氨酸的卵泡抑素位区而归属于卵泡抑素家族,参与细胞增殖、迁移、分化、胚胎发育等一系列病理生理过程.心血管疾病是二十一世纪威胁人类健康的重大公共卫生问题,已赫然成为全球的第一死因.