诱导型一氧化氮合成酶在OxyHb诱导的血管痉挛细胞模型中的表达

我们应用氧合血红蛋白(OxyHb)孵育平滑肌细胞,构建脑血管痉挛细胞模型,通过免疫细胞化学和比色法检测细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达及上清液一氧化氮(NO)含量,探讨其在脑血管痉挛过程中的作用.     

与缺氧诱导因子-1 α调控相关的缝隙连接 43蛋白磷酸化参与脑缺血再灌注损伤的机制

目的观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)所致的缝隙连接43蛋白(connexin43,Cx43)磷酸化对脑缺血再灌注(cerebral ischemia and reperfusion,I/R)损伤的相关机制。方法选取成年SD雄性大鼠100只,随机分为4部分5组,每组20只:(1)假手术组,仅暴露双侧颈总动脉而不予夹闭;(2)治疗组,I/R后立即腹腔注入HIF-1α特异抑制剂2甲氧基本雌二醇(2ME2) 15 mg/kg,实验时间设定为I/R后4 h及8 h;(3)溶媒组,以溶媒二甲基亚枫(DMSO)替代2ME2;(4) I/R损伤组,I/R形成后不给予处理,(3)和(4)实验时间均设定为I/R后8 h。每组取10只动物行脑组织含水量测定;另10只动物在预定时间取海马区域皮质标本,采用免疫印迹法(Western blot,WB)检测磷酸化Cx43(p-Cx43)、Bcl-2、Bax、Caspases-3的表达水平,并用酶联免疫法(ELISA)检测海马皮质组织中炎性因子的含量,用干蒸法测定脑水肿的程度。结果采用2ME2干预的治疗组大鼠各时间段的脑含水量及海马皮质组织的p-Cx43、炎性因子、Cx40、凋亡促进因子Bax、Caspases-3表达水平均明显降低(均P 0. 05),凋亡抑制因子Bcl-2表达水平明显升高(P 0. 05)。结论通过特异性抑制HIF-1α的形成,可降低神经细胞Cx43磷酸化的形成,明显降低炎性因子的分泌;并可对脑I/R所致的损伤产生缓解作用;对脑缺血疾病在超急性期的治疗有着重大的意义。     

神经内镜治疗颅脑疾病68例报告

目的分析神经内镜治疗颅脑疾病的应用范围,手术适应症及治疗效果。方法我科于2006年6月～2009年10月共完成神经内镜手术68例。其中非交通性脑积水行三脑室造瘘（ETV）14例,蛛网膜囊肿行囊肿切除或开窗术15例,单鼻孔入路垂体瘤切除术5例（包括神经导航神经内镜技术2例）,辅助颈内动脉动脉瘤夹闭术22例,辅助肿瘤切除术12例。结果随访59例。平均随访时间1．8年。三脑室造瘘术有效率100％,蛛网膜囊肿无复发病例,肿瘤全切8例（66．7％）,大部切除4例（33.3％）．完全夹闭动脉瘤25个。术后发热7例（10．2％）,无死亡病例。结论神经内镜行三脑室造瘘治疗非交通性脑积水效果肯定．优势明显．应做为首选治疗方法。对特定位置的蛛网膜囊肿行囊肿切除或开窗术是无可替代的治疗措施。     

岩斜脑膜瘤经岩骨乙状窦前入路的显微外科手术治疗（附25例报道）

目的探讨经岩骨乙状窦前入路显微外科手术治疗岩斜脑膜瘤的手术效果及术后并发症。方法回顾性分析自2005年1月．2009年5月，经岩骨乙状窦前入路显微外科手术治疗的25例岩斜脑膜瘤患者的临床症状（头痛13例．面部麻木和／或面部疼痛12例，耳鸣和／或听力减退9例，饮水呛咳5例，肢体无力4例，复视3例，行走不稳3例，口角歪斜3例．癫痫2例）、手术效果及术后并发症。结果肿瘤全切除14例，次全切除7例，部分切除3例，死亡1例。术后症状和体征缓解6例．不变4例，颅神经受损或症状加重者14例，消化道出血6例，肺部感染4例，意识障碍1例，皮下积液1例（2周后自愈），1例老年患者2周后死于因后组颅神经麻痹引起的肺炎。结论经岩骨乙状窦前入路可全切除岩斜区脑膜瘤。扎实的解剖学基础、充分的手术暴露．娴熟的手术技术等．有利于提高肿瘤切除程度和减轻术后并发症。     

siRNA沉默平滑肌细胞Cx43的表达及对细胞增殖的影响

目的通过siRNA介导的RNA干扰技术沉默平滑肌细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达，观察其对平滑肌细胞增殖的影响。方法应用阳离子脂质体转染的方法，将化学合成的特异性378siRNA转染平滑肌细胞设为特异性siRNA组，并以转染非特异性siRNA和空白作为对照，半定量RT-PCR法分析转染不同时间（24、48、72、96h）细胞Cx43mRNA表达水平的变化；同时噻唑蓝（MTT）比色法检测平滑肌细胞增殖，观察转染不同浓度（50、100、150、200 nmol／L）378siRNA对细胞增殖的影响。结果半定量RT-PCR结果显示与非特异性siRNA组及空白对照组相比，转染特异性378siRNA后Cx43mRNA表达水平显著地下调并呈时间依赖性特点。MTT结果显示与空白对照组相比，转染低浓度（50nmol／L）378siRNA早期（24、48h）OD值开始降低，但差异无统计学意义（P〉0．05），随着特异性siRNA浓度的升高，0D值显著降低（P〈0．05）。200nmol／L378 siRNA转染72、96h对细胞的增殖抑制率分别为32．51％、42，67％（P〈0．01），并呈浓度依赖性特点；而作为阴性对照的siRNA转染后则无上述作用。结论转染特异性378siRNA可有效沉默平滑肌细胞缝隙连接Cx43mRNA的表达并抑制平滑肌细胞的增殖。     

RNA干扰抑制血管平滑肌细胞缝隙连接Cx43介导的细胞间通讯

RNA干扰技术的效应分子是小分子短链RNA（siRNA）。本实验拟通过转染Cx43特异性siRNA检测平滑肌细胞Cx43基因表达和细胞间通讯（GJIC）功能。探讨RNA干扰技术在血管平滑肌细胞缝隙连接功能研究中的应用。