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背景:核磁成像以其有效成像时间长,空间、时间分辨率高,对比度好的优点,在细胞活体示踪中显现出其独有的优势。
目的:观察超顺磁性氧化铁标记人脐带间充质干细胞的适宜浓度,及标记后干细胞移植入心肌梗死实验犬体内的MRI示踪成像。
方法:无菌条件下留取健康新生儿脐带,分离培养间充质干细胞并进行细胞表面标志检测。不同质量浓度的超顺磁性氧化铁标记第3代人脐带间充质干细胞,采用开胸冠状动脉结扎法建立犬心肌梗死模型并经心电图和病理对模型进行鉴定。56 mg/L超顺磁性氧化铁标记干细胞后移植实验组,相同质量浓度超顺磁性氧化铁注射对照组,分别于移植前、移植后第7,28天行核磁显像,第14,28天进行心肌病理检测。
结果与结论:分离得到的人脐带间充质干细胞表达间充质干细胞表面标记CD29,CD44及CD105均在90%以上,不表达造血细胞系的特征CD14,CD34与CD45。超顺磁性氧化铁质量浓度在14-84 mg/L时,对细胞增殖与活性无明显影响,标记率接近100%。心电图及组织病理检测均显示心肌梗死模型制作成功。56 mg/L的超顺磁性氧化铁标记细胞并移植后,核磁可对移植细胞清晰显像;病理检测可见普鲁士蓝染色阳性的细胞,生长方向同心肌细胞一致。提示14-84 mg/L范围的超顺磁性氧化铁可有效标记人脐带间充质干细胞,且核磁可以对超顺磁性氧化铁标记的人脐带间充质干细胞进行活体示踪。 相似文献
72.
自身免疫与耐受是当前免疫学研究的中心课题之一。自身免疫性疾病(autoimmune disease,AID)是一种免疫应答紊乱致使免疫系统对自身抗原攻击所产生的疾病,其特点是体内存在大量的自身抗体和(或)自身反应性淋巴细胞。AID的发病机制目前尚不完全清楚,有人认为,CD4 细胞在自身免疫反应中起主导作用,还有人认为自身免疫疾病是B细胞多克隆活化的结果[1]。最近的研究清楚地显示,大量产生的自身抗体导致的补体过度活化和补体介导的杀伤或炎症反应是自身组织损伤的直接首要原因[2.3]。此外,近年来补体分子作为非特异性免疫的主要成分,对特异性免疫的指导作用亦越来越受到人们的重视[4~6],补体缺陷 相似文献
73.
目的观察开胸结扎冠状动脉与闭胸明胶海绵栓塞法制备急性心肌梗死(AMI)动物模型的特点。方法分别经开胸结扎犬冠状动脉左前降支主干及闭胸冠脉栓塞的方法阻断冠脉血流;采用单级肢体导联和胸导联方式,在阻断前后监测心电图波形变化;造模72 h后取心肌组织行病理切片染色。结果经心电图和病理验证,两种方法均可成功制备犬心梗模型,开胸冠脉结扎犬死亡率较高,而冠脉栓塞成活率高。结论相较开胸冠脉结扎法,闭胸栓塞法制备心梗模型对动物损伤小,成活率高,具推广价值。 相似文献
74.
目的探讨RhD变异型患者产生类同种抗-D抗体的血清学特点及原因。方法对我院收治的RhD变异型1例的临床资料进行回顾性分析。结果本例因肝硬化失代偿8年,病情加重3 d再次入院。患者血型为A型RhD阳性,由于病情反复发作及贫血等原因多次输血,复检血型为Rh阳性D变异型,同时血清中产生类同种抗-D抗体。后选择A型RhD阴性ccdee的血液与患者血清进行交叉配血,结果主侧配血相符,输注红细胞2 U,未出现不良反应。结论 RhD变异型患者产生类同种抗-D抗体临床少见,选择避开类同种抗体的洗涤红细胞输注可保障输血安全。 相似文献
75.
76.
背景:相对于骨髓间充质干细胞来说,脐血间充质干细胞是一种较为理想的新的组织工程种子细胞来源,但其培养成功率较低。
目的:通过对培养基的选择、离心速度及时间、接种密度、生长因子的选择、首次换液时间等条件进行优化,拟建立一种稳定可靠的人脐血间充质干细胞的体外分离培养方法。
设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-01/10在白求恩国际和平医院输血科完成。
材料:健康足月剖宫产新生儿脐带血20份,由白求恩国际和平医院干细胞中心提供,产妇及其家属均知情同意。
方法:无菌条件下采集脐血,采用密度梯度离心法(1 500 r/ min 离心15 min)结合直接贴壁法体外分离脐血间充质干细胞,加入含体积分数为10%人脐带血血清、5 μg/L GM-CSF、15 μg/L白细胞介素3的DMEM/F12培养基,调整细胞密度为1×1010 L-1接种于人脐带血血清包被过的塑料培养瓶中,置于37 ℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度环境下培养,3 d后首次换液,去除未贴壁细胞,以后每隔24 h换液1次。当培养瓶中的细胞生长到80%融合时,胰酶-EDTA混合液消化传 代。
主要观察指标:倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞免疫表型。
结果:24 h后可见有少量细胞贴壁,48 h后贴壁细胞增多,并出现少量单极梭形细胞,7 d后可见细胞形成集落,培养两三周形成平行排列、辐射状或漩涡状细胞界限不清楚的成纤维样细胞,且80%~90%呈现融合。第2代细胞接种后12 h开始贴壁,10 d即可达80%~90%融合。流式细胞仪分析显示,此类细胞稳定地表达相关抗原标记CD29及CD44,但不表达造血细胞系表面标记CD34。
结论:实验在体外改良培养条件下成功分离出人脐血间充质干细胞,培养周期较短,细胞纯度较高,贴壁细胞稳定表达间充质干细胞表面相关抗原。 相似文献
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78.
79.
80.
目的 探讨Ax亚型伴冷反应自身抗体的发生机制及临床特点,提高临床医生对Ax亚型伴冷反应自身抗体的认识.方法 回顾分析1例Ax亚型伴冷反应自身抗体的临床资料.结果 患者因右下肢骨折入院拟行手术复位,术前申请备血400 ml,配血时发现ABO系统正反定型不符,正定型“0”型,反定型“A”型;Rh阳性,进一步行血清学试验和唾液型物质测定,最后确定为Ax亚型伴不规则冷反应自身抗体.对患者进行家系调查,患者血型与母亲相同.术前为患者准备2单位A型悬浮红细胞,但患者手术顺利,未输血治疗.结论 Ax亚型临床十分罕见,是A血型的一种弱表现型,临床上若具有弱A抗原的献血者血液被错误分型为O型面输注给O型患者时,会引发严重输血反应. 相似文献