黄芪甲苷对大鼠和兔发育毒性的评价

目的应用标准致畸试验方法,评价黄芪甲苷对SD大鼠和新西兰兔的母体毒性,胚胎毒性、胎儿毒性和致畸性方法分别采用SD大鼠和新西兰兔作为实验动物,实验设低中、高3个剂量组。兔致畸敏感期试验剂量为0.5,1.0和2.mg/kg。大鼠致畸敏感期试验剂量为1.0,0.5和0.25mg/kg体重,两试验同时设阴性对照。孕兔每组12只以上,孕鼠每组2只,观察母体孕期增重,黄体数、着床率、活胎率、死胎率和吸收胎率,胎儿身长、体重和胎盘重,胎儿外观和内脏畸形、以及骨骼的发育情况。结果黄芪甲苷在0.5,1.0和2.0mg/kg剂量下对新西兰兔无母体毒性,表现为孕期增重与对照组比较差异无统计学意义。受试剂量下的黄体数和着床率与对照组比较差异无统计学意义。但各受试剂量下活胎率与对照组比较有差异具有统计学意义,表明黄芪甲苷在受试剂量下具有一定的胚胎毒性。在受试剂量下胎兔体重、身长和胎盘重与对照组比较差异无统计学意义;受试剂量下胎兔胸骨发育情况以及其他骨骼发育情况与对照组比较差异均无统计学意义。各剂量组未观察到明显的骨骼畸形、外观和内脏畸形,表明黄芪甲苷无致畸作用。黄芪甲苷在1.0mg/kg剂量时母鼠增重、活胎率和死胎率与对照组比较差异具有统计学意义,表明在1.0mg/kg剂量时对SD大鼠有一定的母体毒性和胚胎毒性。胎儿身长在受试剂量下与对照组比较差异无统计学意义;在0.25mg/kg和0.5mg/kg剂量组胎鼠体重和胎盘重略低于对照组,但无明显剂量-反应趋势;对胎鼠性别比无明显影响;受试剂量下胎鼠胸骨以及其他骨骼发育情况与对照组比较差异均无统计学意义。未见明显的大体畸形、骨骼畸形和内脏畸形,表明黄芪甲苷无致畸作用。结论黄芪甲苷在1.0mg/kg剂量时对SD大鼠有母体毒性,但对新西兰兔无母体毒性。对新西兰兔和SD大鼠均无致畸性。但在1.0mg/kg以上剂量对新西兰兔和SD大鼠均有一定的胚胎毒性。     

移行上皮反应基因在小鼠主要器官发育过程中的表达

目的:研究移行上皮反应基因(TERE1)在小鼠胚胎着床后至新生儿断乳期主要器官中的正常表达规律.方法:于E11 d～E18 d、P0 d、P7 d、P14 d、P21 d,取得小鼠胚胎脑、眼、心、肺、胃、肝、肢、肾(肾自E13 d开始),利用实时荧光定量PCR方法检测TERE1基因在各器官的表达丰度.结果:除仅在P21 d肢未检出外,TERE1基因在小鼠主要器官的发育过程中均有表达,且在脑、眼、心、肺、胃、肝、肾的表达水平较高;该基因的表达除在小鼠肾发育过程中呈升高趋势外,在脑、眼、心、肺、胃、肝、肢的表达均呈波动性.结论:TERE1基因在小鼠器官发育过程中呈广泛表达,且表达丰度不同,表达模式也不同.     

左卡尼汀联合复方玄驹胶囊治疗特发性精液质量异常患者疗效及安全性的随机对照研究

特发性精液质量异常是导致男性不孕的常见病因之一,严重影响男性身体健康以及家庭幸福[1].临床采用左卡尼汀等西药进行治疗,能够缓解临床症状,但治疗效果仍有待进一步提高[2].中医研究认为,特发性精液质量异常属于"精冷"、"精寒"范畴,多为肾精亏虚型,患者肾虚气血不足,瘀阻精道,肝郁气滞,导致性欲淡漠,精清精冷,应以补肾填...     

