血管形成抑制剂Canstatin在鼻咽癌中表达鉴定及基因克隆

目的 检测Canstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列.方法 利用半定量RT-PCR方法检测Canstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异.设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从相对正常鼻咽组织中获取Can-statin蛋白编码序列,T/A克隆入Pmd18载体中.利用PCR和酶切鉴定获得阳性重组子.重组子最后经测序证实.结果 与相对正常鼻咽组织相比,Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失.RT-PCR法成功获得Canstatin基因编码区全长Cdna序列.重组克隆质粒插入片段经DNA测序后与Gen-Bank中Canstatin基因相应序列比较,100%同源.结论 Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失.采用T/A技术成功克隆鼻咽组织中Canstatin基因,为Canstatin亚克隆入真核表达载体Pegfp-N1,探索其在鼻咽癌生长和转移中的作用奠定了基础.     

非霍奇金淋巴瘤中Cyclin D1和p34~(cdc2)蛋白的检测

为了研究非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬｓ）中细胞周期调节因子ＣｙｃｌｉｎＤ１ 和ｐ３４ｃｄｃ２ 蛋白表达与肿瘤分化程度和免疫分型的关系,对４０ 例ＮＨＬｓ 进行ＣｙｃｌｉｎＤ１ 和ｐ３４ｃｄｃ２ 蛋白免疫组化（ＳＰ法）染色。在４０ 例ＮＨＬｓ 中,有１９ 例（４７．５ ％）ＣｙｃｌｉｎＤ１ 阳性表达,２３ 例（５７．５ ％）ｐ３４ｃｄｃ２ 阳性表达。１０ 例淋巴结良性病变中６ 例生发中心细胞ＣｙｃｌｉｎＤ１ 和ｐ３４ｃｄｃ２ 弱阳性表达。低分化ＮＨＬｓ 的ＣｙｃｌｉｎＤ１ 和ｐ３４ｃｄｃ２ 阳性率明显高于高分化ＮＨＬｓ（Ｐ＜ ０．０５）,而同免疫分型无关（ Ｐ＞０ ．０５） 。２ 个细胞周期调节因子的表达具有高度一致性（Ｐ＜０ ．０５）。提示２ 个细胞周期调节因子参与ＮＨＬｓ 的发生发展过程,其阳性表达率及表达强度同ＮＨＬｓ 恶性程度有密切关系,而同免疫分型无明显联系。ＣｙｃｌｉｎＤ１ 和ｐ３４ｃｄｃ２ 蛋白在部分ＮＨＬｓ 中共同起作用,使Ｇ１ →Ｓ期和Ｇ２ →Ｍ 期２ 个细胞检查点控制减弱。     

非霍奇金淋巴瘤CyclinD1和p34^cdc2蛋白的检测

为了研究非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬｓ）中细胞周期调节因子ＣｙｃｌｉｎＤ１和ｐ３４＾ｃｄｃ２蛋白表达与肿瘤分化程度和免疫分型的关系,对４０例ＮＨＬｓ进行ＣｙｃｌｉｎＤ１和ｐ３４＾ｃｄｃ２蛋白免疫组化（ＳＰ法）染色。在４０例ＮＨＬｓ中,有１９例（４７．５％）ＣｙｃｌｉｎＤ１阳性表达２３例（５７．５％（ｐ３４＾ｃｄｃ２阳性表达。１０例淋巴结良性病变中６例生发中心细胞ＣｙｃｌｉｎＤ１和ｐ３４＾ｃｄｃ２弱 是必     

淋巴结外T细胞性淋巴瘤EB病毒感染和CD56表达关系的研究

目的：研究淋巴结外 Ｔ 细胞性淋巴瘤（ Ｔ－ ｃｅｌｌ Ｌｙｍ ｐｈｏｍ ａ, Ｔ Ｃ Ｌ）中 Ｅｐｓｔｅｉｎ－ Ｂａｒｒ 病毒（ Ｅ Ｂ病毒）感染情况及其同 Ｃ Ｄ５６ 表达关系。方法：对１５ 例淋巴结反应性增生和３３ 例淋巴结外 Ｔ 细胞性淋巴瘤应用原位杂交法检测 Ｅ Ｂ Ｅ Ｒｓ 和免疫组织化学法检测表面抗原 Ｃ Ｄ５６ 的表达。结果：淋巴结外 Ｔ细胞性淋巴瘤中 Ｅ Ｂ Ｅ Ｒｓ和 Ｃ Ｄ５６ 表达率分别为 ６３．６％ （２１／３３）和２４．２％ （８／３３）,淋巴结反应性增生中 Ｅ Ｂ Ｅ Ｒｓ 和 Ｃ Ｄ５６ 阳性表达率分别为 ０％ （０／１５）和２６．７％ （４／１５）。 Ｅ Ｂ Ｅ Ｒｓ 和 Ｃ Ｄ５６ 表达无相关性（ Ｐ＞ ０．０５）。结论：表明 Ｅ Ｂ病毒高度感染淋巴结外 Ｔ细胞性淋巴瘤,可能是其发生的一个重要因素,但 Ｅ Ｂ病毒感染同 Ｃ Ｄ５６ 表达无关。     

