非综合征型聋患者及家庭成员耳聋基因MYO15A检测及其产前诊断意义北大核心CSCD

目的分析2例汉族非综合征型聋(nonsyndromic sensorineural hearingloss,NSHL)患者及家庭成员中耳聋基因MYO15A的突变位点,探讨MYO15A基因检测用于产前诊断的可行性。方法采集2例汉族非综合征型感音神经性聋患儿(均为男性,年龄分别为2岁8个月和3岁6个月)及两个家庭(编号为NSHL-01和NSHL-02)成员血样并记录临床资料。应用芯片捕获高通量测序(targeted genomic capturing and next-generation sequencing,targeted DNA-Hiseq)对2例NSHL患儿进行127个耳聋基因检测,获得变异序列后,针对所检出变异序列对家庭成员和健康对照个体的MYO15A基因序列进行变异验证分析,确定致病性突变后,使用sanger测序法对NSHL-02家庭中的高危胎儿进行孕中期产前诊断。结果在NSHL-01家庭的患儿中检测出MYO15A基因复合杂合突变,即:内含子18亚区c.5134-1G>A(p.-)杂合突变和外显子20亚区c.5324A>C(p.Gln1775Pro)杂合突变,本地收集的200例正常测序样本中无关于此SNP的频率信息;患儿的父亲携带c.5134-1G>A杂合突变,而患儿的母亲携带c.5324A>C杂合突变。在NSHL-02家庭的患儿检出MYO15A基因复合杂合突变,第二外显子c.374delG(Arg125ArgfsX319)杂合突变和外显子56亚区c.9358C>T(p.Gln3120Ter)杂合突变,本地收集的200例正常测序样本中无关于此SNP的频率信息;患儿的父亲携带c.9358C>T杂合突变,而患儿的母亲携带c.374delG杂合突变;该家庭高危胎儿携带c.9358C>T杂合突变,不携带c.374delG杂合突变,出生后表型正常。结论 MYO15A基因内含子18亚区c.5134-1G>A杂合突变和外显子20c.5324A>C杂合突变,及第二外显子c.374delG杂合突变和外显子56亚区c.9358C>T杂合突变是2个NSHL家庭的致病原因,芯片捕获高通量测序及数据分析技术可对2个NSHL家庭进行有效的基因诊断,结合sanger技术可进行产前诊断。     

脱髓鞘型和轴索型吉兰-巴雷综合征的临床及电生理研究

<正>根据电生理学和病理学表现,吉兰-巴雷综合征(GBS)主要分为两种亚型:(1)脱髓鞘型,即以节段性脱髓鞘为主的急性炎性脱髓鞘性多发性神经病(AIDP);(2)轴索型,即以轴索损害为主的急性运动轴索型神经病(AMAN)[1]。这两种GBS亚型的发病率不仅存在地理分布差异,而且具有不同     

VEGF-C和VEGF-D蛋白表达在胰腺癌淋巴转移中的意义

目的探讨胰腺癌中VEGF-C、VEGF-D蛋白表达与淋巴结转移之间的相关关系,阐明癌周淋巴管增生在胰腺癌淋巴转移中的作用及意义。方法免疫组化检测30例胰腺癌组织中VEGF-C、VEGF-D的表达及其与临床病理、淋巴结转移的关系。结果胰腺癌VEGF-C、VEGF-D蛋白表达阳性率分别为73%(22/30)、57%(17/30),肿瘤周边部位显著高于肿瘤中心部位,其表达与肿瘤的部位、分化程度、组织学类型无关,与肿瘤的TNM分期有关,Ⅲ~Ⅳ期显著高于Ⅰ~Ⅱ期。在VEGF-C、VEGF-D蛋白阳性组,淋巴结转移均显著增多。结论VEGF-C和VEGF-D与诱导胰腺癌淋巴管生成,促进肿瘤细胞淋巴道转移有关。     

