脱细胞软骨基质三维支架的制备及特性研究

[目的]探索脱细胞软骨基质三维多孔支架的制备及其应用于关节软骨组织工程的可行性。[方法]新鲜牛膝关节软骨粉碎后,梯度离心法获取软骨微粒,采用改进的Courtman改良法处理细胞后,再冷冻干燥,制备脱细胞软骨基质三维多孔支架。然后,采用京尼平对三维支架进行交联,再次冷冻干燥后,对支架材料进行大体、组织学染色及扫描电镜观察,分别测定支架的孔隙率、溶胀率、降解率。最后,分离培养兔骨髓基质细胞(BMSCs),采用MTT法检测BMSCs在支架材料上的生长、增殖情况,以柱形图表示。[结果]大体观察显示支架呈疏松多孔状,京尼平交联后整体呈深蓝色。组织学观察显示支架材料无软骨细胞碎片残留,HE染色、甲苯胺兰染色观察均未见软骨细胞残留。测量示支架孔隙率为90%,溶胀率为(1314±337)%,降解率2周为(13.69±7.3)%,4周为(25.99±8.9)%。MTT法显示细胞在支架上生长良好,与对照组DMEM培养液吸光度值比较,差异无统计学意义(P0.05),提示支架无细胞毒性。扫描电镜显示支架内孔洞较明显,BMSCs通过细胞突起黏附于支架表面,黏附良好,能较好地在其上生长。[结论]经改进的Courtman改良法处理的软骨基质三维多孔支架脱细胞更彻底,保留了软骨的天然细胞外基质成分,天然交联剂京尼平交联后支架的细胞相容性好,抗降解性得到了提高,是一种适用于软骨组织工程的良好载体。     

不同硅酸镁锂浓度水凝胶支架的制备及促成骨性能的比较研究

目的制备不同硅酸镁锂浓度的水凝胶支架, 并比较不同浓度硅酸镁锂的促成骨性能。方法在明胶/海藻酸钠水凝胶中按质量百分比为0%、1%、2%、3%加入硅酸镁锂, 分别为T0、T1、T2、T3组, 测定各组的压缩模量和24 h浸提液的离子含量。体外实验使用各组浸提液培养基及普通培养基(空白组)(n=3)培养骨髓间充质干细胞(BMSCs), 测定培养7 d后成骨基因Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原的表达。体内实验将支架植入大鼠股骨髁缺损处, 并设置不植入支架的空白组(n=3), 应用苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色观察各组的成骨修复情况。结果 T2组的压缩模量为(139.05±6.43)kPa, 显著高于T0、T1、T3组[(68.83±3.76)、(101.18±3.68)、(125.40±3.28)kPa], 差异均有统计学意义(P<0.05)。T2组24 h浸提液的锂、镁、硅离子含量分别为(0.031±0.005)、(3.047±0.551)、(5.243±0.785)μg/mL, 与T3组比较差异无统计学意义(P>0.05);但均...     

3DBody软件辅助PBL在骨科临床教学中的应用

目的　探讨3DBody软件在骨科PBL教学中的应用效果。方法　选择2013级中国人民解放军空军军医大学临床医学专业本科学员,按照解剖学成绩进行排序并编号分为实验组（20人）和对照组（20人）,实验组采用3DBody软件辅助PBL教学,课前设计布置相关问题及3DBody软件的使用方法给学生,课时进行讨论得出结论;对照组采用传统教学方式,通过教材、多媒体课件方式进行讲授式教学。比较两组学生的骨科理论考试成绩、见习考试成绩。应用问卷调查评估各组学员对不同教学方法的主观感受。采用SPSS 16.0进行t检验。结果　实验组学员骨科理论考试成绩[（84.6±5.9）分],明显高于对照组的理论考试成绩[（73.2±6.1）分],并且实验组学员的见习考试成绩[（17.7±2.1）分]也明显高于对照组的见习考试成绩[（12.7±1.9）分];实验组学员对骨科教学的满意度评分[（9.2±0.8）分]明显高于对照组评分[（7.2±1.3）分];差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论　3DBody教学软件辅助PBL教学可以明显提高骨科临床教学的效果,提高学员的学习积极性和兴趣,值得推广应用。     

骨库死亡供体的体格检查

中国真正意义上的骨库产生于上世纪80年代末[1-2],效法欧美经验,结合国情,经过20多年的发展,中国的骨组织库已逐步走上规模化、规范化发展的道路,呈现产业化骨库和医院内骨库两种模式,其经营和运作逐渐被纳入国家食品药品监督管理局和国家卫生部的监管范畴,行业成立了骨组织库协会,学术交流与技术培训活动逐渐活跃[3].     

交联温度对京尼平交联胶原／壳聚糖组织工程支架的影响

[目的]通过研究材料的孔径、交联度、溶胀率、降解率、细胞毒性及组织相容性的变化,探讨交联温度对京尼平交联胶原/壳聚糖支架的影响.[方法]采用冷冻干燥法制备胶原/壳聚糖复合多孔支架,分别于4℃、20℃、36℃条件下,在0.5%京尼平水溶液中交联24 h.以未交联的胶原/壳聚糖复合多孔支架作为对照,评价所得支架的孔径、交联度、溶胀率、降解率、细胞毒性及组织相容性特点.[结果]随交联温度升高,支架的交联度明显增大,溶胀率和降解率逐渐减小.4℃组支架交联度47.88%土6.4%,溶胀率为721%±46%,4周后降解3.95%±6.4%;20℃组支架交联度67.69%±3.6%,溶胀率为662%±72%,4周降解0.91%±5.9%;36℃组支架交联度70.32%±5.7%,溶胀率为635%±27%,4周降解0.66%±7.3%,三组上述观察指标均优于未交联组(P/0.01).[结论]京尼平交联可以显著降低胶原/壳聚糖支架的降解率和溶胀率,且对支架结构和生物相容性无明显影响.交联温度增加可以提高支架的交联度和抗降解能力,较快获得具有良好生物相容性和降解率的组织工程支架.     

