介入化疗栓塞联合腹部热疗治疗晚期胃癌的近远期疗效探讨

目的：探讨介入化疗栓塞联合腹部热疗治疗晚期胃癌的近远期疗效。方法选取该院收治的129例晚期胃癌患者为研究对象,根据其意愿分成A、B、C3组,A、B组均予以介入化疗栓塞方案,其中A组同时联合腹部热疗;C组则采用紫杉醇+顺铂化疗方案。行为期3年随访,比对3组患者近、远期疗效及生存率,分析其不良反应发生情况,记录其生活质量评估差异。结果 A组近远期疗效及生活质量评估结果为3组最佳,其次为B组,C组最差（<0.05）;A、B组远期生存率及各Ⅱ-Ⅳ级不良反应发生率对比差异无统计学意义（>0.05）,但均优于C组（<0.05）。结论对晚期胃癌患者予以介入化疗栓塞联合腹部热疗方案,近远期治疗效果均较为理想,不良反应较低,利于提高患者生存率及生存质量,值得临床推广。     

人上皮细胞黏附分子的真核表达及鉴定

目的构建人上皮细胞黏附分子(EpCAM)全基因的真核表达质粒,研究其在HepG2细胞中的表达。方法将EpCAM基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-EpCAM,转染人肝癌HepG2细胞。通过免疫荧光、Western Blotting及流式细胞检测对转染后细胞内EpCAM蛋白的表达进行鉴定。结果双酶切鉴定结果表明重组质粒构建成功。免疫荧光、Western Blotting及流式细胞检测结果一致表明,转染后EpCAM基因在HepG2细胞中表达成功。结论成功构建了人EpCAM的真核表达载体,并在HepG2细胞中表达,为研究高表达人EpCAM的肝癌细胞的功能打下基础。     

混合型生物人工肝治疗HBV相关慢加急性肝衰竭患者的初步探讨

目的利用自行构建的混合型生物人工肝系统,探讨其治疗HBV相关慢加急性肝衰竭患者的安全性和有效性。方法采用转染人肝再生增强因子（hALR）的HepG2细胞为生物材料,构建中空纤维生物反应器。 以2009年5月-2011年8月住院的HBV相关慢加急性肝衰竭患者作为治疗对象,随机分为2组,每组10例,治疗组进行混合型生物人工肝治疗,对照组进行普通血浆置换治疗。两组间均数比较采用成组t检验,治疗前后比较采用配对t检验。结果治疗组10例患者中,7例经住院治疗临床好转出院,其余1例因肝性脑病死亡,1例因肝肾综合征死亡,1例出院后死于肝衰竭。对照组10例患者中存活5例,其余1例肝移植,4例因肝衰竭死亡。2组患者治疗前MELD评分分别为24.26±2.54及24.71±2.79,差异无统计学意义（t=1.971,P=0.064）。治疗组治疗3 d、1、4周MELD评分平均分别为21.71±2.92、22.10±4.46、19.90±5.43。跟踪随访1 a,治疗组和对照组患者血清甲胎蛋白平均值分别为14.24、11.32 ng/ml,腹部B超检查均未发现肝脏占位性病变。结论自行构建的混合型生物人工肝支持系统治疗HBV相关慢加急性肝衰竭患者具有一定安全性和有效性。     

慢性乙型肝炎患者血清生物化学指标对肝组织炎症程度的评估价值

目的 利用临床生物化学指标建立初步判定慢性乙型肝炎患者肝组织炎症、坏死程度的评分系统.方法 统计分析255例慢性乙型肝炎患者临床和病理资料,从19个生物化学指标中选出5个参与评分,按不同检测值分为0～4分,总分用于判定肝组织炎症和坏死程度.结果 ALT、AST、胆碱酯酶、γ-谷氨酰转肽酶和总胆汁酸被纳入评分系统,以总分≤5分判定为炎症分级G<2,5分以上判定为炎症分级G≥2,判定结果与肝组织炎症、坏死程度的符合率为82.8%,以此系统筛选G≥2患者的敏感性为83.8%,特异性为81.2%,阳性预测值为88.6%,评分系统应用于大于12岁患者的符合率、敏感性、特异性、阳性预测值分别达到86.7%、88.0%、84.7%和90.6%.结论 建立的评分系统能初步评估慢性乙型肝炎患者,尤其是>12岁患者的肝组织炎症坏死程度.     

