HIF-1α和EGFP双基因共表达重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的 构建pAdeno-EGFP-HIF-1α 重组腺病毒载体,探讨其在脊髓损伤中的作用。 方法 采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR） 法扩增目的基因HIF-1α 并亚克隆到含有报告基因EGFP 的pShuttle-CMV-EGFP 穿梭载体中,得到pShuttle-EGFP-HIF-1α 重组穿梭质粒。将已构建的重组穿梭质粒转移至pAdeno 骨架载体上,获得pAdeno-EGFP-HIF-1α 重组腺病毒质粒,继而在H293 细胞中扩增,纯化后进行PCR 鉴定并测定病毒滴度。 结果 pShuttle-EGFPHIF-1 α 经KpnI/BamHI 双酶切后琼脂糖凝胶电泳可见阳性克隆组在2.5 kb 和5.1 kb 处出现两条带,而阴性克隆组只有5.1 kb 处一条带,证明pShuttle-EGFP-HIF-1α 重组穿梭质粒构建成功;pShuttle-EGFP-HIF-1α 重组穿梭质粒与pAdeno 载体重组后,经XhoI 单酶切后琼脂糖凝胶电泳可见阳性克隆组出现14.5 kb,11.7 kb,2.66 kb,2.6 kb,2.48 kb,2.47 kb,1.45 kb,0.6 kb 八条带,而阴性克隆的腺病毒空载组有14 kb,11.8 kb,4.0 kb,2.47 kb,1.45 kb,0.6 kb 六条带,证明重组pAdeno-EGFP-HIF1α 腺病毒质粒构建成功;pAdeno-EGFP-HIF-1α 重组腺病毒成功包装纯化后经PCR 鉴定,实验组和阳性对照组中均扩增到2.5 kb 片段,证明目的病毒中成功整合了HIF-1α 基因;TCID50 法测定纯化后的病毒滴度为2×10 10 PUF/ml 。 结论 成功构建了HIF-1α 和EGFP 双基因共表达重组腺病毒载体,为进一步研究其在脊髓损伤中的作用奠定了基础。     

烤瓷冠修复后牙残根残冠疗效观察

目的探讨后牙残根残冠的保存和修复。方法患牙经常规根管治疗后,应用铸造核桩冠,金属烤瓷冠恢复外形。结果96颗患牙经铸造核桩冠,金属烤瓷冠修复后外形美戏,无自觉不适．咀嚼功能良好。临床检查：无松动,无叩痛,牙龈无红肿。经2～5年观察,成功率为96．88％。结论后牙残根残冠经根管治疗后用铸造核桩冠,金属烤瓷冠修复是保存牙体,恢复牙外形．完善正常咀嚼功能的一种好方法。     

经皮激光椎间盘减压术治疗颈性眩晕

目的探讨经皮激光椎间盘减压术（PLDD）治疗颈性眩晕的机制和适应证。方法对58例颈性眩晕患者88个突出间盘行PLDD。结果随访6个月-2年,术后眩晕立即消除48例（82.8%）,明显改善5例（8.6%）,无效5例（8.6%）,无神经损害、感染等并发症发生。结论PLDD使椎间盘内压骤然降低,局部直接热疗可消除椎动脉痉挛,同时减少椎间盘内的炎性因子和化学介质的含量,对治疗颈性眩晕有明显疗效。     

神经根型颈椎病伴有周围神经卡压的诊断和治疗

目的：研究29例双卡综合征的诊断和治疗。方法：从1997年以来同时诊断为神经根型颈椎病与周围神经卡压的病例中选出29例患者，诊断标准为：(1)影像学上存在神经根在椎管内受压的证据；(2)有临床和(或)电生理的证据表明存在周围神经受到卡压；(3)周围神经的Tine1征阳性。对其中5例行保守治疗，24例行手术治疗，即神经松解术。平均随访12个月，根据术后症状、体征改善的程度分优、良、可和无效4级。结果：25例治疗后疗效优良，占86％。结论：神经根型颈椎病伴有周围神经卡压的双卡综合征并不罕见，正确认识双卡综合征，对诜择正确的治疗方案和估计愈后有重要意义．一旦确诊．应采取手术或非手术相结合的方法，可以达到满意的效果。     

新型纳米支架与神经干细胞的凋亡

背景:胶原作为脊髓组织工程的良好支架有利于神经细胞及神经纤维的黏附和生长,但机械性能较差,需要在制备时提高其基本性能,还应对种子细胞的生物学行为产生积极影响。目的:分析胶原纳米组织工程支架的性能,检测其对神经干细胞凋亡行为及相关基因表达的影响。方法:采用电纺丝技术制备纤维定向排列及非定向排列的胶原纳米纤维膜,并对其进行表征。将新生SD大鼠脊髓源性神经干细胞分别与纤维定向排列及非定向排列的胶原纳米纤维膜共培养,并设置单独神经干细胞培养为对照,检测细胞凋亡情况及相关基因表达变化。结果与结论:定向及非定向胶原纳米纤维膜的直径及形貌均达到纳米组织工程支架标准,溶胀系数较高,孔隙率较高,力学性能佳。与对照组比较,两胶原纳米纤维膜组神经干细胞凋亡率明显降低(P<0.05),细胞凋亡相关基因中bcl-2基因表达量明显增加,bax及Caspase-3基因表达明显下降;两胶原纳米纤维膜组神经干细胞凋亡率差异无显著性意义。表明新型胶原纳米组织工程支架性能良好,能够抑制细胞凋亡,从基因表达水平调节神经干细胞的凋亡行为。     

