EZH2基因与卵巢癌细胞系A2780化疗敏感性的关系

目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因与卵巢癌细胞A2780顺铂敏感性的关系.方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞A2780-shEZH2,实时定量PCR(Rea...     

EZH2基因沉默逆转卵巢上皮性癌细胞顺铂耐药性的实验研究

EZH2基因是果蝇zeste基因增强子的人同源物,作为一种转录抑制因子参与基因沉默,在细胞生长调控中发挥着重要作用~([1]).研究发现,EZH2基因可以抑制相关癌基因的活性,在前列腺癌~([2])、乳腺癌~([3])和胰腺癌~([4])等多种恶性肿瘤组织中高表达,促进肿瘤生长、侵袭和转移.然而迄今为止,对EZH2基因参与卵巢上皮性癌(卵巢癌)化疗耐药及其机制的研究鲜见报道.     

抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性影响的研究

目的:研究抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性的影响。方法:用浓度递增法建立卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;Stem-loop real-time PCR技术检测A2780/Taxol及亲本细胞A2780中hsa-miR-27a表达水平;利用脂质体Lipofectamine2000将化学合成的miR-27a抑制物及阴性对照(Negative Control,NC)转染A2780/Taxol细胞;分别用Real-time PCR和蛋白印迹法技术检测MDR1mRNA和P-glyco-protein(P-gp)蛋白表达;MTT检测A2780/Taxol对紫杉醇敏感性的变化;流式细胞术检测细胞内P-gp荧光底物罗丹明123(Rh-123)的荧光强度。结果:(1)成功建立了卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;(2)miR-27a在A2780/Taxol细胞中高表达,与A2780细胞相比,表达增高2.2倍。(3)P-gp蛋白在A2780/Taxol细胞中高表达,在A2780细胞中未检测出其表达;(4)转染miR-27a抑制物后,A2780/Taxol细胞的MDR1mRNA和P-gp表达下降,与转染NC组相比,P-gp表达降低36%;对紫杉醇的敏感性增加,IC50为0.53μmol/L,与转染NC组IC506.8μmol/L相比,有明显差异;(5)流式细胞仪结果显示,细胞内Rh-123荧光强度在转染抑制物的A2780/Taxol细胞为5.10±0.35,与A2780/Taxol细胞的2.95±0.39和转染NC的A2780/Taxol细胞的3.30±0.45相比,差异均有统计学意义。结论:hsa-miR-27a在卵巢癌耐紫杉醇A2780/Taxol细胞中高表达,可能通过间接调节P-gp的表达和功能,参与耐药。抑制miR-27a表达后,可以增加A2780/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性,部分逆转耐药。     

Egr1信号途径参与NDRG1表达调节的机制研究

目的:研究人宫颈癌细胞中早期生长反应基因1(Egr1)信号途径参与N-myc下游调节基因1(NDRG1)表达调节的机制。方法:以人宫颈癌细胞株SiHa为研究对象,利用siRNA干扰技术使Egr1基因沉默,用RT-PCR和W estern blot检测转染前后Egr1表达的变化。通过RT-PCR和W estern blot检测细胞在低氧条件下,以及转染siRNA-Egr1后在低氧或低氧模拟物(DFX)条件下,Egr1与NDRG1表达的变化。结果:siRNA能有效地抑制Egr1基因表达(P0.001)。低氧条件下,Egr1、NDRG1的蛋白水平均明显升高(P0.001)。转染siRNA-Egr1 48h后,细胞在低氧条件下作用1h,Egr1 mRNA表达显著下降(P0.05)。细胞转染siRNA-Egr1 48h后,在低氧及DFX条件下作用24h,结果显示DFX使NDRG1 mRNA的表达显著高于低氧条件(P0.05)。同时也显示siRNA-Egr1能够使NDRG1 mRNA水平明显减少(P0.05)。结论:体内环境因素如低氧、DFX等上调NDRG1基因的表达,通过Egr1信号途径参与NDRG1在宫颈癌细胞中表达的调节。     

气道廓清术在脑卒中相关性肺炎气管切开患者康复中的应用

目的 观察气道廓清技术对脑卒中相关性肺炎气管切开患者的临床疗效.方法 将60例脑卒中相关性肺炎气管切开患者按随机数字表法分为观察组和对照组.观察组在常规治疗的基础上给予气道廓清技术排痰,对照组给予常规治疗和传统体位引流排痰.记录患者体温、外周血白细胞计数、排痰量、气体交换指数及胸部X线片浸润情况,比较组间临床肺部感染评...     

