短发卡RNA特异性抑制Survivin基因在U251细胞中的表达

目的构建针对人Survivin基因的特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其在人脑胶质母细胞瘤U251细胞中对Survivin基因表达的抑制作用.方法根据Survivin cDNA编码序列,设计并合成针对Survivin基因的特异性RNA干涉片断,将其克隆入pWH1质粒载体,构建Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR.通过脂质体介导将pWH1-SR载体和空载体pWH1分别转染入U251细胞,经G418筛选,建立稳定转染的细胞系U251-SR和U251-P.采用RT-PCR、Western blot和免疫组化方法检测Survivin mRNA和蛋白在U251、U251-P和U251-SR细胞中的表达水平.结果成功构建了Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR,经酶切鉴定证实克隆正确.获得了稳定转染pWH1-SR载体和空载体pWH1的细胞系U251-SR和U251-P.U251-SR细胞Survivin mRNA和蛋白表达均受到明显抑制,抑制率分别达87%和91%;U251-P细胞Survivin基因表达水平无明显变化.结论特异性shRNA能够明显抑制Survivin基因在U251细胞中的表达,这为进一步研究Survivin在U251细胞中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础.     

头部外伤后癔症样反应的诊断及治疗

在临床工作中，有少部分颅脑损伤患者的临床表现与受伤程度、临床检查及影像学资料极不相符，是以癔症样症候群来就诊。由于此类病例数少，未引起临床工作者足够重视。为此，笔者对我科近12年来遇到的18例此类患者的临床表现、诊断及治疗作回顾性分析。     

SCL-90心理测评及针对性护理干预在脑动脉狭窄行支架置入治疗患者中的应用效果

目的调查脑动脉狭窄患者支架植入术前后的心理状况。方法选择我院收治的脑动脉狭窄患者40例(研究组),行脑动脉造影血管内支架治疗,选择同期行脑动脉造影无血管异常的患者40例(对照组),全部患者脑血管造影后进行SCL-90症状自评量表测定,对于研究组患者进行健康教育干预,1周后行第2次SCL-90测定,比较研究组干预前后、对照组以及常模组的心理状况。结果研究组干预前强迫、焦虑、抑郁等各项评分均明显高于对照组和常模组,差异有统计学意义(P<0.05);健康干预后,研究组各项SCL-90评分较干预前明显降低,躯体化症状、焦虑、抑郁、恐惧、人际关系评分与干预前比较差异有统计学意义(P<0.05),与常模组无明显差异(P>0.05),但敌对、偏执、强迫仍高于常模组(P<0.05)。结论脑动脉血管狭窄支架植入治疗患者存在明显的心理状况问题,有必要在支架植入前后进行心理干预,以促进患者恢复。     

幕上幕下联合入路切除颅内肿瘤28例临床观察

目的:对28例应用幕上幕下联合入路肿瘤切除的病例进行回顾研究,以期进一步提高该手术方式的疗效.方法:全组28例,肿瘤均位于小脑幕上下;23例(82.1%)有头痛、头晕等颅内压增高症状;18例(64.3%)出现与听觉有关的症状;13例(46.4%)有小脑损害症状.采用显微外科技术与幕上幕下联合入路切除肿瘤.结果:本组手术全切者22例,大部切除者6例.术后均恢复良好,无死亡.通过信访或门诊随访10个月～10年,24例完全恢复健康,2例生活需要照顾,2例有不同程度恢复.结论:侵及幕上幕下的肿瘤多为良性,以脑膜瘤、神经鞘瘤常见,采用幕上幕下联合入路,在显微镜下分块切除,可最大限度的切除肿瘤,并保护脑重要结构,疗效较好.     

自发性蛛网膜下腔出血误诊1例

自发性蛛网膜下腔出血 ,典型病例诊断较易 ,但对出血量较少、临床表现不明显或发病诱因不清者极易误诊 ,我院遇到 1例 ,现报告如下。　　病人 ,男 ,2 1岁 ,因骑摩托车摔伤 ,被收入院。查体 :T37.4℃ ,P50次 / min,BP14/ 8k Pa,神志模糊 ,呈浅昏迷状态 ,对答不切题 ,诉头痛、颈项痛 ,无恶心、呕吐 ,近事遗忘 ,右侧上下眼睑浮肿 ,眼裂变小 ,右面颊部见一 3cm× 3cm之皮肤擦伤创面 ,周围组织肿胀。神经系统检查 :瞳孔 3mm,等大等圆 ,对光反应迟钝 ,眼球各向运动正常 ,鼻唇沟对称 ,伸舌居中 ,颈项抵抗感 ,肌力 5级 ,肌张力正常 ,腱反射 (± ) …     

