癌胚抗原启动子正调控白细胞介素-15表达质粒载体的构建及其在肿瘤细胞中的靶向表达

目的 构建癌胚抗原(CEA)启动子正调控人白细胞介素-15(IL-15)真核表达质粒载体,观察其在肿瘤细胞内的靶向性表达.方法 基因克隆技术构建巨细胞病毒(CMV)启动子正调控质粒pHi2-IL-15-CMV-TAT和CEA启动子正调控质粒pHi2-IL-15-CEA-TAT;再以IL-2信号肽(SP)置换IL-15SP构建质粒pHi2-IL-2SP-IL-15-CMV-TAT和pHi2-IL-2SP-IL-15-CEA-TAT;阳离子脂质体介导法体外转染CEA阳性结肠癌SW480细胞和CEA阴性乳腺癌MCF-7细胞,酶联免疫吸附方法(ELISA)检测转染后48h细胞培养上清液中IL-15表达.结果 质粒均成功构建.ELISA检测结果:(1)以IL-2SP置换IL-15SP可提高转染细胞的IL-15表达4.8～5.9倍(P＜0.01);(2)转染SW480细胞后,CEA启动子正调控的两质粒(pHi2-IL-15-CEA-TAT和pHi2-IL-2SP-IL-15-CEA-TAT)与相对应的CMV启动子正调控质粒(pHi2-IL-15-CMV-TAT和pHi2-IL-2SP-IL-15-CMV-TAT)之间的IL-15表达无统计学意义(P＞0.05),其效应等同于CMV启动子正调控质粒;(3)转染MCF-7细胞后,CEA启动子正调控的两质粒IL-15表达显著低于CMV启动子正调控质粒(P＜0.01).结论 CEA启动子正调控IL-15质粒,尤其是质粒pHi2-IL-2SP-IL-15-CEA-TAT在CEA阳性细胞中高表达IL-15,CEA阴性细胞中低表达IL-15,实现了IL-15基因高效、靶向性表达.     

腹部外科血瘀证患者免疫功能状态的研究

应用流式细胞术测定53例不同类型的腹部外科血瘀证患者的外周血T淋巴细胞亚群,并应用免疫法检测血清免疫球蛋白和补体水平,观察部分患者的外周血T细胞超微结构。结果表明:气滞血瘀型患者的免疫功能正常;湿热血瘀型患者的细胞免疫和体液免疫的免疫应答活跃;气虚血瘀T_(?)型患者细胞明显降低,T细胞显著升高,抗体水平亦降低明显,说明此型患者存在明显的细胞免疫及体液免疫功能抑制现象。电镜观察还发现气虚血瘀患者的T淋巴细胞有较明显的超微结构异常改变。     

Alterations of the percentage of lymphocytes in patients with acute myocardial infarction and clinical evaluation.

In order to investigate the human immunological response to acute myocardial infarction (AMI), lymphocyte cells of peripheral vein blood withdrawn from patients with AMI were continuously and quantitatively assayed by flow cytometry method (FCM). The correlation between the alterations of immunological function and clinical course was analyzed. MATERIAL AND METHODS Thirty-one samples were collected from peripheral vein blood of hospitalized patients with AMI in the author's institution. The patients were aged from 39 to 81 years, ( 26 men and 5 women ). Samples withdrawn from 14 healthy adults served as normal control.     

原发性肝癌Angiopoietin-2的表达与血管生成的关系

[目的]观察Angiopoietin-2在原发性肝癌中的表达情况及其与微血管密度(Micro-vessel density,MVD)的关系.[方法]免疫组化S-P法检测30例原发性肝癌组织的表达情况,并应用免疫组化S-P法检测An-giopoietin-2、CD34的表达,以CD34标记肿瘤微血管,并在显微镜下计数微血管密度(MVD).[结果]癌旁组织中无Angiopoietin-2表达,Angiopoietin-2在原发性肝癌表达阳性率为67%,其表达与原发性肝癌恶性程度、淋巴结转移相关(P＜0.01),而与侵犯深度组织学类型无关(P＞0.05);CD-34的表达与原发性肝癌的侵食性相关,而与有无包膜无关.Angiopoietin-2的表达与MVD呈正相关,Angiopoietin-2阳性表达组中MVD明显高于Angiopoietin-2阴性表达组(P＜0.01).[结论]Angiopoietin-2在原发性肝癌中高表达,在原发性肝癌的发生、发展中起重要的作用,与原发性肝癌的分化程度、侵袭性高低、血管生成有关.     

