百日咳杆菌外膜蛋白及其组分的制备和特性分析

经反复冻融和超声波击碎的百日咳杆菌,用Triton X-100抽提后获得外膜蛋白(OMP),再经Sephadex G-100层析后分成5个组分(OMP1～OMP5),其分子量分别为89000、38000、36000、34000和30000.SDS-PAGE图谱显示,OMP含有百日咳I相菌株所特有的分子量为30000和28000的两条蛋白带.OMP及其各组分的内毒素活性仅为大肠杆菌脂多糖的1/500-1/5000,对小鼠的主动保护作用与全细胞死菌苗相似,其抗血清对小鼠也有较强的被动保护作用.实验结果表明,OMP及其组分制备较为简便,且具有较强的保护力.因此,OMP及其组分可作为百日咳杆菌的高效低毒的无细胞疫苗.     

百日咳杆菌外膜蛋白及其组分的毒性与免疫原性

应用Triton X—100抽提和SephadexG—100层析获得百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)及其5个组分(OMP_1～OMP_5)。OMP_1～OMP_4均具有促白细胞增多、组胺敏感和胰岛活化蛋白的活性。OMP及其各组分对CHO细胞具有毒性作用,可使该细胞出现聚集生长,~3 H—TdR掺入量下降和核糖体大量脱落及膜旁颗粒减少等现象。OMP和OMP_1～OMP_5免疫原及其抗血清对小鼠的脑内百日咳杆菌感染有较强的主动和被动保护作用。实验结果表明某些OMP组分具有百日咳杆菌毒素的类似毒性,OMP及其组分的毒性与保护作用虽存在一定的关系,但不成正比例。     

梅毒患者外周血TH1/TH2淋巴细胞比的检测

目的探讨梅毒患者外周血TH1/TH2淋巴细胞比分布的漂移情况及其与梅毒病程的相关性. 方法采用流式细胞分析技术检测38例Ⅱ期梅毒患者和20例健康体检者外周血CD3 、CD8-T细胞胞内细胞因子IFN-γ和IL-4的表达. 结果与正常对照组相比,显性梅毒、隐性梅毒患者的TH1细胞数降低,TH2细胞数增高,TH1/TH2比值降低,差异有显著性(P<0.01);而隐性梅毒与显性梅毒比较,其TH1淋巴细胞数显著下降(P<0.05),TH2和TH1/TH2比值差异均无显著性(P>0.05). 结论梅毒患者TH1型反应模式占弱势状态,TH2型反应模式处于优势状态,TH1/TH2平衡失调,TH1/TH2平衡向TH2方向漂移,这可能导致机体不能有效清除TP,促进疾病向潜伏阶段发展.     

祛瘀消肿合剂治疗急性硬膜外血肿340例影像学观察

硬膜外血肿是指外伤后集聚在硬膜外腔的血肿[1]。1998年06月~2005年06月,我们运用祖国医药学理论对急性硬膜外血肿设计中医方剂,即祛瘀消肿合剂,并在影像学检查的指导下,观察临床疗效。现报告如下。1资料与方法1.1临床资料选择在临沂市市直机关医院影像科、临沂市中医医院神经外科、临沂市人民医院神经内科,接受检查治疗、系统观察的患者450例作为研究对象。其中治疗组340例,对照组110例。治疗组:男298例,女42例;年龄8~88岁;本组患者经颅脑CT或MR I检查确诊,其中交通伤232例,高处坠落伤68例,击伤40例;伤后意识障碍<30m in 234例,<60~120m …     

抗缪勒氏管激素在诊断多囊卵巢综合征中的临床价值

目的探讨抗缪勒氏管激素(anti-Mullerianhormone,AMH)在诊断多囊卵巢综合征(polysystic ovary syndrome,PCOS)中的临床价值。方法检测90例PCOS患者及80例年龄匹配的健康对照者血清AMH、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、血清脱氢表雄酮(DHEAS)、性激素结合球蛋白(SHBG)、空腹血糖、空腹胰岛素水平,及比较PCOS患者与健康对照者的AMH水平差异;以及50例高T值组PCOS患者(T值≥100 ng/dl)和40例正常T值组PCOS患者(T值100 ng/dl)上述指标的差异和相关性。结果 PCOS患者AMH水平与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);高T值组与正常T值组PCOS患者AMH、LH、LH/FSH、DHEAS水平差异有统计学意义(P0.05),而年龄、SHBG、葡萄糖、胰岛素水平比较,差异无统计学意义(P0.05),且高T值组PCOS患者AMH、LH、LH/FSH、DHEAS水平均高于正常T值组。总PCOS组患者AMH水平与LH水平呈正相关(P0.05)。正常T值组患者AMH水平与LH呈正相关(P0.05)。结论 PCOS患者血清AMH水平明显增高,对诊断PCOS患者有重要的临床价值。     

