汉族人维生素D受体基因TruⅠ酶切位点多态性及其对BsmⅠ酶切位点多态性测定的影响

目的测定汉族人维生素D受体基因TruⅠ酶切位点多态性分布并探讨其对BsmⅠ酶切位点多态性分布测定的影响。方法收集80名健康汉族人外周静脉血标本,提取基因组DNA,用限制性片段多态性长度酶切法测定80名汉族人维生素D受体基因TruⅠ、BsmⅠ酶切位点多态性;换用常规引物再次测定上述标本BsmⅠ酶切位点多态性;分析维生素D受体基因TruⅠ、BsmⅠ酶切位点多态性及两次测定的BsmⅠ位点的一致性。结果测得TruⅠ基因型频率为TT68.7%,Tt26.3%,tt5.0%;同一PCR片段上测得BsmⅠ位点基因型频率为BB6.2%,Bb52.5%,bb41.3%,多态性分布均符合Hardy-Weinberg平衡;换用常规引物测定同批标本BsmⅠ位点多态性,基因型分布为BB20.0%,Bb26.2%,bb53.8%,不符合Hardy-Weinberg平衡（r=13.29,P〈0.01）。与第1次测定相比,有22个标本基因型由Bb型变成BB型或bb型,发生基因型丢失。结论汉族人VDR基因存在TruⅠ多态性,其多态性分布与其它种族不同;TruⅠ酶切位点多态性可引起BsmⅠ位点多态性测定时等位基因的丢失。     

SPR加矫正术和康复训练治疗无行走能力的重度脑瘫

采用脊神经后报选择性切断术（SPR）加矫正术和康复训练治疗重度脑瘫19例，随访半年～4．5年，有11例患者（57．9％）获得行走功能。结果显示：重度脑瘫患者行SPR加矫正术和康复训练等综合治疗后仍有相当患者获优良效果。表明重度脑瘫SPR后必需辅以恰当的矫正术和复杂持久的康复训练，提示：康复训练是重度脑瘫患者功能改善的根本，而SPR只是降低肌张力的关键。SPR加矫正术和康复训练相结合为重度脑瘫的治疗提供了一条新途径。     

小儿马蹄内翻足的不同病理特点和治疗

作者分析先天性、麻痹性和痉挛性马蹄内翻足不同病理特点,采用不同治疗方案治疗马蹄内翻足76例108足,随访8个月～7年,优良率为89.3％。对先天性马蹄内翻足,其治疗重点是彻底松解,平衡肌力和矫正骨畸形。对麻痹性下垂内翻足,重点是平衡肌力,而对痉挛性马蹄内翻足,肌力平衡不等于痉挛平衡,最好先行降低肌张力和痉挛的SPR手术,否则在行肌力平衡的同时尽量使紧张性痉挛得到平衡或使其缓解。     

介绍一种小儿下肢平衡牵引装置

下肢牵引术,是小儿骨科常用的术前准备、术后处理或治疗手段,由于小儿体重轻、反牵引力不够,故临床上多辅以健侧髋人字石膏,否则将会出现躯干倾斜、患肢外展,达不到预期牵引效果(图一)。为此,     

腰椎体滑脱症的复位与椎体间融合(附14例报道)

１９９３年５月～１９９６年５月,应用自行研制的椎体复位器和融椎器及其配套磁疗器械,治疗椎弓根崩裂和并腰椎滑脱症１４例,近期效果满意,报道如下。１资料与方法本组１４例,男８例,女６例,年龄２５～５９岁,平均３８．５岁。病程１～１７年,平均６．７年,８例有外伤史。腰５椎体前沿脱９例,腰４椎体滑脱５例。按Ｍａｇｅｒｄｉｎｇ法Ⅰ度滑脱４例,Ⅱ度滑脱１０例,１４例均有不同程度的腰骶臀部痛。其中单侧下肢放射痛９例,双下肢放射痛５例。１０例具有典型的间歇性跛行,６例有局限性小腿及足外侧感觉异常。４例下肢肌力减…     

经肋间后动脉介入移植骨髓基质干细胞修复家兔脊髓损伤模型的可行性研究

目的 评价经肋间后动脉移植骨髓基质干细胞(BMSCs)修复创伤性脊髓损伤的可行性. 方法 选取2只家兔提取BMSCs,扩大培养后采用菲立磁标记及绿色荧光蛋白基因转染.另选取20只家兔随机分为两组:经肋间后动脉注射BMSCs组和只创建脊髓损伤模型组.结果观察包括:BMSCs的核磁共振示踪,脊髓标本宏观及微观观察,神经电生理检查. 结果 实验第14天内,磁共振显示BMSCs逐渐迁移到脊髓损伤区域,并经脊髓组织切片荧光显微镜检查进一步得到证实;脊髓组织切片电镜检查发现实验组可见大量新生髓鞘,部分髓鞘的少突胶质细胞的细胞质内含有菲立磁颗粒;神经电生理结果显示:第7天时实验组与对照组损伤脊髓节段神经传导功能比较差异无统计学意义(P＞0.05),第14天时两组比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 经肋间后动脉介入移植BMSCs修复脊髓损伤是一种可重复、高效的干细胞移植途径.     