肾结石患者肾乳头组织中LINC01197及相关因子的表达研究

目的 探讨肾结石患者肾乳头组织中LINC01197、miR-516b-5p、SIRT3、FoxO1、Ac-FoxO1的表达特点及相关性。方法 选取2021年3月至2023年3月台州市第一人民医院收治的经皮肾镜碎石术治疗的30例草酸钙肾结石患者作为结石组,选取同期行根治性肾切除术（术后均由病理科诊断为透明细胞癌）的30例肾肿瘤患者作为对照组。结石组于术中直视下活检肾乳头及其周围间质组织,对照组收集远离肿瘤（2cm以上）的正常肾乳头组织样本,经病理学诊断后确诊为正常肾乳头组织。检测、比较两组肾乳头组织内LINC01197、miR-516b-5p、SIRT3、FoxO1、Ac-FoxO1表达水平,分析LINC01197、miR-516b-5p、SIRT3之间的相关性。结果 与对照组相比,结石组的肾乳头组织呈现LINC01197和SIRT3低表达、miR-516b-5p和Ac-FoxO1/FoxO1高表达,差异均有统计学意义（P<0.05）。Spearman相关性分析显示LINC01197与miR-516b-5p呈显著负相关（r=–0.751,P<0.05）,LINC01197与SIRT3呈显著正相关（r=0.813,P<0.05）,miR-516b-5p与SIRT3呈显著负相关（r=–0.528,P<0.05）。结论 LINC01197 在肾结石病理进展中具有潜在价值,其参与调节肾结石的发展可能跟miR-516b-5p、SIRT3、FoxO1 有关。     

兔着床后全胚胎培养方法的建立

目的:建立用于发育毒物研究和评价的兔着床后全胚胎培养方法。方法:取怀孕第9天(gestation day 9,GD9)的孕兔胚胎,参照Carney和Naya的方法,剥离胚胎后单瓶培养,体外培养48 h后将发育情况与文献报道的结果进行对比;并用5.0mmol/L的甲氧基乙酸(methoxyacetic acid,MAA)作为致畸阳性物对所建立的培养方法作进一步验证,采用Carney建立的兔胚胎形态评分系统进行评分。结果:本研究中23个GD9兔胚胎体外培养48 h后,存活率为100%,头长平均增长2.15倍,卵黄囊闭合和胚胎弯曲情况、体节数、自发畸形率、形态评分均数等指标均与文献报道的体外培养发育情况相近,5.0 mmol/L的MAA显示对兔胚胎有发育毒性,包括卵黄囊闭合减少、头部肿胀、面部器官缺失、体节紊乱、尾神经管闭合不全等,形态评分低于溶剂对照(P0.05)。结论:本研究所建立的兔着床后全胚胎培养方法是可行的。     

泌尿生殖道支原体感染480例耐药性分析

目的 了解本地区泌尿生殖道支原体感染及耐药状况，为临床治疗支原体感染选择抗生素提供参考依据。方法 中山市天洋电子生物有限公司生产的泌尿-生殖道支原体试剂盒，对480株泌尿生殖道支原体进行了3类12种抗生素的体外药物敏感试验。结果 从880例标本中检出解脲脲原体（Uu）389株，人型支原体（Mh）25株，解脲脲原体和人型支原体（Uu＋Mh）混合感染66株。结论 解脲脲原体（Uu）感染是本地区支原体感染的主要病原体；交沙霉素、阿奇霉素的耐药率很低，建议作为本地区治疗泌尿生殖道支原体感染的首选药物。     

卫生毒理学试题库建设的探索

考试是教学过程中的重要环节,是评价教学效果的主要手段.传统的人工命题方式存在诸多缺点和不足.通过初步探索,建设科学、实用、规范的卫生毒理学试题库,从而为深化课程教学改革、促进教考分离、提高教学质量提供更好的保障.     