Survivin在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨凋亡蛋白抑制因子Survivin在人脑胶质瘤中的表达水平及与脑胶质瘤发生发展的关系.方法:采用免疫组化SABC方法检测Survivin蛋白在83例脑胶质瘤和12例正常脑组织标本中的表达水平.结果:Survivin在脑胶质瘤及正常脑组织中的表达阳性率及免疫反应评分(IRS)分别为57.8%、3.75±3.89和8.3%、0.17±0.58,两者间表达阳性率及IRS均有极显著差异(P均＜0.01).Ⅰ～Ⅳ级以及良、恶性脑胶质瘤Survivin表达阳性率分别为29.4%、44.0%、72.2%、82.6%和38.1%、78.0%,在脑胶质瘤不同病理级别以及不同恶性度间Survivin表达阳性率均有极显著差异(P=0.002,P＜0.01).Ⅰ～Ⅳ级以及良、恶性脑胶质瘤Survivin IRS分别为1.29±2.62、2.56±3.44、4.78±3.89、6.04±3.78和2.05±3.16、5.49±3.83,在脑胶质瘤不同病理级别以及不同恶性度间Survivin IRS也有极显著差异(P均＜0.01).结论:Survivin在脑胶质瘤中高表达,且随脑胶质瘤病理级别的增高而表达增强,Survivin在脑胶质瘤发生发展过程中具有重要作用.     

神经元机械性损伤后Homer蛋白表达及意义

目的研究体外培养神经元机械损伤后不同亚型Homer蛋白表达的变化规律,进一步阐明Homer与神经元损伤的关系.方法胎鼠脑皮质神经元体外培养7 d,以微量移液器塑料滴头划割培养的神经元,横、竖各划8道,划伤宽度约1 mm,造成机械性损伤.在伤后不同时间(10、30 min,1、3、6、12、24、72 h),采用链酶亲合素-过氧化物酶复合物法(SABC法)行免疫组化染色.对照组不进行机械性划割,其它处理同损伤组.结果对照组神经元在各时间点Homer 1a免疫组化染色呈弱阳性.机械性损伤后从伤后10 min持续至24 h Homer 1a表达量增加,免疫组化染色呈阳性.阳性染色呈颗粒状分布于胞浆、胞膜及突起.Homer 1b/c,Homer 2a/b和Homer 3在对照组神经元中即有一定程度表达,机械性损伤后,其表达量无明显变化.结论神经元机械性损伤后Homer 1a表达明显升高,而Homer 1b/c、2a/b和3表达无明显变化. Homer 1a对第1组代谢型谷氨酸受体(mGluR)的功能具有负反馈作用,Homer 1b/c、2a/b和3则调节mGluR在细胞表面的分布,提高其稳定性.据此推测,增加Homer 1a表达或减少Homer 1b/c、2a/b和3的表达可能改变mGluR受体信号的传递效率,对神经元具有保护作用.     

钛颅骨修补材料对患者机体免疫功能的影响

0　引言　近几年有色金属钛作为骨的替代材料已受到临床重视 ,目前国内临床上所用的颅骨修补钛成品材料多为进口 ,国产成品材料甚少 .我科选用国产纯钛 ,在组织相容性、毒性和免疫排斥反应经动物实验和临床观察的基础上 ,研制出成套(钛板和钛锣钉 )颅骨修补材料 ,但尚缺乏临床资料 .Ｔ淋巴细胞亚群是衡量免疫排斥反应的重要指标 ,已被广泛应用于器官移植 .为了解国产钛颅骨修补材料对人机体免疫系统的影响 ,我们观察了术前、术后不同时期Ｔ淋巴细胞亚群的变化 .1　对象和方法　①西京医院神经外科 2 0 0 0 0 6 2 0 0 1 0 8收治2 1例颅骨缺…     

IFN-β基因诱导胶质瘤细胞凋亡及Fas表达上调

目的：研究β干扰素(Interferon-β,IFN-β)基因对人脑胶质瘤细胞的诱导凋亡作用,以及能否导致胶质瘤细胞Fas表达上调,并探讨了细胞凋亡及Fas表达上调之间的相关联系．方法：建立裸鼠SHG44胶质瘤模型,用脂质体包埋法将IFN-β基因的真核表达载体pSV2IFNβ注入裸鼠皮下SHG44脑胶质瘤,观察肿瘤生长情况并计算肿瘤体积,通过免疫组化、TUNEL染色,了解IFN-β基因诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的作用以及胶质瘤细胞Fas表达情况．结果：IFN-β在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达,裸鼠皮下胶质瘤生长明显受到抑制,并诱导SHG44胶质瘤细胞凋亡,胶质瘤细胞Fas表达显高于对照组．结论：IFN-β基因能够抑制人脑胶质瘤生长,并诱导胶质瘤细胞凋亡;IFN-β基因诱导胶质瘤细胞凋亡可能是通过促使Fas表达上调的结果．     

人脑胶质瘤中CCND1基因的转录与表达

目的检测和分析人脑胶质瘤中CCND1基因的转录与表达,及其对肿瘤发生、发展的生物学意义.方法采用免疫组化、原位杂交法检测52例人脑胶质瘤及8例正常人脑组织中Cyclin D1 mRNA蛋白以及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平.结果脑胶质瘤中CD1蛋白及mRNA呈过度表达,其标记指数和阳性率随肿瘤的恶性程度增高而增加.两者的标记指数之间、以及与PCNA标记指数之间均为显著正性相关.结论人脑胶质瘤中CCND1过度转录和表达,随胶质瘤临床病理分级增加而增高,同时与肿瘤细胞增殖状态密切相关,提示CCND1基因的异常转录和表达在胶质瘤的发生与发展中起着重要的促进作用.