MAPK8基因在小鼠源性3T3-Ll脂肪细胞诱导分化中表达水平的变化

[目的]观察小鼠源性3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化过程中MAPK8基因表达水平的变化,探讨MAPK8基因与肥胖发生之间的关系.[方法]体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,在诱导3T3-L1脂肪细胞分化成熟的不同时段,采用RT-PCR技术检测脂肪细胞中MAPK8基因的mRNA表达水平.[结果]MAPK8基因高表达于3T3-L1脂肪前体细胞中,随细胞分化成熟该基因表达水平逐渐下调.MAPK8基因表达水平除在诱导分化前至第4 d、第2～5 d、第6～10 d时段内差异无显著性外,其余各时段间差异均有显著性(P＜0.05).[结论]MAPK8基因与肥胖发生有关,在3T3-L1细胞分化过程中表达逐渐下调可能有利于脂肪细胞的分化成熟和脂质积聚.     

应用ROC曲线评估年龄、窦卵泡数及基础卵泡刺激素预测卵巢储备功能的价值

目的:探讨年龄、窦卵泡数(antral follicle count,AFC)、基础卵泡刺激素(bF-SH)预测卵巢储备功能的价值。方法:应用受试者工作特征曲线(ROC),回顾性分析本中心2003年1月～2009年12月6387例应用长方案行体外受精/卵细胞内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)患者的临床资料。结果:(1)年龄、AFC与bFSH预测卵巢低反应的ROC曲线下面积AUCl、AUC2、AUC3分别为0.69、0.86、0.70,均大于机会参考线下面积(P<0.05),AUC2大于AUCl及AUC3,差异有统计学意义(Z12=9.43,Z23=8.21,P均<0.05),AUCl及AUC3差异无统计意义(Z13=0.35,P>0.05)。(2)年龄、AFC与bFSH预测临床妊娠的ROC曲线下面积AUC4、AUC5、AUC6分别为0.57、0.55、0.53,均大于机会参考线下面积(P<0.05),AUC4大于AUC5及AUC6,差异有统计学意义(Z45=2.21,Z46=3.98,P均<0.05),AUC5与AUC6差异无统计意义(Z56=1.77,P>0.05)。(3)AUCl值、AUC2值、AUC3均分别显著大于AUC4、AUC5、AUC6(Z14=7.18,Z25=24.75,Z36=9.31,P均<0.05)。结论:年龄、AFC及bFSH均能预测卵巢的储备功能。对于卵巢低反应的预测价值,AFC高于年龄及bFSH。对于临床妊娠的预测价值,年龄高于AFC及bFSH。且年龄、AFC及bFSH对卵巢低反应的预测价值均高于对临床妊娠的预测价值。     

长链脂肪乳对反复种植失败患者外周血Treg细胞比例失衡的调节作用

目的：探讨长链脂肪乳对反复种植失败（repeated implantation failure,RIF）患者外周血调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）比例失衡的调节作用。方法：选择2016年5—12月在南京鼓楼医院生殖中心行辅助助孕RIF患者75例,静脉长链脂肪乳治疗后分别用流式细胞技术检测外周血Treg细胞亚群比例。结果：75例RIF患者经静脉脂肪乳治疗后,外周血中Treg细胞亚群比例为（2.46±1.23）%,较治疗前的（2.30±0.83）%虽有所上升,但差异无统计学意义。进一步分析治疗前外周血Treg细胞比例异常降低的35例RIF患者,结果显示,静脉脂肪乳治疗后,该组RIF患者外周血中Treg细胞亚群比例为（2.18±0.64）%,较治疗前的（1.63±0.29）% 显著上升,差异有统计学意义（P < 0.001）。结论：长链脂肪乳对于RIF患者外周血Treg细胞比例失衡具有调节作用,可能在诱导免疫耐受,促进胚胎植入,降低流产率中发挥作用。     

人胚胎干细胞系NJGLLhES1的建立

目的:使用人类冷冻胚胎建立新的人胚胎干细胞系。方法:将人类冷冻胚胎解冻后培养至囊胚,用免疫外科法分离内细胞团,以ICR小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,机械法传代。将此细胞系命名为NJGLLhES1,检测其核型,对其碱性磷酸酶和特异性标记物(Oct-4,SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60,TRA-1-81)进行鉴定,并进行类胚体形成实验及畸胎瘤成瘤实验,对其体内外分化能力进行检测。结果:NJGLLhES1已在体外培养逾1年时间。细胞呈人胚胎干细胞克隆样,具正常人类核型,碱性磷酸酶和胚胎特异性标记物的表达为阳性,可形成类胚体和畸胎瘤。结论:成功建立人胚胎干细胞系NJGLLhES1,此细胞系具人胚胎干细胞形态特征,可长期稳定增殖且保持不分化状态,核型正常,在体内外具有多向分化潜能。     