草酸艾司西酞普兰联合重复经颅磁刺激治疗卒中后抑郁效果探究

目的 以草酸艾司西酞普兰联合重复经颅磁刺激对脑卒中后抑郁患者进行治疗,探究实际疗效。方法 选取本院2018年3月-2022年3月收治的68例卒中后抑郁患者作为研究对象,以随机数字表法分成研究组与对照组,每组各34例。对照组以草酸艾司西酞普兰治疗,研究组联合重复经颅磁刺激治疗,对两组患者HAMD评分、治疗总有效率与不良反应发生率进行比较。结果 治疗前,两组HAMD评分比较差异无统计学意义(t=0.313,P=0.755);治疗4周后,两组HAMD评分显著下降,但研究组HAMD评分相对于对照组更低(t=5.426,P<0.001)。研究组总有效率(94.12%)要显著高于对照组(76.47%)(χ²=4.221,P=0.040)。研究组不良反应发生率(14.71%)与对照组(8.82%)对比,差异无统计学意义(χ²=0.567,P=0.452)。结论 在卒中后抑郁治疗方面,草酸艾司西酞普兰联合重复经颅磁刺激治疗可产生协同作用,获得较好的效果,不良反应较相对较少,值得推广应用。     

血清HK10、PIVKA-Ⅱ水平诊断卵巢癌及预测患者生存价值

目的：研究血清拮抗剂-Ⅱ诱导的蛋白质(PIVKA-Ⅱ)、激肽释放酶10(HK10)水平对卵巢癌的诊断及生存预测。方法：采用前瞻性研究,以本院2013年1月-2018年1月诊断进行治疗的卵巢癌患者156例作为研究对象,治疗后3年随访,生存101例、死亡55例;健康体检志愿者156例为对照组,比较两组及生存和死亡患者的血清HK10、PIVKA-Ⅱ水平并分析对卵巢癌的诊断及对患者生存预测效能。结果：观察组HK10(2.74±1.37 mg/L)、PIVKA-Ⅱ(35.21±1.95 U/L)水平均高于对照组(0.70±0.51 mg/L、18.60±1.96 U/L),生存患者HK10(2.10±0.77 mg/L)、PIVKA-Ⅱ(33.76±1.17 U/L)低于死亡患者(3.92±1.98 mg/L、37.87±1.01 U/L)(均P=0.000);HK10联合PIVKA-Ⅱ检测,诊断卵巢癌的曲线下面积为0.950,诊断临界值HK10、PIVKA-Ⅱ分别为2.74mg/L,35.20U/L;预测生存的曲线下面积为0.996,预测临界值HK10、PIVKA-Ⅱ分别为3.94mg/L,3...     

间歇口腔胃管营养法结合经络穴位电刺激治疗吞咽障碍

目的:探讨间歇口腔胃管营养法结合经络穴位电刺激对脑卒中吞咽障碍的疗效。方法:脑卒中吞咽障碍患者80例,随机分为观察组和对照组各40例,2组均给予常规吞咽训练,观察组加用间歇口腔胃管营养法,并配合经络穴位电刺激。治疗后评定临床疗效及肺部感染发生率。结果:治疗6周后,观察组临床总有效率明显高于对照组(80%、45%,P<0.01),误吸性肺炎发生率显著低于对照组(5%、25%,P<0.01)。结论:间歇口腔胃管营养法结合经络穴位电刺激能明显改善脑卒中后吞咽困难患者的吞咽功能,显著降低误吸性肺炎的发生率。     

卵巢上皮性肿瘤组织整合素β4表达水平的检测

目的：检测整合素β4在卵巢上皮性肿瘤中的表达水平,分析其作为卵巢肿瘤早期诊断靶标的可能性.方法：取不同病理类型卵巢上皮性肿瘤组织,Westemblot检测整合素G4的表达水平。结果：相对于正常组织,整合素β4在良性卵巢上皮性肿瘤组织中升高的程度较为轻微,在该组织交界性肿瘤中的升高较良性的明显,在恶性肿瘤中的表达上调十分明显;随着分化水平的下降,整合素β4的表达相应增高;在临床早期,整合素β4的表达就有所增高,而在有转移的临床分期中,整合素β4的表达显著增加。结论：整合素β4的表达程度可以作为该类恶性肿瘤的早期诊断标志物;表达水平可以作为临床预后诊断的分子候选物。