黄芪和白芍复方制剂干预痛经模型鼠后血液流变学指标变化

目的:观察黄芪和白芍复方制剂治疗痛经的效果,分析其药理作用。方法:实验于2002-01/2003-12在河北省医学科学院药物研究室完成。选用雌性SD大鼠110只,雌性昆明种小鼠50只。实验共分3个层次:①实验1:选用雌性大鼠50只,随机分为5组:痛经模型组,田七痛经胶囊组,黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组,每组10只。实验前大鼠背部皮下注射己烯雌酚4d。在注射己烯雌酚的当天开始给药。田七痛经胶囊组按1.6g/kg剂量灌胃田七痛经胶囊混悬液[主要成分为三七、延胡索、小茴香等,广州敬修堂(药业)股份有限公司生产,批号:01220619,0.4g/粒],黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组按1.6,0.8,0.4g/kg剂量灌胃黄芪和白芍复方制剂混悬液(由黄芪、白芍、益母草、熟地、当归等9味中药组成,由河北省医学科学院药物研究室研制,批号:200207102,0.5g/粒,胶囊内容物为棕黑色粉末,每克相当于原生药5.74g。实验时将黄芪和白芍复方制剂内容物置于乳钵中研细加水研匀,制成不同浓度的混悬液),痛经模型组灌胃等容积生理盐水。注射己烯雌酚第4天及给药后1h,每只大鼠腹腔注射催产素2U,观察30min内引起扭体反应次,而后用放免法测定血浆β-内啡肽水平。②实验2:将雌性小鼠50只随机分为5组:痛经模型组,田七痛经胶囊组,黄芪和白芍复方制剂高、中、低3个剂量组,每组10只。小鼠皮下注射己烯雌酚混悬液,连续9d,从第10天起,每天上午皮下注射己烯雌酚,下午灌胃给药,田七痛经胶囊组按2.0g/kg剂量灌胃田七痛经胶囊混悬液,黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组按2.0,1.0,0.5g/kg剂量灌胃黄芪和白芍复方制剂混悬液,痛经模型组灌胃等容积生理盐水。连续3d,于末次给药后30min腹腔注射催产素,记录注射后30min内扭体反应次数。③实验3:将其余健康雌性大鼠60只随机分为6组:对照组[灌胃等容量自来水灌胃20mL/(kg·d)],血瘀模型组[蒸馏水灌胃20mL/(kg·d)],复方丹参片组[灌胃复方丹参片(主要成分为丹参、三七、冰片,石家庄神威药业股份有限公司生产,批号:034070,0.25g/片)混悬液含生药4g/(kg·d)],黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组[按1.6,0.8,0.4g/kg剂量灌胃黄芪和白芍复方制剂混悬液20mL/(kg·d)],每组10只。每组均连续7d。第8天对照组皮下注射生理盐水,其他各组均皮下注射盐酸肾上腺素(8μg/kg)2次,2次间隔2h,第2次给药后立即将动物置冰水中5min,处置后24h。采用锥板旋转法测定全血黏度和全血还原黏度,利用上述参数计算红细胞指数。④计量资料差异比较采用t检验。结果:复方丹参片组及黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组进行血液流变学指标检测时采血失败分别为1,1,2,2只,进入结果分析分别为9,9,8,8只,其余各组无脱失值。①实验1:田七痛经胶囊组和黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组大鼠30min扭体次数明显少于痛经模型组(P<0.05～0.01)。黄芪和白芍复方制剂高剂量组大鼠血浆中β-内啡肽水平明显高于痛经模型组(P<0.05)。②实验2:黄芪和白芍复方制剂对痛经小鼠模型30min扭体次数的影响田七痛经胶囊组和黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组催产素所致小鼠30min扭体次数明显少于痛经模型组(P<0.05～0.01)。③实验3:黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组和复方丹参片组全血黏度均明显低于血瘀模型组(P<0.05～0.01);复方丹参片组和黄芪和白芍复方制剂中剂量组红细胞阳性指数明显低于模型组(P<0.01,0.05)。结论:①黄芪和白芍复方制剂对痛经有治疗作用,其作用发挥可能与改善体内内源性疼痛物质β-内啡肽含量有关。②黄芪和白芍复方制剂还可通过改善血液流变学指标,起到活血化瘀作用,从而治疗痛经。     

L-精氨酸对局灶性脑缺血损伤大鼠脑组织TNF-α、IL-1β及神经元凋亡的影响

目的探讨L-精氨酸对局灶性脑缺血损伤大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）及神经元凋亡的影响。方法健康雄性SD大鼠30只,体重250～280g,随机分为3组（n=10）：假手术组（SH组）、缺血组（IS组）和L-广精氨酸治疗组（L-arg组）。L-arg组腹腔注射L-精氨酸500mg/kg,每日2次,连续3d;IS组给予等容量的生理盐水;2组均采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血损伤模型。将大鼠断头取脑,采用免疫组化法检测脑组织TNF-α表达,放免法检测脑组织IL-1β含量,流式细胞仪测定神经元凋亡情况、Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达计算Bcl-2/Bax蛋白比值。结果与SH组比较,IS组脑组织TNF-α表达、IL-1β含量、神经元凋亡率升高,Bax蛋白表达上调,Bcl-2/Bax蛋白比值降低（P〈0.01）;与IS组比较,L-arg组脑组织TNF-α表达、IL-1β含量、神经元凋亡率降低,Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,Bcl-2/Bax蛋白比值升高（P〈0.01）。结论L-精氨酸通过抑制脑组织TNF-α和IL-1β水平的升高,上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,调节Bcl-2/Bax蛋白比值平衡,抑制神经元凋亡,从而对脑缺血大鼠神经元产生一定程度的保护作用。     

