低功率毫米波辐射对K562细胞增殖的影响

目的 探讨低功率毫米波对K562细胞活力的影响。方法 应用细胞培养、活细胞计数、光镜、电镜及PCNA免疫组化染色及图像分析等方法,检测频率41.32GHz的毫米波辐射K562白血病细胞和未辐射毫米波K562白血病细胞活力的影响。 结果 与对照组比较,毫米波辐射45和60min组,K562细胞活力下降和PCNA阳性细胞减少,光镜观察各组未见明显差别,超微结构显示细胞形态呈增殖抑制改变。 结论 低功率毫米波辐射对K562细胞具有抑制增殖的作用。     

血管内皮生长因子受体KDR的靶向制剂的制备

目的：研究从噬菌体肽库中筛选到的与血管内皮生长因子受体Ⅱ(KDR)有特异结合活性的小肽，做为KDR靶向药物的先导物质的应用。方法：从噬菌体肽库中筛选能特异结合KDR的噬菌体克隆，挑选结合力最强的克隆测序并化学合成小肽P5，梯度ELISA、阻断实验和竞争结合实验测定小肽在体外与KDR的结合活性。将P5与生物素(NHS-d-Biotin)、BSA化学偶联，ELISA法和细胞免疫组化实验检测偶联物与KDR的结合活性。结果：化学合成的小肽P5在体外能特异结合KDR，Kd=168．6nmol／L，约是KDR与配体血管内皮生长因子(VEGF165)亲和力的1／30，P5能阻断VEGF165与KDR的结合活性，但不能竞争VEGF165与KDR的结合活性。将P5作为导向物质化学合成的P5-BSA-Biotin，在体外同样具有与KDR和细胞表面KDR分子结合的特性。结论：化学合成的小肽P5有望作为先导分子，在以KDR为靶点的肿瘤靶向治疗中得到应用。     

横纹肌肉瘤和梭形细胞肉瘤的超微结构研究

观察了经电镜和免疫组化证实的１３例横纹肌肉瘤。在电镜下可见４种肿瘤细胞：原始间叶细胞、低分化肌母细胞、中分化肌母细胞和高分化肌母细胞，另外，观察了２８例梭形细胞肉瘤的超微结构，提出了横纹肌肉瘤的超微结构诊断标准。     

锂-匹罗卡品颞叶癫模型的建立及苔藓纤维出芽的动态变化

目的研究锂-匹罗卡品颞叶癫模型大鼠致后性发作的行为学特点及海马结构病理改变的动态变化。方法将所有Wistar大鼠随机分为对照组和实验组,实验组大鼠腹腔依次注射氯化锂、匹罗卡品诱发癫持续状态（SE）后,观察其自发性癫发作（SRS）,分别于SE后1周至10周5个不同时间点取材,Nissl染色和Timm染色分别观察海马神经元损伤及苔藓纤维出芽（MFS）的变化。结果注射匹罗卡品后84%的大鼠可诱发出SE,经过10～20d的缄默期后,可观察到Ⅰ～Ⅲ级的反复SRS,病理学检查可见海马神经元的损伤及齿状回内分子层MFS。结论锂-匹罗卡品颞叶癫模型与人类颞叶癫有类似发作特点及病理改变,是一种理想的颞叶癫动物模型。     

安博维拮抗肝纤维化的实验研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体阻断剂安博维对四氯化碳(CCl4)诱导的实验性肝纤维化大鼠纤维化水平的影响。方法大鼠肝实质损伤性纤维化模型由CCl4诱导。36只雄性Wister大鼠被随机分为3组:对照组、模型组及治疗组,每组12只。除对照组外所有大鼠均给予皮下注射40?l4(精致橄榄油配制,每3天1次,共6周)。对照组注射等体积的精制橄榄油。治疗组同时给予血管紧张素Ⅱ受体阻断剂灌胃。每天1次,至6周。实验结束后处死大鼠收取肝组织及血清标本。利用HE和VG染色对肝组织胶原表达及纤维化程度进行评价。血清学检测包括层粘连蛋白(LN),透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原检测(放射免疫法)。结果与模型组相比,血管紧张素Ⅱ受体阻断剂安博维可显著降低肝纤维化大鼠血清LN,HA,PCⅢ及Ⅳ型胶原水平,并显著改善肝纤维化程度(P<0.05)。结论安博维对CCl4诱导的大鼠肝纤维化有良好的防治作用。     

