铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制研究进展

铜绿假单胞菌是重要的医院感染条件致病菌，能通过不同的机制产生药物耐受性，特别是多重耐药和对临床上应用最广的β-内酰胺类抗生素的耐药，给临床抗感染治疗带来极大困难，从分子水平研究阐明其对β-内酰胺类抗生素的耐药机制具有重要临床意义。     

大鼠γ-干扰素诱导蛋白-10在大肠杆菌中的表达和鉴定

目的 原核表达大鼠γ-干扰素诱导蛋白-10,并对其进行鉴定。方法 从大鼠脾细胞中提取RNA,用RT-PCR方法得到IP-10cDNA,双酶切将其插入pET-32a（＋）载体中。重组质粒pET-32a（＋）-IP-10经酶切、PCR及测序鉴定后转化大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。结果 所获得的大鼠IP-10克隆,经测序与GenBank报道的完全一致。所表达的产物经SDS-PAGE和Westem blot分析获得证实。结论 已成功构建原核表达载体pET-32a（＋）-IP-10,并使其在大肠杆菌中获得了融合表达。     

防御素抗HIV作用

防御素（defensins）是小分子阳离子抗菌肽,它们既是先天性免疫的效应分子,也参与获得性免疫的调节。大量的研究发现防御素能有效抑制HIV,本文将扼要综述防御素的结构和来源分布,并重点讨论防御素抗HIV的效能及其机制。     

对《中医正骨》所刊锁骨骨折内固定研究文献的分析

近年来,对锁骨骨折的内固定指征有所放宽.但是在实际应用中,究竟采用何种内固定材料以及具体的内固定方式最好,多有争议.     

米非司酮配伍甲氨喋呤治疗异位妊娠疗效观察

目的:评价米非司酮配伍甲氨喋呤(MTX)治疗异位妊娠的疗效。方法:符合保守治疗宫外孕者86例,随机分为治疗组46例、对照组40例。治疗组:肌肉注射甲氨喋呤50 mg,同时服用米非司酮50 mg/次,2次/d,总量550 mg。对照组:甲氨喋呤肌肉注射50 mg/m2,1周后血β-HCG无下降趋势者,再注射1次。结果:治疗组血β-HCG转阴、包块缩小及阴道出血停止的时间明显早于对照组(P<0.05)。结论:米非司酮配伍甲氨喋呤治疗异位妊娠可提高疗效,为异位妊娠保守治疗的有效方法之一。     

靶向ST6Gal Ⅰ的siRNA与ASO联合应用对宫颈癌细胞转移能力的影响

目的 探讨人α2,6-唾液酸转移酶(ST6Gal Ⅰ)小分子干扰RNA(siRNA)及其与反义寡核苷酸(ASO)联合应用对ST6Gal Ⅰ高表达的宫颈癌HeLa细胞的粘附和侵袭力的影响.方法 设计并合成靶向ST6Gal Ⅰ的siRNA及ASO,用脂质体Lipofectamine 2000包裹后转染HeLa细胞.实验分为空白对照组、脂质体对照组、siRNA组、ASO1组(与siRNA相同靶点)、ASO2组(与siRNA不同靶点)、siRNA ASO1组及siRNA ASO2组,用RT-PCR测定细胞中ST6Gal Ⅰ mRNA水平,流式细胞仪检测细胞表面α2,6-唾液酸含量,分别用CytoMatrixTM细胞粘附试剂盒及细胞侵袭分析试剂盒,检测细胞对细胞外基质(ECM)的粘附与侵袭力.结果 转染后各实验组细胞的ST6Gal Ⅰ mRNA表达水平、细胞表面α2,6-唾液酸含量及细胞对ECM的粘附与侵袭力均低于空白对照组及脂质体对照组(P均＜0.05),以siRNA ASO2组调低作用最明显.其中siRNA组细胞的ST6Gal Ⅰ mRNA表达水平(0.55±0.08)、细胞表面α2,6-唾液酸含量(39.27±9.23)分别与siRNA ASO1组(0.54±0.09、38.27±7.74)比较,差异均无统计学意义,与siRNA ASO2组(0.33±0.09、9.10±0.40)比较,差异有统计学意义(P均＜0.05);siRNA组与siRNA ASO1组比较,细胞对ECM的粘附与侵袭力差异均无统计学意义,而siRNA ASO2组细胞对ECM的粘附与侵袭力较siRNA组降低(P均＜0.05).结论 化学合成的靶向ST6Gal Ⅰ的siRNA能够下调HeLa细胞中ST6Gal Ⅰ基因的表达,继而降低细胞对ECM的粘附和侵袭力,并且与不同靶点的ASO联合应用具有相加和协同效应.     

