TRAIL和endostatin双基因-放射治疗对人血管内皮细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的：观察重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES携带的双基因TRAIL和endostatin联合X射线照射后,对血管内皮细胞ECV304增殖、周期和凋亡的影响。方法：实验分为对照组、空载体pshuttle转染组、TRAIL单基因重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL转染组、endostatin单基因重组质粒pshuttle-Egr1-shES转染组和TRAIL、endostatin双基因重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES转染组。细胞转染采用脂质体介导的方法进行,对照组不转染。细胞转染后给予X射线照射（照射剂量分别为0、0.1、0.5、1.0、2.0和5.0 Gy）,采用ELISA法检测转染细胞中TRAIL和endostatin蛋白的表达,并分别采用MTT及PI单染或/和Annexin Ⅴ双染流式细胞术（FCM）检测TRAIL、endostatin单/双基因治疗联合放射治疗对ECV304细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。结果：2.0 Gy X射线照射后与0 h比较,各时间点转染pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES的ECV304细胞上清中TRAIL和endostatin蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,分别于12和24 h达峰值;不同剂量X射线照射可诱导TRAIL和endostatin蛋白表达,且蛋白表达水平随照射剂量的增加而明显升高（P<0.05或P<0.01）。MTT结果显示,X射线照射后, pshuttle-Egr1-shTRAIL、pshuttle-Egr1-shES和pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES组ECV304细胞A490值均明显低于对照组和pshuttle组,并显示一定的时间-效应和剂量-效应关系,并伴有细胞凋亡率明显增加、G₂+M期细胞百分数明显上升和G₀/G₁期细胞百分数明显下降。上述细胞效应,尤以pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES组变化最为明显,与pshuttle-Egr1-shTRAIL和pshuttle-Egr1-shES组比较差异有统计学意义（P<0.05 或 P<0.01）。结论： TRAIL和endostatin双基因联合放射治疗可抑制ECV304细胞生长,影响细胞周期进程,促进细胞凋亡,且其治疗效果优于单纯放射治疗或TRAIL/endostatin单基因-放射治疗。     

Survivin反义核酸真核表达载体的构建及在胶质瘤细胞中的表达

目的构建survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP-SVVas,并检测其在恶性胶质瘤细胞SHG-44中的表达。方法构建survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP-SVVas,并用脂质体介导转染入SHG-44细胞,通过RT-PCR及western blot检测细胞中survivin mRNA和蛋白的表达。结果构建了survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP-SWas,并成功导入SHG-44细胞中,且有效表达,使SHG-44细胞中survivin mRNA和蛋白表达水平均降低。结论Survivin反义核酸真核表达载体pIRES2-EGFP-sVVas可以降低SHG-44细胞survivin基因的表达。     

下肢穴位封闭致气性坏疽

苏××,男性,25岁,因左下肢背侧放射性疼痛于某公社医院将氢化考的松100毫克、0.25%普鲁卡因20毫升、50%葡萄糖15毫升分为三等份,分别于阳陵泉、承山、环跳三穴位注射。约四、五小时后即感左小腿剧痛、肿胀,予以一般止痛处理。第二日情况急剧变重,高热,小腿剧烈肿胀、疼痛,未注意有无气体,而给予四环素1克加入10%葡萄糖1000毫升中静脉滴入,未见好转,第三日转入××医院继续给予四环素1克、氢化考的松100毫克加入10毫升葡萄糖中静脉滴入。当日下午出现休克,血压40/0毫米汞柱,并发现在下肢皮下大量积气,给予快速静脉输入右旋     