脂肪组织提取细胞及其临床展望

新近发现的脂肪组织提取细胞(PLA细胞)已成为干细胞研究的又一热点。PLA细胞不但具有自体来源、容易获取、再生能力强、低衰老性等特点。而且尚具备多向分化潜能，可定向分化为脂肪细胞、肌细胞、软骨细胞及成骨细胞等。该文对PLA细胞的基本特性及多向分化潜能进行综述，并探讨其在基因治疗中的优势和临床应用前景。     

附睾及睾丸精子行ICSI治疗无精子症妊娠结局

目的 :回顾性分析 5 0例无精子症患者利用附睾或睾丸精子行卵细胞胞质内单精子注射 (ICSI)的治疗结局。　方法 :经皮附睾精子抽吸术 (PESA)或睾丸切开取精术 (TESE)获得精子行ICSI,评估取精的成功率 ,ICSI后的受精率、种植率及临床妊娠率 ,以精液精子ICSI组作为对照。　结果 :PESA、TESE与精液精子组分别注射MⅡ期成熟卵子 2 86、36 0、15 6 9个 ,受精率 3组差异无显著性 (74 .8% ,75 .2 %vs 77.5 % ,P >0 .0 5 )。种植率、妊娠率TESE与精液精子组差异无显著性 (2 9.87%vs 2 9.5 4 % ;4 8.15 %vs 5 2 .6 0 % ,P >0 .0 5 ) ,PESA组显著高于TESE组及精液精子组 (5 0 .85 %vs 2 9.87% ,2 9.5 4 % ;6 8%vs 4 8.15 % ,5 2 .6 0 % ,P <0 .0 5 )。PESA组共妊娠 17例 ,已分娩 6例 ,继续妊娠 9例 ,流产 2例 ;TESE组共妊娠 13例 ,已分娩 7例 ,继续妊娠 4例 ,流产 2例。　结论 :采用附睾或睾丸精子行ICSI是治疗男性无精子症的有效方法。     

体外受精-胚胎移植周期卵细胞MetaphaseⅠ期停滞的形态学特征

目的:观察体外受精-胚胎移植周期中全部卵细胞M etaphase I期停滞的形态学特征与体外成熟培养促熟率。方法:2例体外受精-胚胎移植周期患者,获得卵细胞均处于M etaphase I期,行体外成熟培养,同期评价其形态学特征。结果:M etaphase I期停滞卵细胞的胞质质地均一,透明带致密透亮,无卵周隙。卵周颗粒细胞与透明带、颗粒细胞之间结构松散,无放射样形态。经体外成熟培养,24、48、72 h形态学特征观察无明显改变,无极体放出,均停滞于M etaphase I期。结论:体外受精-胚胎移植周期出现全部卵细胞M etaphaseⅠ期停滞的卵细胞存在特有形态学特征,现有体外成熟培养方法尚无法促熟。     

年龄、基础卵泡刺激素及窦卵泡数预测卵巢反应性的价值

目的 探讨年龄、基础卵泡刺激素（bFSH）及基础窦卵泡数（antral follicle count,AFC）预测卵巢反应性的价值.方法 回顾性分析本中心2003年1月至2009年7月5,453例应用长方案行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植（IVF/ICSI-ET）患者的临床资料.结果 （1）年龄、bFSH 与外源性促性腺激素（Gn）用量呈显著正相关,AFC与Gn用量呈显著负相关（r分别为0.364、0.325和-0.450）.年龄、bFSH 与成熟卵泡数呈显著负相关,AFC与成熟卵泡数呈显著正相关 （r分别为-0.285、-0.299和0.516）.AFC与Gn用量及成熟卵泡的相关性均最密切.（2）年龄、bFSH 与AFC预测卵巢低反应的ROC曲线下面积AUC I、AUC2、AUC3分别为0.68、0.69、0.85,均显著〉参考下面积（P均〈0.05）;AUC3均大于AUC1及AUC2,差异有统计学意义（Z13=9.42,Z23=7.28,P均〈0.05）,AUCI及AUC2比较无显著差异（Z12=0.46,P〉0.05）.结论 年龄、bFSH、AFC均可以预测卵巢反应性,且AFC的预测价值优于bFSH及年龄.     

完全受精失败周期应用早期补救性卵细胞胞质内单精子注射术的安全性评估

目的:评估完全受精失败周期应用早期补救性单精子卵细胞胞质内注射(ICSI)术的安全性。方法:105例早期补救性ICSI周期,随访临床结局。结果:早期补救性ICSI周期出生婴儿64名。出生婴儿的性别比无偏差,出生体重正常,无严重出生缺陷。结论:早期补救性ICSI没有增加临床应用的安全性风险,临床应用前景十分广阔。