解剖型跟骨钛板并植骨治疗跟骨关节内骨折的临床疗效

目的：探讨解剖型跟骨钛板并植骨治疗跟骨关节内骨折的临床疗效。方法选择2009年3月～2012年5月期间收治的25例（33足）SanderslⅡ～Ⅳ型跟骨关节内骨折患者,男性20例（26足）,女性5例（7足）;年龄15～65岁,平均（36.16±14.63）岁。单足17例,双足8例,采用切开复位解剖型跟骨钛板内固定并植骨进行治疗,术中恢复跟骨解剖形态,按Maryland足部评分系统进行术后功能评分,评价手术效果,进行系统的回顾性总结分析。结果本组25例（33足）术后均获12～36个月随访（平均19.3个月）,按Maryland足部评分标准：优17足、良12足、可4足,差0足;优良率为87.88％。结论解剖型跟骨钛板并植骨治疗跟骨关节内骨折能够恢复跟骨距下关节面平整,有利于患者早期功能锻炼,疗效可靠。     

多孔磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶性状及对成骨细胞生物学行为的影响CSCD

背景:在多孔材料磷酸钙骨水泥粉末中复合纤维蛋白胶是否能有效改善磷酸钙骨水泥的生物力学性能,同时加速其在体内的降解代谢,促进体内骨再生,目前还未被证实。目的:构建不同配比的多孔磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料,探索其诱导成骨的生物学特性。方法:将磷酸钙骨水泥与纤维蛋白胶分别以1∶1、3∶1、5∶1(mL/g)的配比复合,以单纯的磷酸钙骨水泥为对照,检测各组材料的初凝和终凝时间、压缩强度与弹性模量,扫描电镜观察材料表面结构。将第3代成骨细胞分别接种于4组材料表面,以单纯培养细胞为空白对照,观察不同时间点细胞黏附、增殖及碱性磷酸酶活性。结果与结论:1∶1、3∶1复合材料组初凝时间和终凝时间长于对照组(P<0.05),5∶1组复合材料组初凝时间和终凝时间短于对照组(P<0.05)。磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料表面较单纯的磷酸钙骨水泥致密而光滑,孔径随着纤维蛋白胶浓度的增加而降低。3∶1、5∶1复合材料组压缩强度高于对照组(P<0.05),1∶1、3∶1、5∶1复合材料组弹性模量高于对照组(P<0.05)。4组材料上的细胞黏附、增殖及碱性磷酸酶活性差异无显著性意义,但均高于空白对照组(P<0.05)。表明纤维蛋白胶的加入克服了磷酸钙骨水泥脆性较高的缺点,同时也保留了其促进成骨的作用。     

抗感染组织工程化骨的生物特性

目的探索抗感染组织工程化骨一期修复感染性骨折、骨缺损的新途径。方法昆明小鼠84只,雄性,体重24～27g。其中30只于右侧股部肌袋植入利福平组织工程化骨做药物释放特性观察。54只以随机数字法分为A,B,C3组,每组18只。将植骨材料植入小鼠右侧股部肌袋中。A组植入利福平组织工程化骨,B组植入单纯组织工程化骨,C组植入牛松质骨,做成骨活性观察。结果①此种材料21d内骨粒周围软组织的利福平浓度(1.8mg/L)高于金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(0.008～0.06mg/L),而小鼠血药浓度很低。②此种材料的成骨活性与单纯组织工程化骨无明显差别(P>0.05),均较单纯牛松质骨载体的成骨活性好(P<0.01)。碱性磷酸酶(μmol/s·kg)测定显示:7dA组43±12,B组48±10,C组22±5,F=7.56,P<0.01;14dA组65.3±3.2,B组63.0±2.8,C组18.2±2.7,F=34.86,P<0.01;28dA组122±20,B组133±12,C组27±7,F=53.86,P<0.01。结论一定剂量的利福平组织工程化骨有较好的成骨活性和极好的抗感染能力,且能保持很低的血药浓度。     

海军陆战部队军事训练皮肤病调查分析

目的：了解海军陆战部队官兵在不同季节、不同环境条件下军事训练时皮肤病患病情况。方法：采用统一调查表对海军陆战部队某部官兵，分别在春季、夏季和野外军事训练时，进行3次皮肤病流行病学调查。结果：3次调查共检出皮肤病53种，其中常见皮肤病21种；3次皮肤病发生率分别为26．2％、31．5％和43．1%。3次发生率比较，差异非常显著（P〈0．01）；其中心身性皮肤病和外因性皮肤病比较，差异均非常显著（P〈0．01）；感染性皮肤病比较，差异显著（P〈0．05）；先天性及其他皮肤病差异不显著（P〉0．05）。结论：海军陆战部队皮肤病患病情况与气候、环境、训练项目和强度有关。应采取提高医务人员诊治水平、普及皮肤病防治常识、改进作训穿着装备和研制适宜药物等预防措施，降低皮肤病发生率。