基于LBL-CBL-PBL-RBL的新药研究与评价教学管理模式探讨

海军军医大学卫生毒理学教研室依托于国家GLP实验室,承担本科生新药研究与评价课程的教学工作。基于LBL-CBL-PBL-RBL的课程教学管理模式,充分利用各种方法的特点和优势,进行有机结合,以教学为基础、以新药案例为核心、以问题为导向及以资源为支撑,体现理论知识和实践技能并重发展,实现知识、能力和素质的有机融合,培养学生分析问题、解决复杂问题的综合能力。文章围绕强化教学过程管理,对新药研发与评价教学管理模式进行初步探讨。     

大鼠体外多器官细胞共培养模型的建立

目的 建立大鼠体外多器官细胞共培养方法.方法 采用胶原酶消化法、支气管灌洗分离法、两步消化法等方法分离大鼠原代肝细胞、肾细胞、心肌细胞、肺泡巨噬细胞和真皮成纤维细胞,用锥虫蓝染色法检测细胞分离成活率,用单层贴壁法分别培养;采用飞片法,将5种细胞的飞片放入同一培养皿,用体积分数为10%的FBS DMEM培养基培养7 d,用噻唑蓝(MTT)比色法比较原代细胞在单独培养和共培养时的生长情况.结果 建立的大鼠原代肝细胞、肾细胞、心肌细胞、肺泡巨噬细胞、真皮成纤维细胞分离方法稳定,细胞分离成活率均达90%,其中胶原酶消化法培养肝细胞的存活率达90.3%,两步消化法培养肾细胞的细胞存活率达91.9%,心肌细胞的胶原酶消化法细胞存活率达93.0%.3～15 d的心肌细胞搏动频率比较,差异无统计学意义(P>0.05),差速贴壁法培养的肺泡巨噬细胞存活率可达90.8%,以胶原酶消化法培养的原代真皮细胞存活率达92.7%,细胞生长状态良好.5种原代细胞的多器官细胞共培养结果显示,共培养时细胞生长增殖情况良好,单独培养与共培养细胞生长曲线基本重合.结论 所建立的大鼠多器官细胞共培养方法是成功的.     

TERE1基因在小鼠胚胎双前肢正常发育和异常发生中的表达

[目的]观察移行上皮反应基因（TERE1）在小鼠胚胎双前肢正常发育和异常发生中的表达,探讨TERE1在短肢发生中的作用。[方法]ICR小鼠受孕后,将其随机分为实验、对照两组,各64只。于孕第10天（GD10）,经口灌胃一次给予实验组孕鼠80 mg/kg的全反式视黄酸（atRA）、对照组孕鼠给予等体积的大豆油,并分别于GD11～GD18取两组胎鼠的双前肢。于GD12取下小鼠胚胎双前肢,以atRA诱导,培养72 h后收获肢。利用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测TERE1在各样本中的表达情况。[结果]在整体动物试验中,atRA可诱致小鼠胚胎明显的短肢畸形;在体外试验中,atRA可诱致小鼠胚胎前肢多种骨骼发育异常。TERE1在正常、异常肢及培养肢芽中均有表达。在正常和异常肢中,TERE1的表达模式一致;除GD15外,实验肢中TERE1的表达均低于相同时点正常肢的表达水平。在体外培养肢,各组的表达量随培养时间的延长而增加。实验组在培养24 h,atRA各剂量组的表达量均低于对照组（P〈0.05）;培养48 h和72 h,在2.5×10-6 mol/L～1.0×10-5 mol/L剂量范围有随剂量增加表达量增加的趋势,但在高剂量组（2.0×10-5 mol/L）表达又下降。[结论]TERE1与小鼠胚胎前肢的发育过程有关,atRA在诱致小鼠前肢异常发生中可引起TERE1 mRNA的表达改变。