高通量测序在中草药研究中的应用

高通量测序技术,也被称为“下一代”测序技术,它能够一次对几十万到数百万条分子同时进行测序,是对传统测序的一次革命性改变,具有里程碑式的意义［1］。高通量测序经过数年的发展,已经成为一项较为成熟的研究手段,在转录组测序,基因甲基化,宏基因测序,基因组拼接,micro‐RNA 测序等方面极大地促进了中草药基因的研究发展,对传统中草药进行高通量测序研究,可以从整体水平上了解目标物种的功能基因概况,明确活性成分的代谢通路,为中草药研究奠定分子生物学基础,为传统中草药理论提供现代生物学阐释。本文对高通量测序技术在中草药研究中的应用综述如下。     

阿托伐他汀治疗改善脑出血患者近期神经功能的 临床研究

目的：探索阿托伐他汀治疗脑出血能否改善患者发病后3月的临床预后。 方法：纳入选择保守治疗 的自发性脑出血患者131例,随机分为对照组84例和他汀组47例。2组均按中国脑出血指南进行治疗,其 中他汀组于入院后24 h内开始予以阿托伐他汀钙片20 mg,此后按照20 mg/d的剂量继续服用90 d;随访主 要结果指标是随机化后90 d改良Rankin量表（mRS）评分的序贯分析及不良结局的患者比例,不良结局定 义为死亡（mRS评分=6分）或重大残疾（mRS评分3～5分）。mRS≤2分认为临床结局良好。次要结局指 标是治疗后患者血肿体积的影像学变化。 结果：他汀组治疗有效且结局良好31例（65.96%）;对照组结局 良好31例（36.90%）,二者有显著性差异（P=0.001）。随访观察对照组死亡27例（32.14%）,他汀组死亡6例 （12.77%）,差异有统计学意义（P=0.014）。至随访结束他汀组、对照组不良反应发生情况相似,没有因他汀 类药物的不良反应而需停药者,且他汀组再次发生脑出血的风险无明显增加。结论：选择保守治疗的脑出 血患者于入院后24 h内予以阿托伐他汀治疗可改善3月时患者预后情况,同时未见明显不良反应。     

脊髓灰质炎病毒2型和3型D抗原单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备脊髓灰质炎病毒2型(PV2)和3型(PV3)D抗原的单克隆抗体(mAb),并对抗体的特性进行初步鉴定。方法以PV2及PV3的D抗原为免疫原,常规方法制备小鼠源性mAb,用间接ELISA检测小鼠腹水效价、型别特异性及与C抗原的交叉反应。结果获得4株PV2特异性并与PV2的C抗原不交叉的mAb,2株PV3特异性并与PV3的C抗原不交叉的mAb。结论成功制备了PV2及PV3特异性并与C抗原不交叉的D抗原mAb。     

急性心肌梗死再灌注治疗后早期ST段变化预测心肌微血管功能

目的 :评价急性心肌梗死直接经皮冠状动脉腔内成形术 (PTCA)和支架置入术后ST段变化与心肌微血管灌注之间的关系 ,探讨ST段变化预测心肌微血管功能的可行性。方法 :测量PTCA和支架置入术前及术后 1、5、10、2 0、3 0min及 12h内相关导联ST段抬高指数 (∑STI)。术后 12h内行静脉心肌声学造影 (MCE)。根据心肌灌注将 2 4例患者分为无再流者 8例 (MCE积分为 3分或 2分 ) ,再流者 16例(MCE积分为 1分 )。MCE图像用MCE图像分析软件进行定量分析。结果 :心肌梗死相关动脉成功重建后 ,16例患者危险区有再流 ,8例出现无再流现象 ;再流者 16例患者中 ,14例∑STI下降≥ 5 0 % ,而在无再流者 8例中只有 1例 (P =0 0 0 0 1) ;无再流者 7例在术后 10min内∑STI进一步抬高≥3 0 % ,而再流者仅有 2例 (P =0 0 0 3 )。∑STI变化预测心肌微血管灌注敏感性、特异性及准确性均为 87 5 % ,阳性预测值为 93 3 % ,阴性预测值为 77 8%。术后 2 0min的∑STI与标化A·β值存在显著的负相关 (γ =-0 881,P =0 0 0 0 1)。结论 :急性心肌梗死成功再灌注治疗后不同的ST段变化与心肌微血管灌注有关 ;急性心肌梗死再灌注治疗后早期ST段变化可预测心肌微血管功能。     

几种影响小鼠气管上皮基底干细胞体外增殖及分化潜能因素的研究

目的 探讨多种细胞组分、细胞因子、信号转导分子等在气管上皮基底干细胞(airway basal stem cells,ABSCs)体外增殖和分化过程中的调控作用.方法 采用细胞外基质替代物Matrigel三维体外培养体系,辅以免疫组化分析,观察了几种常见的对干细胞增殖分化发挥重要作用的因素对ABSCs体外集落形成数量、集落大小及分化潜能的影响.结果 成纤维细胞较内皮细胞能显著提高ABSCs集落增殖和分化潜能.成纤维细胞生长因子(FGFs)能增加ABSCs体外集落形成数量与直径,并诱导其向分泌性细胞分化.同时给予FGFs及其受体阻滞剂处理,FGFs诱导的集落增殖效应消失.LIF、ALK5-I或ROCK-I处理后,ABSCs形成的集落数量和直径也显著增加,并诱导其向纤毛上皮细胞或分泌性细胞分化.结论 小鼠ABSCs不依赖成纤维细胞,但共培养能增强其增殖和分化能力;内皮细胞对ABSCs增殖和分化能力促进作用有限;FGFs促进ABSCs的增殖和分化,其效应能被其受体阻滞剂消除;LIF、ALK5-I或ROCK-I亦促进ABSCs的增殖和分化.研究结果将为小鼠ABSCs的生物学特性及其影响因素的深入研究奠定基础,为未来ABSCs修复性治疗相关疾病和损伤提供了实验学依据.     

