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目的通过噬菌体展示技术构建人源抗恶性疟原虫单链抗体库(ScFv),从中筛选出高亲和力的抗体基因片段,为进一步单链抗体表达打下基础。方法收集患者新鲜外周血,进行淋巴细胞分离和总RNA的提取,提取总RNA经RT-PCR扩增出人源抗体重链和轻链抗体库,采用用重叠延伸拼接法将VH与VL以Linker相连组装成单链抗体基因(ScFv),将ScFv基因片段连接至载体pCANTAB5E,转化大肠杆菌TG 1感受态细胞,构建的鼠源性抗恶性疟原虫天然噬菌体抗体库。结果从20个噬菌体克隆中筛选到15个具有弓形虫可溶性抗原结合活性的阳性克隆。结论从外周血淋巴细胞中获取可变区基因,利用噬菌体抗体库技术制备人源抗恶性疟原虫单链抗体的策略是可行的。 相似文献
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目的 通过研究不同阶段各实验组小鼠血清中免疫球蛋白(IgE)及肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力与抑制率的改变,探索越婢加半夏汤对过敏性哮喘小鼠的作用机制。方法 采用卵白蛋白( OVA)、氢氧化铝凝胶混悬液腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立小鼠哮喘模型,各组小鼠治疗完成后处死,采用ELISA法检测各组小鼠血清IgE水平,采用WST-1法测定各组小鼠肺组织匀浆中SOD活力水平,肺组织HE染色,观察其病理变化。结果 中药制剂组小鼠与哮喘模型组小鼠相比,前者外周血清中IgE含量下降(P<0.05),IgE在2组间差异有统计学意义(P<0.05);前者肺组织匀浆中SOD活力与抑制率升高,SOD活力与抑制率在2组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 降低过敏性哮喘小鼠血清中IgE含量及升高小鼠肺组织SOD活力与抑制率水平,提高肺组织抗氧化能力,可能为越婢加半夏汤治疗过敏性哮喘的作用机制之一。 相似文献
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目的:基于内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)信号通路探讨槲皮素(quercetin,Que)对高脂饲料诱导的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠模型的干预作用及其机制。方法:高脂饲料喂养SD大鼠8周建立NAFLD模型,之后随机分为模型组、Que低剂量组(25 mg/kg)和Que高剂量组(50 mg/kg),另设正常饮食大鼠作为正常对照组,给药期间监测大鼠体重、进食量。继续饲养8周后,检测各组大鼠血清中胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(glutamic oxalacetic transaminase,A... 相似文献
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目的:观察四物汤等6个方剂多糖组分对小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)释放细胞因子(CK)水平的影响,探索上述复方疗效的可能机制,并为其活性成分的提取和筛选提供导向。方法:制备四物汤、四君子汤、六味地黄汤、玉屏风散、桂枝汤、龙胆泻肝汤等6个复方的总多糖组分,96孔板中检测其对小鼠腹腔Mφ释放白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子(CK)的影响。结果:各复方多糖组分能明显促进小鼠腹腔Mφ释放上述一个或多个CK,其效应具有浓度差异性(P<0.05或P<0.01);其中,相对于正常Mφ,复方多糖能促进经LPS诱导的Mφ释放更多种类的细胞因子。结论:6个复方多糖组分能促进小鼠腹腔Mφ释放不同的CK,可能与上述方剂的疗效机制有关,这为分离其活性成分提供了导向;同时也为建立中药活性成分的Mφ筛选模型提供了依据。 相似文献
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目的:探讨山东省高校实习护生工作准备度现状,分析不同类别护生工作准备度的潜在特征差异,并分析其影响因素,为制定针对性的工作准备度干预方案提供参考。方法:2023年9月—10月,采用一般人口学资料调查表、工作准备度量表、反馈寻求行为量表对山东省不同地区1 478名实习护生进行调查,并对工作准备度进行潜在类别分析。结果:1 478名实习护生工作准备度可分为低准备度组(26.05%)、中准备度组(41.88%)、高准备度组(32.07%)3个类别。与高准备度组比较,女性、反馈寻求行为越低,越容易进入高准备度组;与高准备度组比较,女性、本科学历、反馈寻求行为越低,越容易进入中准备度组;与中准备度组相比,寻求反馈行为越少越容易进入低准备度组。结论:山东省实习护生工作准备度水平可分为3类,护理管理者可根据不同类型实习护生的临床特征,提高实习护生反馈寻求行为,从而提升实习护生的工作准备度。 相似文献