脑脊液DNA含量的流式细胞分析脑膜转移癌患者一例

流式细胞术(FCM)测定细胞DNA含量已逐渐应用于肿瘤诊断、治疗及预后判定。我们用流式细胞仪测定1例肺癌脑膜转移患者脑脊液标本中细胞的DNA含量，并检测到肿瘤细胞的DNA异倍体。     

实时荧光聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、D

目的建立一种快速、准确、特异、定量检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素A、D的方法并探讨肠毒素在食物中毒引起腹泻中的意义。方法选择femB、SEA和SED基因分别作为金黄色葡萄球菌菌株、肠毒素A、肠毒素D的靶序列,设计合成引物和探针;收集食物中毒导致腹泻患者粪便标本487份,并对其进行检测分析。结果采用荧光聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌和肠毒素A的灵敏度为1·0×102拷贝,而检测肠毒素D的灵敏度为1·0×103拷贝;487份粪便标本中检出金黄色葡萄球菌72例(14·8%),检出产肠毒素A菌株为11例(15·3%,11/72),产肠毒素D菌株为9例(12·5%,9/72),同时产肠毒素A、D菌株1例(1·4%,1/72)。结论应用Taqman探针实时荧光PCR技术能够快速、准确检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素,适合于大样本筛查;肠毒素是金黄色葡萄球菌食物中毒导致腹泻的重要病因之一。     

血管紧张素I转换酶基因多态性与急性脑血管病的关系

目的 研究血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性和急性脑血管病（ＡＣＶＤ）的发病关系。方法 应用ＰＣＲ方法检测１５０例ＡＣＶＤ患者和１１７名正常人ＡＣＥ基因的缺失／插入多态性，同时测定血浆血管紧张素ＩＩ（ＡｎｇⅡ）水平。结果 ＡＣＶＤ患者的ＡＣＥ基因型及等位基因频率和正常对照组比较差异无显著意义，脑卒中和高血压家族阳性患者的ＤＤ型及Ｄ等位基因频率明显高于阴性家族史的患者，ＡＣＶＤ患者血浆ＡｎｇⅡ水平     

氧化低密度脂蛋白和一氧化氮的相互作用及其在缺血性脑卒中发病中的作用

目的研究急性缺血性脑卒中患者血浆氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）与一氧化氮（ＮＯ）的关系及它们在缺血性脑卒中发病机制中的作用。方法测定４５名健康体检者、２０例动脉硬化患者和７５例急性缺血性脑卒中患者血浆ＬＤＬ及体外氧化获得的ｏｘＬＤＬ对血小板聚集功能和ＮＯ水平的影响。结果动脉硬化和脑卒中患者血浆ｏｘＬＤＬ值均明显升高,提示血浆ＬＤＬ及ｏｘＬＤＬ对血小板聚集有明显的促进作用,同时降低ＮＯ水平;血小板聚集的增强和ｏｘＬＤＬ呈正相关,和ＮＯ呈负相关,而和ＬＤＬ水平无相关性。结论脑卒中和动脉硬化患者ＬＤＬ对氧化修饰的易感性增加,氧化修饰的ＬＤＬ通过激活血小板、灭活ＮＯ而促进动脉粥样硬化,易致血栓形成。因此,抗氧化治疗在脑卒中和动脉硬化的防治中有重要意义。     

高乳糜样品对透射比浊法测定影响的实验研究

目的 探讨高乳糜样品对透射比浊法测定结果的影响及相关分析.方法 以载脂蛋白B(ApoB)免疫透射比浊法为例,用两点终点法测定加入不同浓度脂肪乳剂的不同浓度混合血清,观察其结果变化.结果 本次实验中当空白吸光度＜0.1A,对测定结果影响无统计学差异;当空白吸光度＞0.1A时,测定结果有显著差异(P＜0.01).结论 对高乳糜样品进行测定时,应对样品进行一定比例稀释,以消除脂浊影响,保证结果的准确性.