非分型流感嗜血杆菌Haps蛋白的分离纯化

目的优化非分型流感嗜血杆菌Haps蛋白质片段的分离纯化方法。方法采用盐析、透析脱盐、超滤浓缩、弱阳离子交换柱Hitrap CM Sepharose Fast Flow层析纯化HapS蛋白,优化Hap。蛋白质片段的洗脱条件,包括pH值和离子强度,测定各洗脱液样品在280nm波长处的光吸收值（D280）,用折线图显示,SDS-PAGE电泳检测分布图中处于峰值的样品,观察目的蛋白条带的出现。结果弱阳离子交换柱Hitrap CM Sepharose Fast Flow层析纯化HapS蛋白,缓冲液l洗脱液的D280分布为基线,缓冲液2洗脱液的D280分布折线图中有峰值出现,但峰有拖尾,SDS-PAGE电泳检测该洗脱峰主要为低分子量的蛋白条带;五种不同离子强度的缓冲液3洗脱液在100mmol／L NaCl离子强度时,D280的分布折线图显示有较高洗脱峰出现,SDS-PAGE电泳检测该洗脱峰有较明显的110000D的目的条带,其余离子强度下均未见明显洗脱峰出现。结论Sepharose CM FF层析柱分离纯化Haps蛋白质片段时,不同pH值的缓冲液对目的蛋白的洗脱没有明显影响,而主要影响杂蛋白的洗脱;100mmol／L NaCl离子强度的缓冲液3洗脱液获得较好的洗脱效果。     

医学微生物学引导式教学模式的应用研究

目的:改革医学微生物学教学方法,培养医学生的科研素质和创新能力。方法:在医学微生物学的理论教学实践中,采用引导式教学模式,以培养学生创新能力为中心进行教学改革。结果:引导式教学模式的应用,取得了良好的教学效果。结论:引导式教学模式是教学改革的成功尝试,启发培养了学生的多向思维能力、创新能力和开拓精神,是提高医学微生物学教学质量的重要手段。     

分泌抗人聚白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其应用

作者成功地获得了持续稳定分泌抗人聚白蛋白(PHSA)的单克隆抗体(McAb)细胞株。用~(125)I标记该McAb,采用敏感性高的RIA法对HBsAg阳性和阴性血清中老化的白蛋白分子进行了探测。结果发现PHSA主要存在于HBsAg阳性血清中。此工作为乙型肝炎病毒(HBV)与循环中PHSA结合的可能性提供了实验依据。     

小分子RNA研究进展及其应用价值

小分子RNA即19～24个核苷酸（nt）的非编码RNA（non—codingRNAs）,由于其具有干扰靶基因表达作用,所以又称为干扰RNA（interferingRNAs,iRNAs）。iRNAs的发现是近年在生物学领域研究中的一个重大突破,因为小分子RNA可以以序列特异性的方式抑制靶基因表达,并引起了生命科学研究者的广泛关注。小分子RNA的发现有助于我们了解人体的生理功能和病理机制,提高我们在实验研究中调控蛋白质表达的能力,并有可能迅速成为基因治疗的一种新药。小分子RNA包括了小干扰RNA（smallinterferingRNA,siRNA）和微小RNA（microRNA,miRNA）两类核酸分子,本文对小分子RNA研究进展及其潜在应用价值做一述评。