抗人尿道高分化鳞癌单抗E6及F9在上皮性肿瘤组织的表达及其意义

目的　探讨E6,F9在鳞癌和腺癌中的表达及其临床意义。方法　利用免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白 -过氧化物酶 (SP)法检测 3例正常人组织 ,4 8例肿瘤患者组织 ,其中包括乳腺、胃、结肠、肺腺癌、阴茎、口腔、原癌、宫颈鳞癌各 6例。结果　正常组织呈阴性染色。肿瘤组织呈现细胞膜和细胞浆阳性着色 ,E6阳性表达率在鳞癌中为 91% (2 2 / 2 4 ) ,腺癌中为 88% (16 / 18) ,直肠癌为 83% (5 / 6 ) ,在肿瘤组织中综合表达率为 89% (4 3/ 4 8) ,F9阳性表达率在鳞癌中为 91% (2 2 / 2 4 ) ,腺癌中为 83% (15 / 18) ,直肠癌为 83% (5 / 6 ) ,在肿瘤组织中综合表达率为87% (4 2 / 4 8)。结论　单抗E6,F9具有比较强的特异性 ,其高效表达可用来判定鳞癌和腺癌的生物学行为 ,并为鳞癌和腺癌的预后提供依据。     

结缔组织生长因子及其胶原在硬皮病组织中的表达

背景:近年来,大量文献报道结缔组织生长因子作为转化生长因子β的下游效应因子,是最重要的致纤维化生长因子,在多种纤维化疾病中高表达.目的:观察结缔组织生长因子在硬皮病组织中的表达情况及与其上、下游效应基因表达的关系,探讨结缔组织生长因子在硬皮病组织中的促纤维化机制.设计、时间及地点:对照观察实验,于2008-05/11在解放军广州军区广州总医院医学实验科完成.材料:组织标本均来源于解放军广州军区广州总医院整形外科患者,正常皮肤来自整形手术中切除的多余皮肤.方法:收集硬皮病皮肤组织、增生性瘢痕组织及正常皮肤组织标本,免疫组化检测结缔组织生长因子的表达,反转录一聚合酶链式反应方法检测结缔组织生长因子、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原mRNA表达,Western blotting检测结缔组织生长因子蛋白的表达.主要观察指标:①结缔组织生长因子蛋白在硬皮病皮肤组织中的表达和定位情况.②结缔组织生长因子、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的相对表达量.③比较增生性瘢痕、硬皮病和正常皮肤组织中结缔组织生长因子蛋白表达量的情况.结果:免疫组织化学染色发现,结缔组织生长因子在基底细胞和角质形成细胞中有强阳性表达,在真皮成纤维细胞中亦有阳性表达.硬皮病皮肤组织及增生性瘢痕组织中结缔组织生长因子、转化生长因子β1、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA过表达,而正常皮肤组织无或仅有极弱表达.Western blotting结果显示硬皮病皮肤组织有明显的结缔组织生长因子蛋白表达带.结论:在硬皮病纤维化过程中,结缔组织生长因子可能是重要的调控因子之一,结缔组织生长因子可能与转化生长因子β1协同作用促进细胞外基质合成.     

微波快速脱钙及其脱钙液的选择

微波快速脱钙及其脱钙液的选择杨传红，赖晃文，唐赓云，姜秀英骨组织超薄切片的制备是进行骨组织超微结构研究的先决条件。常规脱钙方法时间太长且超微结构保存不良，不利于临床病理的快速诊断。我们选择不同脱钙液在微波条件下探讨快速脱钙的方法，以达到快速诊断的目的...     

HE染色在环氧树脂半薄切片中的应用

目前 ,对Ｅｐｏｎ812包埋的半薄切片进行光镜观察 ,其染色多数采用盐基性染料如美蓝、甲苯胺蓝、结晶紫、硫堇和碱性品红等无需脱脂的单色染色法。虽然方法简单、时间短 ,但效果很差 ,细胞核、细胞质、细胞膜与细胞间质的区别不明显 ,有时结构不清、难以定位 ,而且染色后的切片易褪色 ,不易做长期保存。笔者应用ＨＥ染色法 ,染色效果比较理想 ,特别对临床肾活检超微病理诊断定位有重要意义。现将方法和体会介绍如下。1　染色方法1.1　常规环氧树脂Ｅｐｏｎ812包埋 　组织经 3%戊二醛前固定 2ｈ ,1%锇酸后固定 1 5ｈ ,梯度乙醇 (5 0 %、70 %…     

低剂量伽玛刀照射对致大鼠皮质及海马神经元c-fos和nNOS表达的影响

目的 通过观察低剂量伽玛刀照射对致痫大鼠大脑皮质及海马神经元c—fos和脑型一氧化氮合酶（nNOS）表达的影响，探讨伽玛刀治疗癫痫的作用机制。方法将44只青霉素致痫大鼠模型等分为实验组和实验对照组大鼠各22只，另取4只正常大鼠作为正常对照组。实验组行伽玛刀照射（周边剂量12Gy）后，应用免疫组化方法，观察大脑皮质及海马神经元c-fos和nNOS表达的变化。结果无论是皮质还是海马，c—fos和nNOS在实验组与实验对照组动物之间，表达均有明显的差别，实验组表达明显少于实验对照组，而后者呈现双高峰现象。结论c—fos和nNOS在伽玛刀治疗癫痫的机制中发挥了重要作用。