含金属硫蛋白蛋奶粉对小鼠肝细胞实体瘤的治疗作用

目的：观察含金属硫蛋白（MT）蛋奶粉对荷瘤小鼠肝癌有无治疗作用。方法：70只BALB/c小鼠随机分为正常对照组10只、荷瘤鼠组20只、低剂量和高剂量含MT蛋奶粉肿瘤治疗组各20只。除正常对照组小鼠外，在其余小鼠体内移植H-22小鼠肝癌细胞株形成移植性肝癌模型，连续用含MT蛋奶粉给荷瘤小鼠灌胃2周后，每组断头处死10只小鼠，取其脾脏，采用MTT法检测各组小鼠淋巴细胞转化功能和IL-2活性，及流式细胞术检测脾脏CD4⁺、CD8⁺和CD25⁺ T细胞百分率以及淋巴细胞周期进程和凋亡的变化，以及³H-TDR 掺入法检测CTL和NK细胞杀伤活性，并采用细胞病变抑制法检测小鼠IFN-γ活性以及L929 体外杀伤法检测 TNF-α 活性。并于开始灌胃MT蛋奶粉后的第21～31天观察小鼠肿瘤大小。结果：在BALB/c小鼠形成肝癌第27、29及31天，含低剂量和高剂量MT蛋奶粉组小鼠肿瘤体积均明显小于肿瘤对照组（P<0.05）；含低剂量和高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组淋巴细胞刺激指数(SI)较肿瘤对照组均显著增加 （P<0.01），含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠脾脏CD4⁺细胞百分率及CD4⁺/CD8⁺比值较肿瘤对照组均显著增加（P<0.01，P<0.05），其CD25⁺ T细胞百分率较肿瘤对照组显著降低（P<0.01）；与肿瘤对照组比较，含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠淋巴细胞G₀/G₁期细胞百分率显著降低（P<0.05），G₂/M期细胞百分率显著增加（P<0.05）；同时，含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠淋巴细胞凋亡百分率较肿瘤对照组(荷瘤鼠组)显著降低（P<0.05）；荷瘤小鼠脾脏CTL细胞毒活性显著低于正常对照组（P<0.05），含高剂量MT组CTL细胞毒活性显著高于荷瘤小鼠（P<0.05）；荷瘤小鼠脾脏NK细胞毒活性明显低于正常对照组（P<0.05），而含MT肿瘤治疗组NK细胞毒活性明显高于荷瘤组小鼠，尤其以高剂量组为显著（P<0.01）。与肿瘤对照组比较，含高剂量MT蛋奶粉显著增加了荷瘤小鼠的IL-2和TNF-α活性（P<0.01），含低剂量MT蛋奶粉对荷瘤小鼠的TNF-α活性亦有明显提高作用（P<0.01），对IFN-γ活性并无显著影响。结论：含MT蛋奶粉对肿瘤的治疗性效应可能是通过增强荷瘤小鼠的免疫功能实现的。     

我国首例动力性心肌成形术成功

作者报告了我国首例成功地接受动力性心肌成形术患者的术前情况、手术方法,围手术期处理及术后结果,本例患者为男性,35岁,术前诊断为扩张性心肌病,慢性心力衰竭,心功能Ⅲ级(NYHA),术前X线检查心胸比率0.59;心电图示:窦性心律,偶见房、室性早搏,左心劳损;超声心动图示左心室扩张,射血分数减低,室壁运动弱,二尖瓣轻度返流,手术在全麻气管插管下分三步进行:1.完整游离左侧背阔肌,保留其血管神经蒂,并于近神经血管蒂端植入肌肉刺激电极,切除部分左第2前肋,将背阔肌瓣移入左侧胸腔;2.     

血小板型12-脂加氧酶与肿瘤

花生四烯酸通过脂加氧酶(lipoxygenase,LOX)途径代谢产生多种生物活性脂类,这些脂类在炎症、血栓形成和肿瘤演进过程中发挥着重要的作用。LOX按照组织分布被分为5- 、8- 、12 -、15- LOX4 个家族,血小板型12 LOX是LOX的一种,催化花生四烯酸转化为廿碳四烯酸。血小板型12 -LOX在正常组织中主要分布在血小板、人皮肤表皮细胞细胞质和微粒体中。近来研究发现,在多种肿瘤组织和肿瘤细胞系中不仅可检测到血小板型12- LOX的表达,且随着肿瘤级别的增高,瘤细胞表达增强。血小板型12 -LOX催化的代谢产物,如12(S) 羟廿碳四烯酸,已被证明涉及肿瘤细胞凋亡、肿瘤血管形成,因此血小板型12 LOX也成为肿瘤治疗的潜在目标。多项研究表明,血小板型12 -LOX的抑制剂能有效抑制肿瘤,如去甲二氢愈创木酸能有效抑制胶质瘤。对血小板型12- LOX与肿瘤细胞增殖、凋亡和血管生成之间的关系以及其机制进行讨论,另外,对血小板型12- LOX抑制剂预防和治疗肿瘤予以综述。     

洁净手术室内干置无菌持物钳保存时间的研究

目的探讨洁净手术室内干置无菌持物钳的保存时间。方法选择我院在百级、万级和三十万级洁净手术室内使用的干置无菌持物钳为研究对象,按照有无连台手术将其分为试验组与对照组,同一级别手术室内试验组与对照组各收集80把干置无菌持物钳,分别在4 h、6 h、8 h、10 h、12 h 5个时间点采样,并进行细菌学检测,比较干置无菌持物钳的合格率。结果洁净手术室内不同使用频率的干置无菌持物钳的合格率不同,百级、万级、三十万级洁净手术室内分别使用12 h、8 h、6 h的干置无菌持物钳,试验组与对照组比较,差异均无统计学意义(P(0.05)。结论只有一台较长手术比有连台手术的手术室内使用的干置无菌持物钳可以保存更长的时间,同时在百级、万级、三十万级洁净手术室内使用的干置无菌持物钳分别最多保存12 h、8 h、6 h。     

猪肉的食疗价值与养生药膳

2007年是我国农历丁亥猪年。猪肉及其内脏不仅是餐桌上营养丰富的美味佳肴,而且戡经膳养生价值也很高。据古医书《内经》记载:“猪的全身都可入药”。《本草纲目》则