检测HIV-1/2型抗体的双抗原夹心方法的建立及其试剂盒的研制

为建立更敏感的检测人免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)抗体的方法 ,并研制检测试剂盒。根据ＨＩＶ 1/ 2型的基因序列及其所编码氨基酸结构 ,采用固相法合成了ＨＩＶ 1型的ｇｐ4 1.1、ｇｐ4 1.2、ｇｐ12 0、Ｐ2 4和ＨＩＶ 2型的ｇｐ36　 5条多肽 ,混合包被酶标板作为固相抗原 ,并用辣根过氧化物酶标记以上多肽抗原作为标记物 ,建立检测血清中ＨＩＶ 1/ 2抗体的双抗原夹心ＥＬＩＳＡ法。同时 ,应用该方法制备检测ＨＩＶ抗体的试剂盒 ,并检测 3批卫生部药品和生物制品检定所ＨＩＶ诊断试剂国家参比品。用检定所参比品检测 ,该方法特异性、灵敏度均为 10 …     

双抗原夹心法检测抗HIV-1/2总抗体方法的建立和评价

目的 进一步提高HIv感染诊断试剂的敏感性。方法 以人工合成的HIv—1 gp41．1(sP1)、gp41．2(sP2)、gp120(sP3)、P24(sP4)和HIV—2gp36(sP5)5条多肽，采用双抗原夹心酶链免疫吸附试验(ELISA)原理，以sP1、sP3、sP4和sP5混合包被酶标板作为因相抗原，辣根过氧化物酶标记sp1、sp2、sP4和sP5多肽为标记物，建立了检测抗HIV—1／2总抗体的双抗原夹心ELISA法。结果 检测卫生部药品生物制品检定所第2代40份质控参比血清，其特异性和灵敏度均为100％，高于间接ELISA法(特异性为90％，灵敏度为65％)。检测210份其他病种患者血清均为阴性，与雅培HIVAB试剂比较检测如份健康献血员血清和88份HIv感染者血清，符合率为100％。结论 本方法特异性强、敏感性高，操作简便，适用于献血员的筛选和临床HIv感染的检测。     

抗人红细胞抗体和HIV抗原融合蛋白的构建及活性鉴定

目的构建及表达抗红细胞(RBC)单链抗体(ScFv)和HIV抗原的融合蛋白,并做活性测试。方法将鼠抗人红细胞单链抗体可变区重链、轻链基因与HIV抗原基因相连,重组于高效表达载体中,并在大肠埃希菌中表达。结果经ELISA检测和红细胞凝集检测,证明表达的融合蛋白具有HIV抗原和抗人红细胞的双重活性,可使含有HIV抗体的红细胞悬液凝集。结论融合蛋白构建成功,可用于HIV的快速检测。     

HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测试剂盒的研制与评价

目的研制HIV-1／2抗体和P24抗原联合检测酶免疫试剂盒并评价其实用性。方法联合使用基因工程HIVI／2型抗原和抗HIVP24单克隆抗体包被酶联反应板，以辣根过氧化物酶标记的HIVI／2型抗原和生物素化的兔抗HIVP24抗体作为标记物，研制了联合检测HIVI／2抗体和P24抗原的ELISA诊断试剂，并对其特异性、敏感性、稳定性等进行评价和临床考评。结果检测P24抗原质控品的灵敏度可达0．2ng／ml；与雅培公司试剂比较检测78份AIDS患者血清和85份正常人血清、对照检测中国药品生物制品检定所研制的HIV参比血清，特异度和灵敏度均为100％。临床考核检测12051份各种血清，灵敏度为100％（543／543），特异度为99．48％（11448／11508）。试剂在37℃放置6d后，试验结果无明显差异。结论本试剂盒具备特异度强、敏感度高、稳定性好、操作简便等优点，可以一步检出HIV特异性抗体和HIVP24抗原，缩短了HIV感染的检测窗口期，适用于HIV感染的实验室诊断和流行病学调查。     

甲型肝炎患者血清特异性IgM、IgA及总抗体动态变化与临床意义

对６０例甲型肝炎患者血清抗甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）ＩｇＭ、ＩｇＡ及总抗体从发病起进行了１年动态观测，并以病程、病情不同分组观察分析。发现病程、病情不同患者抗－ＨＡＶ－ＩｇＡ滴度变化不同，病程长、病情重者，该抗体下降缓慢，持续阳性时间稍长。     

抗HIV-1核心抗原p24单克隆抗体的制备及特性的初步鉴定

目的 :建立分泌抗HIV 1p2 4单克隆抗体 (mAb)的杂交瘤细胞株 ,并对其特性进行初步鉴定。方法 :以纯化的基因工程制备的p2 4抗原免疫BALB/c小鼠 ,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2 /0骨髓瘤细胞融合 ,经HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化后 ,用间接ELISA法及Dotblot对其进行筛选和特性鉴定。结果 :筛选到 2株可分泌抗HIV 1p2 4mAb的杂交瘤细胞 ,其腹水效价为 1×10 -5,亲和力为 1.7× 10 4～ 1.8×10 4mol/L ,mAb的Ig亚类均为IgG1。两株mAb与HBcAg、HCVRNA阳性血清及HIVgp4 1等均无交叉反应 ,只与HIV 1p2 4抗原阳性血清产生特异反应。结论 :成功地建立了 2株可分泌抗HIV 1p2 4mAb的杂交瘤细胞 ,为进一步研制HIV 1p2 4抗原的ELISA检测试剂盒奠定了基础