应用差异显示技术克隆胶质瘤细胞诱导分化相关基因

目的 克隆胶质瘤细胞诱导分化相关新基因。方法 应用RNA随机引物差异显示，SSCP纯化，PCR产物快速克隆，反Northern杂交及生物信息学分析等方法，观察人脑胶质瘤细胞株SHG－44－9分化过程中的基因表达变化。结果 克隆了诱导分化前后表达差异显著的15个基因，其中诱导后下调基因4个，上调基因11个。同源性分析表明，5个是已知基因，10个是未知基因。诱导后上调的DIG－1基因与c-myc内含子结合蛋白1（MIBP1）基因高度同源，此基因具有转录因子活性，表达的蛋白可抑制c-myc基因的表达。结论 克隆了15个人脑胶质瘤细胞诱导分化相关基因，其中控制c-myc基因表达的MIBP1基因诱导分化后上调提示，它可能是调控胶质瘤细胞分化基因，值得进一步研究。     

复发胶质瘤的综合治疗

目的探索复发胶质瘤综合治疗措施。方法回顾性分析我院65例复发胶质瘤患者的临床资料,总结其临床特点、病理学及影像学特征、分析综合治疗措施。结果复发胶质瘤的诊断应综合考虑,磁共振波谱成像(MRS)、正电子发射体层成像(PET)、弥散加权技术(diffusion-weighted Imaging,DWI)等影像学手段有利于鉴别诊断;复发胶质瘤再手术成功率较高,术后无死亡;综合治疗比单一治疗措施有效。结论复发胶质瘤应采用以手术为主的综合治疗措施;再次手术应以患者的生活质量为中心;硼中子俘获治疗拥有广阔的临床应用前景。     

203头新生小牛血清的细胞培养差异性报告

２０３头新生小牛血清的细胞培养差异性结果：优级血清ｃｐｍ值≥１０万（占８．３％），甲级血清ｃｐｍ值＜１０万～５万（占４２．４％），乙级血清ｃｐｍ值＜５万～２万（占３５％，部分细胞生长尚好），丙级血清ｃｐｍ值＜２万（占１３．８％，毒性血清）。优级加甲级为５０．７％，乙级加丙经为４９．３％．如优、甲、乙和丙级血清混合，则血清质量将会显著降低或等同于两级血清．     

SHG-44胶质瘤干细胞球的表型特点及其移植瘤病理特征

目的 研究SHG-44胶质瘤干细胞球的分子表型、致瘤能力及其移植瘤的病理学特征.方法 应用神经干细胞培养基(NSCM)培养SHG-44胶质瘤细胞株,获取其胶质瘤干细胞球,纯化培养后行细胞免疫(ICC)荧光染色检测CD133、兔抗人巢蛋白(nestin)、A2B5、小鼠抗人波形蛋白(vimentin)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)和IDH R132H的表达;含血清培养基诱导其分化,ICC检测CD133、nestin、vimentin、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-Ⅲ tubulin和半乳糖神经鞘氨醇酶(GalC)的表达情况;建立SHG-44胶质瘤干细胞球原位移植瘤模型,免疫组织化学检测CD133、nestin、VEGFR-2、GFAP、S-100和CD34的表达;比较SHG-44细胞原位模型和SHG-44干细胞球移植瘤的病理学特征.结果 应用神经干细胞培养法能成功获取SHG-44胶质瘤干细胞球.第10代SHG-44胶质瘤干细胞球和SHG-44胶质瘤细胞的CD133阳性细胞比例分别为(71.63±5.92)％和(1.95±1.45)％.SHG-44胶质瘤干细胞球的nestin、vimentin、VEGFR-2和A2B5阳性细胞比例分别为(84.06±7.58)％、(29.11 ±3.44)％、(64.44±3.69)％和(14.08 ±2.19)％.SHG-44胶质瘤干细胞球中可见IDH R132H突变的细胞群.含血清培养基诱导分化后,CD133、nestin、vimentin、GFAP、β-Ⅲ tubulin和GalC阳性细胞比例分别为(1.89±1.27)％、(6.67±2.75)％、(93.75±2.95)％、(91.33±4.75)％、(82.36±4.02)％和(8.92±3.19)％.原位移植瘤组织中GFAP、S-100和VEGFR-2蛋白表达呈阳性,CD133和nestin蛋白表达呈阴性.极少量特异抗人CD34阳性细胞围绕成管状.SHG-44胶质瘤干细胞球颅内原位移植瘤局部浸润能力高于SHG-44胶质瘤细胞颅内原位移植瘤.结论 神经干细胞培养法可成功从SHG-44胶质瘤细胞株中获取胶质瘤干细胞,属于CD133+ A2B5-亚群,高表达VEGFR-2,具备自我更新及多向分化能力,可参与血管拟态的形成.     