转人α1,2岩藻糖苷转移酶基因猪动脉内皮细胞抗人血清溶破实验

目的研究转入α1,2岩藻糖苷转移酶(HT)基因克服异种移植超急排斥反应(HAR)的作用。方法构建pcDNA3-HTcDNA重组质粒,体外培养猪动脉内皮细胞(PAEC),脂质体转染法将pcDNA3-HTcDNA转染PAEC,新霉素(G418)筛选具有抗性的细胞克隆,PCR检测重组基因的整合,流式细胞术(FCM)检测转染细胞H抗原和异种抗原α—Gal表达。分别以未转染的PAEC和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作对照。将转染细胞和正常细胞分别以20％、40％和60％人血清孵育2 h,比较溶破细胞百分数。结果重组质粒转染PAEC经筛选得到抗性细胞克隆,PCR扩增出人HT基因片段,FCM检测正常PAEC与转染PAEC,α-Gal平均荧光强度由1346．81降至194．44,H抗原平均荧光强度由9．10增至215．93;α—Gal M2区由99．98％降至37．180A,H抗原M2区由13．80％升至78．54％。转染细胞以人血清孵育后溶破细胞百分数较正常细胞降低,分别由(32．32±2．37)％、(59．54±4．56)％和(71．46±5．94)％降至(15．78±2．69)％、(30．16±1．46)％和(40．48±3．77)％,差异均有统计学意义(P值均<0．05)。结论转人HT基因PAECα—Gal表达明显降低,H抗原表达升高,对人血清溶破的耐受性增强。转人HT基因可以一定程度抑制HAR。     

甲状旁腺癌诊断治疗的研究进展

甲状旁腺癌是一种罕见的恶性肿瘤,主要临床表现为甲状旁腺功能亢进和继发于高钙血症引起的各种代谢紊乱以及相应组织器官的损害.完善的实验室检查、准确的影像学定位和可靠的组织病理学特征是甲状旁腺癌诊断的重要依据.甲状旁腺癌对放疗、化疗不敏感,肿瘤及其周围受侵组织的"整块切除"是首选的治疗方式.抗PTH免疫治疗作为一种新的治疗方...     

基于加权基因共表达网络的膀胱尿路上皮癌预后及疗效相关基因筛选

目的构建加权基因共表达网络分析（weighed gene co-expression network analysis,WGCNA）,鉴定出膀胱尿路上皮癌（bladder urothelial carcinoma,BLCA）中与预后及治疗效果相关的基因,并分析其在肿瘤相关通路中的活性。方法在癌症基因组图谱数据库获取膀胱尿路上皮癌的转录组测序及相应临床数据;选择年龄、性别、身高、体重、人种、生存时间、吸烟年数、治疗效果、病理分级、TNM分期及淋巴结浸润为临床表型进行加权基因共表达网络分析;利用R语言进行生存分析;利用GSCALite工具进行肿瘤相关的通路活性分析;利用基因表达汇编数据库中的GSE13507和GSE3167数据集进行验证。结果本研究鉴定出与预后及治疗效果均显著相关的基因模块及模块关键基因GPHN、CPSF2、PRMT5、EIF2S1、KLC1、SLC39A9、SRP54及CNIH,上述8个基因在肿瘤相关通路中有一定活性。结论GPHN、CPSF2、PRMT5、EIF2S1、KLC1、SLC39A9、SRP54及CNIH基因在BLCA中与预后及治疗效果均显著相关,并且参与了肿瘤相关通路,可能成为BLCA的生物标志物或潜在治疗靶点。     

黄芪对糖尿病肾病大鼠肾组织COX-2和NF-κB表达的影响

目的：探讨环氧合酶-2（COX-2）和核转录因子κB（NF-κB）在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及黄芪对其的影响。方法：将大鼠分成正常对照组、糖尿病肾病组、黄芪干预组。12周周末检测血肌酐、尿素氮、尿蛋白定量;应用免疫组化、Western印迹和聚合酶链式反应方法分别检测大鼠肾组织COX-2和NF-κB的表达。结果：与正常对照组相比,糖尿病肾病组大鼠COX-2和NF-κB的基因及蛋白表达升高（均P〈0.01）。黄芪干预组大鼠肾组织COX-2和NF-κB的基因及蛋白表达较糖尿病肾病组下调（均P〈0.01）。结论：COX-2参与了糖尿病肾病发生发展的病理过程,黄芪治疗糖尿病肾病的作用机制之一是通过下调COX-2的表达从而发挥肾脏保护作用。     

