探讨不同浓度SPIO对人成纤维细胞标记率和细胞活力影响及其MRI的实验研究

目的:探讨不同浓度超顺磁性氧化铁纳米粒子（Super-paramagneticironoxide,SPIO）体外标记人成纤维细胞（Humanfibroblastcells,Hfbs）的磁性标记率、对细胞生长活力的影响,以及体外磁共振成像（Magneticresonanceimaging,MRI）成像的特征。方法:将单纯SPIO（铁浓度为200μg/ml）、不同浓度的SPIO-多聚赖氨酸复合物分别与培养基混合（铁的终浓度分别为150、100、50、25μg/ml,PLL终浓度为7.5μg/ml）,加入Hfbs共同培养12、24、48、72h后收集细胞。采用台盼蓝排除试验检测细胞活性和普鲁士蓝染色法检测细胞铁分布。运用光学显微镜、透射电镜观察铁颗粒在细胞内的位置、计算其标记率;MR扫描观察细胞信号强度变化情况。结果:SPIO-多聚赖氨酸复合物组细胞标记率显著高于单纯SPIO标记组（P<0.05）,台盼蓝排除试验显示,100μgFe/ml及其以下浓度组细胞活力与对照组之间差异无统计学意义（P>0.05）。普鲁士蓝染色显示每个标记细胞胞质内可见多少不等的蓝染铁颗粒,电镜显示铁颗粒集中于内涵体和溶酶体中;含量在25～50μgFe/ml的培养液是SPIO标记干细胞的安全浓度,在此浓度阈值标记后孵育18～24h即可有效标记细胞95%～100%;MR扫描显示标记细胞信号强度明显降低。结论:自制合成的SPIO-多聚赖氨酸复合物可以简便、安全的标记人成纤维细胞。并且在适当浓度25μgFe/ml标记细胞不仅标记效率高,而且对细胞活力无明显影响,SPIO标记细胞明显降低MR扫描下的细胞信号强度。     

神经干细胞衰老与核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路的关系

目的 建立D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠神经干细胞(NSCs)体外衰老模型,探讨NSCs衰老与细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的关系.方法 取新生C57BL/6J小鼠全脑,分离、鉴定NSCs,培养至第3代,随机分为对照组和衰老组.对照组细胞在NSCs培养基中常规培养48 h,衰老...