孕激素治疗增生子宫内膜和高分化子宫内膜样癌后的临床病理形态观察

目的：显微镜下观察孕激素治疗对不同增生子宫内膜和高分化子宫内膜样腺癌的组织病理学影响,为临床更好地管理孕激素治疗提供依据。方法：收集2010年至2014年86例增生不伴有非典型增生(包括简单型增生、复杂型增生)和非典型增生及高分化子宫内膜样癌患者在我院经孕激素正规治疗刮宫至少两次以上病例,其中刮宫次数最多者达11次,时间2个月到5年。两个高年资病理医师双盲法显微镜下观察激素治疗前后病理改变。结果：简单型增生50名,基本转归为正常子宫内膜;复杂型增生18名,治疗约半年后转为正常子宫内膜;但其中2例有复发或恶化。非典型增生不伴/伴癌变18例,孕激素治疗后刮宫,10例镜下显示好转或完全缓解。好转病例显示组织结构依然复杂,但腺体间质比例降低,间质蜕膜样变或者玻璃样变;高倍镜下腺上皮细胞核变温和,核膜光滑,核仁不明显,核浆比例降低,胞浆丰富,伴嗜酸性变、鳞状细胞化生或粘液化生。该类病例继续治疗后,转化为正常周期宫内膜。但有4例(22.2%)在1~2年后复查,又出现非典型增生,甚至癌变。另有2个病例,治疗3个月后刮宫,镜下依然为非典型增生改变,证明孕激素治疗无效。结论：1)简单型增生过孕激素治疗效果好,3~6个月后刮宫,基本恢复正常周期。2)对非典型增生及癌变患者,因容易复发和恶化,按2014NCCN诊疗规范治疗坚持用药并定期复查非常有必要。3)非典型增生伴/不伴癌变病例,细胞学好转先于组织学。4)对治疗无效者,需要根据患者生育要求及时手术治疗。5)根据孕激素治疗效果评价,增生不伴非典型增生患者,区分简单型和复杂型增生依然有必要性。     

环氧化酶-2在膀胱移行细胞癌中的表达

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）在膀胱移行癌（TCC）中的表达与TCC的病理分级和临床分期的关系。方法用免疫组织化学SP法检测76例TCC组织和11例正常膀胱组织的COX-2的表达。结果11例正常膀胱组织无COX-2的表达，而76例TCC组织的COX-2表达的阳性率为90％，COX-2的表达均位于细胞浆，TCC组织的COX-2表达的阳性率高于正常膀胱组织（P〈0．05）。COX-2的表达与TCC病理分级无关（P〉0．05）。浸润型（T2-4）TCC较浅表型（Ta-1）TCC有更强的COX-2的表达（P〈0．05）。癌旁组织COX-2的表达较肿瘤本身低（P〈0．05）。结论COX-2在膀胱癌中的异常表达可能与膀胱癌的发生发展有关。     

肝内胆管癌中丙型肝炎病毒感染及其与bcl—2基因异常的关系

目的 探讨肝内胆管癌中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染与ｂｃｌ－２基因异常的关系。方法采用半嵌套式原位聚合酶链反应和免疫组织化学方法对２９例原发性肝内胆管癌中ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因、ｂｃｌ－２蛋白及ＨＣＶ抗原（ＮＳ５抗原）进行原位观察。结果 ２９例胆管癌中ｂｃｌ－２／ＪＨ融合基因均阴性,２０例ｂｃｌ－２蛋白阳性,阳性率为６９．０％。ｂｃｌ－２蛋白表达与ｂｃｌ－２基因重排无相互对应关系。癌组织中ＮＳ５阳     

非小细胞肺癌中整合素亚基β5的表达意义及其与VEGF的关系

目的:研究非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)中整合素亚基β5表达的生物学意义及其与血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)的关系。方法:应用免疫组化法检测102例NSCLC中整合素β5和VEGF的表达水平;78例正常肺组织作为对照组。并将整合素β5与VEGF及肿瘤的各种临床病理特征进行统计学分析。结果:102例NSCLC中,83例(81.37%)整合素β5阳性表达,显著高于正常肺组织37.17%的阳性表达率(P<0.05);85例(83.33%)NSCLC中VEGF阳性表达,其中有80例VEGF与整合素β5共同表达,在统计学上具有显著的正相关(P<0.01);整合素β5的表达与肿瘤的大小、淋巴结是否转移呈有相关性,而同患者的性别、年龄、肿瘤的组织学分类、分级无关。结论:整合素β5的表达促进肿瘤血管的形成,为肿瘤的浸润、转移创造条件,临床上可利用整合素β5作为治疗靶点抗血管生成,从而为肿瘤治疗提供新途径。     

自体颅骨超低温下保存再植的临床应用

目的进一步证实超低温下保存的自体颅骨为颅脑外伤患者去骨瓣减压术后理想的颅骨修复材料。方法186例颅脑损伤患者行支骨瓣减压术,骨瓣于术后立即保存于超低温冰箱,术后1~6个月行颅骨修复时行再植手术。结果组织学切片发现所有保存颅骨都保持存活,颅骨形态结构无明显变化,通过颅骨X光照片示再植后颅骨绝大多数呈骨性愈合。结论一定时间内颅骨在超低温下能有效保持存活,再植后大多数能形成骨性愈合。超低温下保存的自体颅骨是颅脑外伤减压术后最理想的颅骨修复材料。     

miR-490-5p和miR-363作为结直肠癌诊断标记的研究

目的筛查可作为结直肠癌诊断标记的微小RNA（miRNA）。方法采用实时荧光定量PCR分析miRNA在结直肠癌患者肿瘤和瘤旁组织之间的表达谱．运用非配对t检验的方法,筛查出表达水平具有统计学差异的miRNA。并通过受试者特征曲线（ROC）分析miR-363和miR-490．5p作为诊断标记筛查结直肠癌患者的特异性和敏感性。结果在男性和女性样本中分别发现73和42个表达具有显著性差异的miRNA。而33个miRNA同时在男、女样本中都具有显著性的异常表达,其中10个miRNA的异常表达水平超过5倍,这10个miRNA在男女混合样本中同样具有显著性的异常表达。结论男、女结直肠癌患者中的部分miRNA的表达水平具有显著差异：miR-363和miR-490-5p具有作为结直肠癌的临床筛查指标的潜能。