C-FLIP基因在甲基硫代腺苷诱导结肠癌RKO细胞凋亡过程中的作用

目的：探讨甲基硫代腺苷（MTA）对结肠癌RKO细胞凋亡的作用及其相关机制的研究.方法：采用Hoechst33258染色技术检测MTA对结肠癌RKO细胞凋亡的影响,并采用Realtime PCR和Western Blot的方法在mRNA和蛋白水平研究cFLIP基因在MTA诱导的结肠癌RKO细胞凋亡过程中的作用.结果：MTA对结肠癌RKO细胞具有明显促进凋亡的作用.在这一过程中,cFLIP基因在mRNA和蛋白水平上均出现明显下调情况.结论：MTA对RKO细胞具有明显凋亡诱导作用,cFLIP基因的下调可能起到了重要的作用.     

成人小肠胃黏膜异位症3例报道

胃黏膜异位症是胚胎发育期部分胃黏膜组织异位于邻近或远处器官所致[1],可发生在消化道的任何部位,其中以食管、美克尔憩室、肠道重复畸形囊肿多见[1,2],除先天性畸形以外,距Treitz韧带以下小肠胃黏膜异位症少见[3]。我院2007年10月～2008年4月收治3例,报告如下。     

大鼠原位肝移植模型建立和受体甲状腺激素水平变化的研究

目的：为研究肝移植术后甲状腺激素水平变化,探讨其与肝移植预后的关系。方法：选用Lewis大鼠建立原位肝移植模型,对移植前后甲状腺激素水平变化进行序贯检测研究。本实验共进行大鼠原位肝移植91次,定向手术成功率92．7％,分别于手术后1,3,7,14,28d经眶静脉丛采血测量甲状腺相关激素T3,T4,rT3,TSH的血清浓度,比较肝移植手术前后甲状腺激素谱的变化。结果：同系移植肝脏可获得长期存活（＞28d),在肝移植后甲状腺激素水平发生变化,T3水平在术后第三天升高,随后下降,早期死亡组动物的甲状腺激素水平与长期存活组相比明显不同,T3,T4水平下降,而rT3水平则上升。结论：建立稳定肝移植模型是关键,大鼠肝移植术后血清甲状腺激素水平较术前有明显变化。提示肝移植手术影响甲状腺激素代谢,早期死亡组血清甲状腺激素水平变化与长期存活组比较有明显不同,肝移植术后甲状腺激素水平变化的监测,可能是一项判断预后的指标。     

胃癌细胞CA242表达与肿瘤播散潜力关系研究

目的：探讨CA242在胃癌细胞中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化染色技术及流式细胞计检测30例胃癌患者胃癌细胞CA242的表达情况并与临床病理结果进行比较。结果：胃癌组织CA242表达阳性率较癌远切端相对正常组织高(P＜0．01)。CA242表达与肿瘤组织分化程度无关。CA242表达阳性率在伴有淋巴结转移的胃癌为77．27％，高于无淋巴结转移者(37．50％，P＜0．05)。结论：CA242阳性表达与淋巴结转移具有相关性，CA242可作为判断胃癌播散潜力的生物学指标。     

胃癌组织氨基酸代谢的改变

目的：探讨胃癌组织中氨基酸 谱的变化规律。方法：使用氨基酸分析仪检测胃癌组织中20种游离氨基酸的含量。结果：50例胃癌组织中Ⅰ、Ⅱ期绝大部分游离氨基酸（FAA）含量无明显改变；Ⅲ、Ⅳ期有特征性改变，总氨基酸（TAA）及数种必需氨基酸（EAA）和非必需氨基酸（NEAA）含量增加（P＜0．01－0．05）。各病理分期间两两比较，Ⅲ、Ⅳ期较Ⅰ、Ⅱ期有多种氨基酸含量的增加（P＜0．05）。结论：Ⅲ、Ⅳ期患胃癌组织中游离氨基酸谱的代谢变化可为氨基酸失衡疗法提供临床依据。