硼中子俘获疗法促人黑色素瘤细胞凋亡

目的 研究硼中子俘获疗法(BNCT)体外杀伤人黑色素瘤细胞的效应及机制.方法 首先检测黑色素瘤细胞A375吸收含硼化合物二羟基苯丙氨酸硼(BPA)的情况,然后采用医院中子照射器(IHNI-1)对含硼(10B)细胞进行照射.克隆存活实验检测细胞的放射敏感性,MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术检测凋亡,Western blot检测胞质内细胞色素C表达和caspase-9的激活.结果 BPA孵育24 h,A375细胞10B浓度为(2.884±0.148)μg/107个细胞,达到了BNCT杀伤细胞的要求.富含10B的细胞经中子照射2.1 min后存活分数降低为对照组的58％(t=2.964,P＜0.05),细胞经中子照射后24 h增殖率下降为对照组的83％(t=3.286,P＜0.05),BNCT组细胞凋亡率达(55.2±7.9)％,明显高于对照组(t =9.754,P＜0.05),胞质内细胞色素C水平上升且caspase-9激活程度增加(t=7.625、8.307,P＜0.05).结论 BNCT能够杀伤黑色素瘤细胞,其机制可能通过线粒体途径诱导细胞凋亡.     

JB—4水溶性塑料包埋剂在肿瘤多细胞球体中的应用

用ＪＢ－４Ｅｍｂｅｄｄｉｎｇｋｉｔ对肿瘤多细胞球体进行包埋、切片和染色，组织没有变形和收缩，球体组织显示清晰。本法包埋时间短，用普通切片机就能切２～４ｍ厚的切片，直接染色，无需二甲苯和酒精进行染色前处理。     

人脑胶质瘤研究20年

目的 总结人脑胶质瘤研究20年的经验，探讨进一步研究策略。方法 回顾1980至2000年在人脑胶质胶瘤的模型制作、化疗实验、抗体制备与应用、诱导分化、生物治疗等方面的创新点和不足之处的改进。结果 创新，建立了中国第一个人脑胶质瘤体外细胞系SHG－44及其可移植性裸小鼠NHG－1、杂交瘤单抗细胞株SZ38和SZ39及其在生物导向诊治中的应用、详细观察诱导分化剂HMBA和DMF的促分化效应等。改进，从SHG－44中克隆出具有高.中.低三个不同分化程度的细胞株，建立人鼠肿瘤免疫嵌合模型以弥补NHG－1不能用于生物免疫治疗的不足，SU2000替代效价不断下降的SZ39、基因工程改造SZ39为ScFv、Fab/Hu、ScFv/TNF、ScFv/PE40和化学偶联SZ39Fab/CD3Fab等小分子.低免疫原.双功能抗体。结论 胶质瘤研究举步为艰，随着分子生物学研究的深入和人类DNA密码的破译，传统治疗加生物.免疫和基因治疗有可能永久性治愈胶质瘤。     

胚胎发育不良神经上皮肿瘤中胶质细胞特性的研究

自Ｄａｕｍａｓ Ｄｕｐｏｒｔ等首次提出胚胎发育不良神经上皮肿瘤 (ｄｙｓｅｍｂｒｙｏｐｌａｓｔｉｃｎｅｕｒｏｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｔｕｍｏｒ,ＤＮＴ)并对此进行全面分析 ,ＤＮＴ被正式列入ＷＨＯ脑肿瘤分类以来 ,至今全球临床报道已近 2 0 0例[1,2 ] 。根据临床特点、影像学和组织病理学 ,对ＤＮＴ做出诊断已并不困难 ,但对此肿瘤细胞中占主导地位的胶质细胞的起源及其特性尚未明确定论。本研究对一例ＤＮＴ培养细胞进行细胞形态和免疫组织化学方面的分析 ,结合临床探讨其肿瘤胶质细胞的生物学特性。一、材料与方法患者女 ,36岁。反复…     

人脑胶质瘤多细胞球体培养方法的研究

本实验用静止培养法观察了接种细胞密度、血清浓度、琼脂或琼脂糖浓度及用于溶解琼脂或琼脂糖的不同溶剂对人脑胶质瘤细胞系SHG-44多细胞球体形成的影响。接种1～3×10~6细胞于铺有10m1 0.75～1.0%琼脂或琼脂糖-生理盐水或培养液底层的培养皿(直径为90mm)中,加入15ml含20%小牛血清的Eagle'sMEM培养液,所得到的球体大小较均匀,形态较圆,3～4天即可形成完整紧密的球体,重复性良好。本法与旋转瓶培养法相比,具有操作简便、经济省时等优点。     

人脑胶质瘤及其体外培养细胞系乳酸脱氢酶同工酶的初步研究

<正> 乳酸脱氢酶(LDH)同工酶是由H亚基和/或M亚基以不同比例组成的四聚体;LDH1～5五种同工酶分别由H_4、H_3M、H_2M_2、HM_3和M_5组成,它们在电泳中迁移率不同。H亚基在供氧充足的心肌细胞中富有,而M亚