新型脊髓纳米组织工程支架的组织相容性***☆

背景:纳米技术可改善脊髓组织工程生物材料的性能.目的:分析新型脊髓纳米组织工程支架的组织相容性.方法:以胶原为原料制备纤维定向排列及非定向排列的纳米纤维膜,培养及鉴定S D大鼠脊髓源性神经干细胞.将两种纳米纤维膜与SD乳鼠脊髓源性神经干细胞共培养,以正常培养的神经干细胞为对照,通过 MTT 实验检测纳米纤维膜的细胞相容性;以扫描电镜检测细胞在纳米纤维膜表面的黏附及增殖情况;将纳米纤维膜植入S D大鼠体内,通过组织学检查确定其降解情况及组织相容性;通过免疫组织化学实验确定神经干细胞在体内的存活及移动情况.结果与结论:两种纳米纤维膜表面的神经干细胞黏附及增殖情况良好,MT T实验结果表明纳米纤维膜的细胞相容性佳,电镜结果表明细胞在纳米纤维膜表面黏附良好,增殖情况佳;在体内纳米纤维膜降解情况良好,组织相容性佳;BrdU 标定的神经干细胞在 SD 大鼠体内存活并移动情况良好.结果表明新型纳米组织工程支架具有良好的细胞及组织相容性.     

老年性桡骨远端骨折手术与非手术治疗的疗效比较

目的 通过回顾性研究比较老年性桡骨远端不稳定骨折手术和非手术两种方法的治疗效果.方法 随访92例年龄大于65岁的桡骨远端不稳定骨折的患者,所有病例均先行手法复位石膏外固定,对于复位不满意的再行手术治疗,随访2周、6周、3月、6月、12月,比较影像学表现及功能恢复情况.结果 50例非手术治疗,42例手术治疗.在六个月时,...     

内侧撑开技术辅助跗骨窦切口治疗跟骨Sanders Ⅱ型、Ⅲ型骨折的临床疗效分析

目的 探讨内侧撑开技术辅助跗骨窦切口治疗跟骨SandersⅡ型、Ⅲ型骨折的临床疗效。方法 2018年1月至2021年4月南通大学附属南通第三医院骨科对20例新鲜跟骨骨折患者进行手术治疗,其中男13例,女7例;年龄23～70岁,平均(44.5±0.5)岁。骨折按Sanders分型标准进行分型,Ⅱ型9例,ⅢAB型10例,ⅢAC型1例。患者入院后即刻给予制动、冰敷、镇痛等对症治疗,完善检查后采用内侧撑开技术辅助跗骨窦切口进行复位内固定术。结果 所有患者均获随访,随访时间7～25个月,平均(11.9±0.8)个月。骨折愈合时间为3～6个月,平均(3.2±0.9)个月。末次随访时采用美国足踝学会踝与后足功能评分(American orthopedic foot and ankle society, AOFAS)评定疗效,优15例,良3例,可1例,差1例,优良率为90%。随访时间内无一例患者发生切口皮肤坏死、感染,无复位丢失,无腓肠神经受损,无腓骨肌腱炎等。结论 内侧撑开技术辅助跗骨窦切口治疗跟骨SandersⅡ型、Ⅲ型骨折,不仅能有效纠正内侧短缩、内翻畸形,恢复跟骨解剖形态,而且具有创伤小、固定...     

经皮射频治疗第三腰椎横突综合征

第三腰椎横突综合征是引起患者腰臀下肢痛的常见疾病之一。自 1996年 8月至今 ,我们应用射频热凝技术治疗该类疾患 2 49例 ,取得了显著的疗效 ,现报告如下。1　临床资料1.1　 一般资料　本组患者 2 49例 ,其中男 173例 ,女 76例 ;最大年龄 5 6岁 ,最小 17岁 ,平均 31.6岁 ;病程最长 10年 ,最短 1个月 ,平均 2 .2年。腰部两侧均有疼痛 2 15例 ,一侧疼痛 34例 ;单纯腰痛者 146例 ,腰臀痛者 10 3例。1.2 　 治疗方法　采用与航天部 70 1所共同研制的射频热凝仪 ,频率 30 0 KHz,输出功率≥ 12 w,定位方波 0～ 1V,测温范围0～ 99℃ ;射频针针尖…