双下肢重度瘫痪的外科治疗(26例报告)

作者自1979～1989年经系统治疗的26例小儿麻痹后遗症双下肢重度瘫痪者,获得满意效果。本文结合该组病例对临床分类、手术适应证、手术总体设计及应掌握的原则等,提出新的见解。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子在周围神经损伤运动终板再生中的效应

目的：观察神经损伤晚期修复时，碱性成纤维细胞生长因子对运动终板再生的影响。方法：实验于2001-09／2003-12在广东省第二人民医院骨科实验室进行。①选用健康同龄雌性SD大白鼠50只，行右侧坐骨神经切断，12周后再吻合。②将大鼠随机分为两组，每组25只。实验组于神经缝合处放入浸有生理盐水溶解的碱性成纤维细胞生长因子1200u明胶海绵（1cm&;#215;0．5cm&;#215;0．5cm），术后患肢腓肠肌注射0．2mL生理盐水稀释的碱性成纤维细胞生长因子1200u，隔日1次至28d；对照组缝合处放入同样大小浸有生理盐水的明胶海绵，术后患肢腓肠肌注射等量生理盐水，隔日1次至28d。③术后2，4，6，8，12周实验组和对照组各取5只大鼠行神经电生理和组织学检查及超微结果观察。结果：50只大鼠均进入结果分析。①两组大鼠神经电生理检查结果：术后4，6，8周实验组运动神经传导速度比对照组显著加快（31．7&;#177;3．12）比（19．30&;#177;3．41）m／s（44．50&;#177;3．83）比（30．20&;#177;4．63）m／s，（48．08&;#177;3．45）比（37．10&;#177;3．58）m／s，F=7．15～13．65，P〈0．05）；术后6，8，12周实验组腓肠肌诱发动作电位显著高于对照组（10．12&;#177;3．10）比（6．87&;#177;3．82）mV，（15．80&;#177;3．21）比（10．12&;#177;3．23）mV，（28．70&;#177;5．61）比（19．98&;#177;4．10）mV．F=5．20-6．12，P〈0．05）。②两组大鼠腓肠肌光镜及电镜观察结果：实验组和对照组镜下均可见再生运动终板，可见初级突触间隙形成，术后第8周，运动终板进一步形成，且实验组较对照组运动终板染色深，可见次级突触间隙形成。术后12周，实验组运动终板形态与着色接近正常。结论：神经损伤晚期修复时碱性成纤维细胞生长因子可促进运动终板再生。     

骨髓源性神经干细胞周围神经移植的实验

背景由于周围神经只是神经元细胞的轴突,有关神经干细胞的研究几乎都集中在神经元细胞上,因此,关于周围神经修复的研究可以借鉴神经干细胞研究的某些经验.目的观察自体骨髓源性神经干细胞于周围神经损伤区移植后周围神经修复情况,以及所移植神经干细胞能否在周围神经损伤区以分化神经元的形式存活并迁移到脊髓.设计观察对比实验.单位南方医科大学珠江医院神经医学研究所.材料清洁级新西兰大白兔8只,体质量1.5～2.5 kg,雌雄不拘.方法实验于2004-04/10在南方医科大学珠江医院神经医学研究所完成.①取新西兰大白兔骨髓基质细胞体外培养及诱导分化为神经干细胞.②采用以溴脱氧尿嘧啶核苷标记细胞和免疫细胞化学SABC法检测观察培养细胞.③制备兔坐骨神经损伤模型,随机选择一侧坐骨神经损伤区为移植侧,注入生理盐水、胶原基质蛋白及细胞包埋液至0.01 mL(含干细胞1×1010L-1);另外一侧为对照侧,注入胶原基质蛋白悬液0.01 mL.移植后3个月灌注固定,行自体周围神经损伤区移植;移植区、脊髓区、对侧损伤区和正常神经区取材观察.主要观察指标神经干细胞移植区、脊髓区、对侧损伤未移植区神经纤维形态及神经元细胞.结果移植区生长的神经纤维密度及连续性明显比对侧未移植区高,光镜下可见较多的许旺细胞;放大至400倍视野下,还可见有髓神经纤维的郎飞氏结;神经纤维间隙也可见有黏液基质,并有少数成纤维细胞;移植区、脊髓区和对侧未移植坐骨神经损伤区均未见有神经元样细胞存在.结论自体骨髓源性神经干细胞周围神经缺损区移植有利于神经纤维的修复,不能在周围神经移植区、脊髓区和对侧缺损对照区以神经元的形式存活.     

HSV-tk/GCV自杀基因系统对骨肉瘤细胞体外杀伤效应

目的：观察：HSV—tk／GCV系统对骨肉瘤细胞SAOS-2的体外杀伤作用．方法：构建tk基因逆转录表达载体pL(tk)SN,在lipofectamine2000介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,用NIH3T3测定病毒滴度,将重组病毒感染人骨肉瘤细胞SAOS-2,G418筛选出抗性克隆命名为SAOS／tk,以RT—PCR及Southern blot检测tk基因的整合及表达．观察tk基因修饰细胞生长状况及MTT法观察前药对tk基因修饰骨肉瘤细胞的杀伤效应．结果：RT—PCR及Southern blot分析证明tk基因在人骨肉瘤细胞系SAOS-2中有整合及表达;SAOS／tk与未转基因的原肿瘤细胞相比,两者生长速度及形态结构无明显差别;在前药敏感性试验中,GCV对SAOS／tk细胞的杀伤作用十分明显,半数致死量约为1mg／L,而亲本细胞SAOS-2和空白质粒转染SAOS／0细胞,半数致死量大于100mg／L．tk基因修饰细胞与不同比例亲本细胞混合后经GCV治疗,SAOS／tk占混合细胞总数的20％时即可杀伤约50％的混合培养细胞.结论：人骨肉瘤细胞系SAOS-2对HSV—tk／GCV系统高度敏感,并且有明显的旁观者效应,可望成为骨肉瘤基因治疗的新途径．