CR与CT对尺骨冠突骨折应用价值比较

目的：探讨CR与CT对尺骨冠突骨折诊断价值及Negan‐Morrey分型法的应用价值。方法回顾性分析55例含尺骨冠突骨折的肘关节CR及CT图像,以临床诊断为金标准作为比对,分析CR与CT对肘关节任何部位骨折诊断准确率、肘关节骨折检出率、尺骨冠突骨折检出率及“Negan‐Morrey分型法”诊断灵敏度。结果55例肘关节骨折首诊C R准确诊断骨折33例,诊断不符22例,C R诊断准确率60％;C T 准确诊断54例,诊断不符1例,诊断准确率98．2％, CT对肘关节骨折诊断准确率优于MRCR（礸2＝24．24,P ＜0．05）。以“肘关节骨折中至少检出一处”为标准,CR检出41例,漏诊14例,检出率为74．55％,C T全部检出（100％）。MRC T对肘关节骨折检出率优于C R （礸2＝16．04, P ＜0．05）。仅对尺骨冠突骨折分析,C R检出37例,阴性18例,检出率67．27％,M RC T 全部检出（100％）。M RC T 对尺骨冠突骨折检出率优于C R （礸2＝21．52, P ＜0．05）。尺骨冠突骨折C R分型：I型19例,Ⅱ型12例,Ⅲ型6例,未分型18例;M RC T分型：I型26例,Ⅱ型14例,Ⅲ型14例,未分型1例。与临床分型比较,4例M RC T诊断为II型,而临床诊断为Ⅲ型,2例MRCT诊断为Ⅱ型,临床诊断为I型。尺骨冠突骨折MRCT分型敏感性高于CR（ P ＜0．05）。结论 CR对肘关节骨折具有较高的检出率,但诊断准确性不高,对尺骨冠突骨折检出率及骨折分型敏感性低于MRCT ;对CR诊断肘关节骨折尤其怀疑尺骨冠突骨折病例应行M RC T检查,对减少漏诊及指导临床制定合理的治疗方法意义重大。     

Enhanced CD3+/CD4+ T cell activities and modulation of Th1/Th2 lineage development in irradiated rats due to treatment with the male zooid of antheraea pernyi extracts

Objective  Cancer patients undergoing large dose radiotherapy exhibit multifaceted defects in their immune capacity that are likely to contribute to an increased susceptibility to infections and disease progression. The immune impairment may also constitute a barrier to effective immunotherapeutic interventions. Here, we evaluate whether supplementation with the male zooid of Antheraea pernyi extracts could enhance immune function in irradiated rats. Methods  Fifty male Wistar rats were randomly divided into a control group, a simple radiation group and a treatment group. The mice in the simple irradiation and treatment groups were given whole-chest irradiation with 6Gy. In the treatment group, the male zooid of Antheraea pernyi extracts was gavaged at the doses of 16.53mg/kg (large dose group), 2.62mg/kg (medium dose group), and 0.564mg/kg (small dose group) once a day for 14 days. The thymus and spleen indices were calculated. T cell subsets in peripheral blood were determined by flow cytometry and the expressions of IL-2, IFN-γ, IL-4 and IL-10 in sera were determined by ELISA on the 15th day. Results  The thymus index and spleen index of the high dose treatment group were statistically lower than that of the control group and higher than that of the radiation group (P<0.01). CD3+ and CD4+ T cells in the peripheral blood were increased in the high dose treatment group and decreased in the radiation group (P<0.01). Expression of IL-2 and INF-γ in the radiation group was lower than that in control, and significantly increased during therapy. The production of IL-4 and IL-10 could be induced by radiation and was inhibited in the high dose treatment group (P<0.01). Conclusion  Our data indicate that the male zooid of Antheraea pernyi extracts may be administrated to improve immune function in irradiated rats and reverse the radial immune inhibition of rats by stimulating the proliferation of Th cells and inducing the differentiation of Th2 to Th1. This work was supported by the grants from the National Natural Science foundation of China (No. 30472260), the Administration of Traditional Chinese Medicine of Shandong Province, China(No. 2005-109),, and the Health Protection Committee of Shandong Province, China(No. 2006059).     

Syk和VEGF-C蛋白在胰腺癌中的表达及其与淋巴转移的关系

目的探讨胰腺癌组织中Syk和VEGF—C蛋白的表达及其在淋巴转移中的临床意义。方法应用免疫组化技术检测40例胰腺癌组织中Syk和VEGF—C蛋白的表达情况。结果正常胰腺组织表达Syk蛋白，在慢性胰腺炎中有中等表达，其阳性率分别为100．0％和77．8％；在胰腺癌中阳性率为27．5％，大多数呈中等或弱阳性表达，与前两者比较有显著性差异（P=0．0002，P=0．0079）；Syk蛋白与肿瘤的发生部位、分化程度和有无淋巴结转移间无显著性差异；与TNM分期有关，Ⅰ～Ⅱ期组表达明显高于Ⅲ～Ⅳ期组（P=0．0245）。胰腺癌组织中VEGF—C蛋白阳性率为72．5％（29／40），肿瘤周边部位显著高于肿瘤中心部位，具有统计学意义。在VEGF—C蛋白阳性组，淋巴结转移（P=0．0398）增多。Syk和VEGF—C具有关联性。结论Syk蛋白在胰腺癌中表达缺失，并与胰腺癌的发展有关；VEGF—C参与胰腺癌血管生成和淋巴管生成的调控，促进肿瘤细胞淋巴道转移；两者的表达具有相关性。