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目的研究和建立从大量全血标本中提取基因组DNA的有效方法,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型。方法使用自动工作站(瑞士TECAN公司)从600μl全血中提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖凝胶电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A,B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度。结果从600μl全血中提取基因组DNA,含量平均为10.052±0.824μg,样本的A260nm/A280nm值平均为1.821±0.201。琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb,HLA-A,B和DRB1位点PCR产物杂交后的平均荧光信号强度分别为2 183.84±478.12(exon2),2 168.28±338.59(exon3);2 057.27±397.41(exon2),1959.78±283.24(exon3);3 643.38±327.85。结论此方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验。 相似文献
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高鹏 焦力群 赵振伟 于嘉 蔡艺灵 崔永强 王贵平 李天晓 贺迎坤 吴伟 尹森 史怀璋 郑秉杰 何伟文 姜顺婷 尹龙 魏铭 黄胜平 白小欣 王大明 刘加春 祁鹏 凌锋 《中国脑血管病杂志》2014,(6):329-336
<正>1研究背景:颅内动脉狭窄治疗现状大约10%~15%的缺血性卒中是由颅内动脉粥样硬化性狭窄(intracranial atherosclerotic stenosis,ICAS)导致的。据不同文献报道,ICAS患者年卒中发生率为3%~15%,每年卒中再次发作的风险高达15%~17%。1955年,学者们开始采用华法林抗凝治疗ICAS。此后的多项回顾性研究表明华法林的效果要优于阿司匹林。直到2005年,WASID(The 相似文献
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目的研究和建立从大量全血样本中提取基因组DNA的有效方法,以应用于Luminex HLA流式磁珠基因分型。方法使用自动工作站(瑞士TECAN公司)提取基因组DNA,提取的DNA样本用紫外分光光度仪测定其浓度和纯度,DNA的完整性用琼脂糖电泳检测,并统计分析每一DNA样本流式磁珠HLA-A、B和DRB1基因扩增产物经探针分子杂交后的荧光信号强度。结果从60μl全血中提取基因组DNA,产量平均为(1.584±0.824)μg,样本的A260/A280值平均为1.741±0.229。琼脂糖电泳法测得DNA的分子量约为21kb。结论本方法适用于从大量全血样本中快速提取基因组DNA,所得基因组DNA适用于高通量HLA流式磁珠基因分型等下游的分子生物学实验。 相似文献
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老年症状性颈动脉狭窄患者的临床干预研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的探讨老年症状性颈动脉狭窄患者的支架成形术和(或)内科治疗的安全性和短期疗效。方法选择我院经数字减影血管造影术(DSA)证实有颈动脉狭窄且有相关临床症状的老年患者85例,均给予内科治疗,其中58例行颈动脉支架成形术,分析其临床、影像学、治疗和随访观察资料。结果68例患者临床症状改善或消失;住院及随访期间6例(7.1%)发生脑卒中,无脑卒中相关死亡。本组中58例患者共置入支架67个,支架成形术成功率为100%,动脉狭窄率由术前(86.8±9.3)%降至(10.9±2.5)%(t=21.1,P=0.000);术后30天内2例发生支架相关脑卒中;58例支架成形术患者平均随访28.3个月,50例(86.2%)症状改善或消失,2例发生同侧颈内动脉供血区域脑卒中;36例复查颈部血管超声,2例显示支架内再狭窄;10例复查DSA均未发现支架内再狭窄。结论老年症状性颈动脉狭窄患者的综合临床干预短期疗效良好;狭窄的支架成形术方法可行,相对安全。 相似文献
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