科研新手之心得体会

工欲善其事必先利其器。从事学术科研也与从事其他职业一样,如果能找到正确的方法,一定可以使科研工作事半功倍。我从2002年开始接触科研和实验室工作,时至现在也只能算是个科研新手。现整理这些年个人的少许切身体会和心得,与大家共同分享。淤善于积累,大量阅读文献。科研的灵魂是创新,如何创新很大程度上来源于     

Poly（I∶C）诱导小鼠细胞因子风暴模型的建立及青蒿琥酯、清肺排毒汤的干预作用

目的 观察青蒿琥酯及清肺排毒汤对病毒模拟物Poly（I∶C）诱导的小鼠细胞因子风暴（CS）动物模型的干预作用。方法 采用84只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为7组，每组12只，除空白组12只外，余下的72只以15 mg·kg^-1剂量尾静脉注射Poly（I∶C）攻击建立CS模型小鼠，并给予青蒿琥酯低、中、高剂量组（10、20、40 mg·kg^-1）、清肺排毒汤组（2.4 g·kg^-1）、地塞米松组（10 mg·kg^-1）。6 h后取肺组织、支气管肺泡灌洗液（BALF），脾脏、肺脏及外周血。计算肺脏、脾脏指数；检测BALF中炎症细胞数量；苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肺组织病理变化；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测BALF中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6含量；流式细胞术检测并分析BALF及外周血中免疫细胞表达情况。结果 对小鼠肺脏、脾脏指数分析显示，与空白组比较，模型组肺脏、脾脏指数均有不同程度升高（P<0.05）；与模型组比较，青蒿琥酯各处理组明显降低脾脏指数（P<0.05），青蒿琥酯低剂量组明显降低肺脏指数（P<0.05），清肺排毒汤对肺脏、脾脏指数均明显降低（P<0.05）。ELISA结果显示，与空白组比较，模型组小鼠除TNF-α外，IFN-γ、IL-1β、IL-6含量均明显升高（P<0.05）；与模型组比较，青蒿琥酯低剂量组及清肺排毒汤组明显降低TNF-α含量（P<0.05），且各药物处理组均明显降低IFN-γ、IL-1β、IL-6含量（P<0.05）。对BALF中炎性细胞计数发现模型组细胞数量呈下降趋势，除地塞米松组外各给药组处理后细胞数量均明显升高（P<0.05）。流式细胞术检测后发现，与空白组比较，模型组外周血中CD3数量明显降低（P<0.05），Ly-6G、F4/80数量明显升高（P<0.05），模型组BALF中CD45、CD3、F4/80数量明显降低（P<0.05），Ly-6G数量明显上升（P<0.05）；与模型组比较，外周血免疫细胞检测中发现青蒿琥酯处理组和清肺排毒汤组明显升高CD45含量（P<0.05），降低Ly-6G、F4/80数量（P<0.05），BALF免疫细胞检测中发现可升高CD45、F4/80含量（P<0.05），降低Ly-6G数量（P<0.05）。结论 青蒿琥酯及清肺排毒汤对Poly（I∶C）诱导的小鼠CS有较好的保护作用，其作用机理与有效干预机体免疫细胞紊乱有关。     

Apelin-13促进骨髓间充质干细胞增殖

目的 探讨apelin-13是否促进骨髓间充质干细胞增殖。 方法 分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,用不同浓度apelin-13（0.1 μmol/L、1.0 μmol/L和10.0 μmol/L）处理细胞24 h后,分别用流式细胞术和噻唑蓝比色法（MTT）,观察apelin-13对骨髓间充质干细胞增殖的影响。 结果 倒置显微镜下观察到apelin-13促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖,流式细胞术检测结果表明,apelin-13刺激后处于S期和G2-M期的细胞数目显著增加,G0-G1期的细胞数目显著减少。进一步MTT结果表明,apelin-13处理后大鼠骨髓间充质干细胞增殖显著增加,并呈浓度依赖性。 结论 apelin-13能促进骨髓间充质干细胞增殖。     

龙牙楤木化学成分与药理作用研究进展

龙牙楤木是五加科楤木属植物，在我国有着悠久的使用历史，广泛用于治疗肝炎、风湿性关节炎等多种疾病。龙牙楤木的化学成分多样，包括三萜皂苷、多糖类、甾体及其苷类、生物碱、氨基酸、挥发油等，其中研究最多的是皂苷类和多糖类成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、保护心脏、保肝护肝等作用。笔者综述了龙牙楤木的化学成分及药理作用研究进展，并对该植物的潜在药用价值和研究不足之处展开讨论，以期为其进一步开发利用提供参考依据。