纯化出血热病毒抗原微量免疫方法的探讨

纯化出血热病毒抗原微量免疫方法的探讨内蒙古医学院微生物学教研室（呼和浩特０１００５９）王灵枢，杨丽敏，林娜安徽省医学科学研究所病毒室（合肥２３００６１）倪大石，董朝阳纯化或部分纯化抗原的微量免疫方法报道很多，但以淋巴结内注射免疫、体外淋巴细胞（或脾细...     

鼻内镜鼻窦手术的护理配合

鼻内镜鼻窦手术(ESS)将传统根治性、破坏性手术,变为根据病变的程度,在彻底清除病变的基础上,尽可能保留鼻腔、鼻窦正常粘膜和结构,形成良好的通气和引流,促使鼻腔、鼻窦粘膜的形态和生理功能恢复的微创手术.     

山莨菪碱的结构修饰与构效关系

 目的观察山莨菪碱衍生物的抗胆碱活性,总结其构效关系。方法通过将山莨菪碱的羟基选择性地乙酰化,氮原子甲基化,制备山莨菪碱衍生物;利用波谱方法鉴定其结构;通过兔瞳孔实验和离体豚鼠回肠肌实验观察制备化合物的胆碱能活性。结果制备了5个山莨菪碱衍生物(1～5),其中1,3,4和5是新化合物;兔瞳孔实验和离体豚鼠回肠肌实验显示1和5有明显的抗胆碱活性。结论山莨菪碱及其衍生物的6β-羟基乙酰化,将导致其抗胆碱活性减弱或消失;氮原子季铵化,将使其抗胆碱活性增强。     

HPLC法测定镇惊散中盐酸小檗碱的含量

目的建立镇惊散中盐酸小檗碱的高效液相色谱含量测定方法。方法以方中黄连为其定量指标,采用高效液相色谱法,选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾溶液(22∶78)为流动相;检测波长为345nm;流速:0.800mL/min;理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000。结果标准曲线为Y=-36220.51+3650.14X,r=0.9999,在12.012～600.600μg范围内呈良好线性关系,平均回收率为98.85%,RSD=1.09%,n=6。结论该方法灵敏度高,重现性好,结果准确、可靠。     

Survivin反义RNA/HSP70双基因转染对HepG2细胞的影响

目的:探讨survivin反义RNA/HSP70双基因转染对肝癌细胞系HepG2的影响.方法:将已成功获得的双基因载体(pIRES2-ECFP-survivin反义RNA/HSP70)用脂质体介导转染肝癌细胞系HepG2,转染72小时,收集各组细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染后的细胞,通过RT-PCR、western-blot检测转染后细胞中survivin mRNA、survivin蛋白及HSP70蛋白表达的变化.结果:转染双基因载体与转染空载体的肝癌细胞系HepG2于倒置荧光显微镜下可见绿色荧光;转染双基因载体的HepG2细胞与转染空载体的HepG2细胞和未转染的HepG2细胞相比,survivin mRNA和survivin蛋白表达水平降低,而HSP70蛋白表达升高.结论:Survivin反义RNA与HSP70双基因转染成功;survivin反义RNA能干扰HepG2内源survivin的表达,HSP70能上调HepG2细胞HSP70蛋白的表达.     

泌尿外科腹腔镜手术并发症的观察与护理

目的：及时发现泌尿外科腹腔镜手术患者并发症的发生，及时采取相应的护理措施，促进康复。方法：对我科一年来进行手术的183例患者术后进行重症护理，密切观察24h，注意观察并发症的发生，给予相应对策干预，避免不良反应出现。无异常表现的给予一级或二级护理。结果：及时发现了15例并发症患者，进行治疗护理后如期出院，无不良后果。结论：了解泌尿外科腹腔镜手术并发症的原因与特点，早期发现，及时处理，保证患者康复。     

FAK、P-FAK(Y397)、PTEN在胃腺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化粘着斑激酶(phospho-FAK,Y397)、与张力蛋白同源的第10号染色体丢失的磷酸酶基因(phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome,PTEN)在胃腺癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学S-P法检测FAK、p-FAK(Y397)和PTEN在100例胃腺癌和30例癌旁组织中的表达。结果:胃腺癌与癌旁组织FAK阳性表达率分别为71%(71/100)、43%(13/30)(P<0.05);P-FAK(Y397)阳性表达率分别为62%(62/100)、20%(6/30)(P<0.05);PTEN阳性表达率分别为53%(53/100)、97%(29/30)(P<0.05);癌组织中FAK、p-FAK(Y397)、PTEN的表达与胃腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),与年龄、性别无关(P>0.05);PTEN与FAK、P-FAK(Y397)在胃腺癌中的表达呈负相关(r=-0.514,-0.572;P<0.05),FAK与p-FAK(Y397)呈正相关(r=0.539;P<0.05)。结论:胃腺癌中存在FAK和p-FAK(Y397)表达上调,PTEN表达下调,三者的表达水平可能与胃腺癌的发生、发展有关。     

亚甲蓝+牛磺胆酸钠联合逆行胰胆管注射法制备重症急性胰腺炎大鼠模型

目的研究亚甲蓝+牛磺胆酸钠联合逆行胰胆管注射法制备重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型的应用价值。方法选取SPF级SD大鼠90只,雌雄各半,采用拆信封法随机分为对照组(C组)、牛磺胆酸钠组(ST组)及亚甲蓝+牛磺胆酸钠组(MBST组),分别经胰胆管逆行注射0.9%生理盐水、牛磺胆酸钠+DAPI荧光剂及亚甲蓝+牛磺胆酸钠+DAPI荧光剂的混合液,分别从穿刺成功率、胰腺组织坏死程度、胰腺病变范围及胆肠漏发生率4个方面比较各组间的差异。结果 (1)穿刺成功率在MBST组明显高于ST组(P=0.003)和C组(P=0.006),ST组和C组比较差异无统计学意义(P=0.782)。(2)在MBST组和ST组的胰腺坏死程度随着时间的延长越来越重(P0.050);在12、24和48 h 3个时间点时MBST组胰腺坏死程度均较ST组严重(P0.050)。(3) MBST组的胰腺病变范围评分明显高于ST组(P=0.003)。(4) MBST组的胆肠漏发生率明显低于C组(P=0.008)和ST组(P=0.004)。结论亚甲蓝+牛磺胆酸钠联合逆行胰胆管注射法制备SAP大鼠模型可以提高胰胆管穿刺成功率、加重胰腺组织的坏死程度、扩大胰腺组织的病变范围、降低胆肠漏率,可为SAP基础研究提供较为稳定的动物模型。     

人脐带血单核细胞中的神经样细胞研究

目的 研究人脐带血单核细胞(HUBMNCs)中是否存在神经样细胞.方法 采集30例新生儿的脐带血,从中分离出单核细胞.采用免疫荧光染色法观察其神经巢蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,并对HUBMNCs进行体外培养,用倒置相差显微镜观察细胞形态.结果 HUBMNCs经免疫荧光染色后,在1个高倍视野(HP,×200)下分别可见(2.67±1.29)个、(7.37 ±2.46)个散在分布的nestin、NSE阳性的细胞.培养10 ～ 12 d时,出现3～5个/HP胞体较大、有数个类似轴突和树突状粗长突起的神经样细胞.结论 HUBMNCs中有少数神经样细胞.