抗AFP单克隆抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制及应用

甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)是一种癌胚抗原,在胚胎期由肝细胞和卵黄囊合成并出现在胎儿血清中,出生后血清中AFP的含量很低,正常人血清中的AFP浓度在20μg/L以下。当机体发生原发性肝癌时,肝癌细胞可合成和分泌大量AFP,在癌组织提取液、血清及腹水中均可检出高水平的AFP,现已作为肝癌的标志物,广泛应用于肝癌的普查、诊断、     

急性心肌梗塞再灌注治疗后心肌无复流现象的动态观察--相干对比成像技术的临床应用研究

目的应用相干对比成像(CCI)技术行静脉心肌声学造影(MCE),评价AMI再灌注治疗后心肌微循环灌注的动态变化.方法32例AMI在梗塞相关动脉(IRA)成功重建后12小时、1周、2周和4周行MCE,评价梗塞区心肌灌注和功能.结果IRA重建后12小时,11例表现心肌无复流现象(MCES为2分或3分,标疉β值为0.23±0.17),室壁运动消失(WMS在3分以上),其中10例术后4周随访心肌灌注和运动均无显著变化(P＞0.05),1例心肌灌注与室壁运动明显改善(P＜0.05);21例心肌灌注良好(MCES为1分,标化的A*β值为0.89±0.10),绝大部分室壁运动无明显异常(WMS≤2分),术后4周随访心肌灌注和运动均无显著变化(P＞0.05).结论AMI成功再灌注治疗后早期,约1/3患者可表现为低或无现象,4周随访大多数无改善.     

多形核白细胞在体外循环后急性肺损伤中的作用

目的研究多形核白细胞(PMN)在体外循环后急性肺损伤发生发展过程中的作用。方法选择24例瓣膜置换术患者,其中男4例,女20例;年龄29～69岁,体重37～73kg。采用支气管肺泡灌洗(bronchoalveolarlavage,BAL)方法收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluild,BALF),同时采集血标本,以观察体外循环心内直视手术后PMN的激活与肺损伤情况。结果本组病例术中转流时间(106.46±33.58)min,阻断时间(77.58±28.02)min,呼吸机辅助时间(24.17±30.90)h。术后患者氧合指数降低明显(P=0.000)。术后周围血WBC计数明显升高(P=0.000)。术后BALF中的白细胞总数(P=0.000)与白细胞分类中PMN所占的比率也明显增加(P=0.000)。BALF与血浆的中性粒细胞弹性蛋白酶(NeutrophilElastase,NE)和MPO水平明显升高(P=0.000)。术后血浆中的血管性假血友病因子(VonWillebrandFactor,vWF)水平也明显升高(P=0.000)。而且,患者血浆与BALF中的NE与患者同时期的氧合指数呈负相关关系,血浆中的vWF水平与患者的氧合指数也呈负相关关系。结论体外循环后周围血液及肺泡中的PMN募集、激活并大量释放蛋白酶,是体外循环后肺损伤的重要机制。     

2009-2015年河北省儿童流感病原学分析

目的 分析2009-2015年河北省儿童流感样病例(influenza like illness,ILI)流感病原学特征,为河北省儿童流感的防控提供科学依据.方法 采集河北省流感监测哨点医院就诊的儿童ILI咽拭子标本,采用RT-PCR方法进行流感病毒核酸检测.结果 共采集咽拭子标本28 932例,检出流感病毒阳性标本5057例(阳性率为17.48％).按年度分析,6个年度流感病毒检出率依次为32.56％、9.53％、15.07％、12.29％、11.32％和18.81％,2009-2010年度显著高于其他年度(P＜0.05).以B型流感病毒为优势型的年度有两个(2011-2012、2013-2014年度),其他年度为甲型H1N1和季节性H3N2流感交替流行或共同流行.年龄分布中,1岁以下年龄组检出率最低(7.74％),7-14岁年龄组最高(26.01％),检出率随年龄的增大而增高.季节分布显示,河北省流感为冬春季流行,呈单峰型,A型流行形成的峰时间靠前.结论 2009-2015年度河北省儿童中存在甲型H1N1、B型和季节性H3N2流感病毒的流行,不同年度有不同的流行优势型和流行特征.     

胰腺实性假乳头状瘤超声表现1例

患者女,12岁.主因无明显诱因的阵发性上腹痛3d入院.超声检查:胰体尾部可见大小约为5.2cm×5.1cm的形态尚规则的略低回声团块,边界清晰可见包膜,内部回声欠均匀,彩色多普勒显示周边可见少许血流信号,团块紧邻增大的脾脏(图1).