多发性抽动症患儿血清S100B蛋白、NGF水平及其意义

目的 探讨多发性抽动症（Tourette’s syndrome,TS）患儿血清S100钙结合蛋白B(S100 Calcium Binding Protein B,S100B)、神经生长因子（nerve growth factor,NGF）水平及意义。方法 本研究观察对象为2022年1月～2023年1月96例TS患儿以及50例相匹配的健康儿童,分别设为TS组、对照组。检测两组受试者血清S100B、NGF水平,比较不同严重程度TS患儿血清S100B、NGF水平以及血清指标水平与耶鲁抽动症整体严重度量表（Yale global tic severity scale,YGTSS）的相关性。结果 TS组血清S100B、NGF水平显著高于对照组（P<0.05）;重度组血清S100B、NGF水平以及YGTSS评分显著高于中度组以及轻度组,中度组显著高于轻度组（P<0.05）;血清S100B、NGF水平与YGTSS评分具有正相关关系（P<0.05）。结论 TS患儿血清S100B、NGF水平存在明显升高的情况,且S100B、NGF水平上升与抽动症严重程度密切相关。     

阿德福韦酯片治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎多中心临床研究

目的评价国产阿德福韦酯片治疗成人HBeAg阳性慢性乙型肝炎的有效性和安全性。方法采用多中心、开放试验方法,入选1930例患者服用阿德福韦酯片10mg／d。随访观察采用标准操作规程（SOP）,观察12周、24周、36周、52周的生化、病毒学指标及不良反应。结果1930例患者治疗12周、24周、36周、52周,HBVDNA阴转率分别为16．42％、28．55％、37．25％、43．32％,ALT复常率分别为29．69％、49．02％、56．42％、62．95％。治疗24周、52周HBeAg阴转率分别为12．59％、19．38％。随着疗程延长,HBVDNA阴转率、ALT复常率、HBeAg阴转率越高。治疗52周时耐药率为0．17％。不良反应率0．72％,极少数病例出现尿常规轻微异常,未发现肾功或生殖系统受损。结论国产阿德福韦酯片治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎具有良好的有效性及安全性。     

诺如病毒衣壳蛋白重组人3型腺病毒的构建

目的 制备表达诺如病毒衣壳蛋白的重组人3型腺病毒.方法 将诺如病毒衣壳蛋白基因(Noro-orf2)克隆到腺病毒穿梭载体pBSE3CMV-egfp上,与线性化人3型腺病毒骨架质粒pBRAdv3共电转化感受态大肠杆菌BJ5183,使其在细菌内发生同源重组,带Noro-orf2基因的表达框置换腺病毒E3区,PCR及酶切筛选得到重组腺病毒质粒,将重组腺病毒质粒转染Hep-2细胞进行包装,获得感染性的重组腺病毒粒子,免疫组化分析重组腺病毒中诺如病毒衣壳蛋白的表达.结果 同源重组后经酶切和PCR鉴定证明插入Noro-orf2基因的重组腺病毒质粒pBRAdv3E3dNor成功构建,并经转染包装得到高滴度的重组腺病毒Adv3E3dNor,免疫组化证明诺如病毒衣壳蛋白得到表达.结论 成功构建表达诺如病毒衣壳蛋白的重组3型腺病毒Adv3E3dNor,为研制人3型腺病毒-诺如病毒双价疫苗奠定了基础.     

广州检出星状病毒4型的全基因组序列测定及分析

目的 探讨广州地区儿童感染的星状病毒基因组分子结构特点和基因型.方法 参考GenBank上的星状病毒基因组设计分段扩增引物,进行RT-PCR分段扩增星状病毒基因组,克隆于T载体上,序列测定,用Clustal W和DNAStar软件分析基因组序列.结果 星状病毒HASTVgz01全基因组为6721 bp,提交到GenBank上的序列号为DQ344027,其中5＇端非编码区（5＇UTR）长82bp,3＇端非编码区末端长81 bp,病毒基因组编码区全长6558个核苷酸,分别编码ORF1a、ORF1b、ORF2,ORF1a基因长2763 bp（83～2845 nt）,ORF1b基因长1557bp（2785～4332 nt）,其中ORF1a、ORF1b两基因有71个核苷酸的重叠区;ORF2全长2316 nt,位于基因组中4325～6640 nt.ASTVgz01与GenBank中8种基因型星状病毒的ORF2基因氨基酸序列同源性比较发现,HASTVgz01与4型的同源性为93%,其他的同源性在61%～70%之间.结论 广州地区儿童腹泻感染的星状病毒HASTVgz01全基因组为6721bp,GenBank序列号为DQ344027,HASTVgz01与4型星状病毒的ORF2基因氨基酸序列比较同源性为最高,确认HASTVgz01是4型星状病毒.     

25例肾病综合征患儿调节性T细胞水平变化及意义

目的：观察肾病综合征（NS）患儿外周血中调节性T细胞（Treg）、淋巴细胞各亚群的变化,探讨其在疾病发生和发展中的作用。方法选取20例健康儿童作为对照组,25例患儿作为肾病综合征组。采用流式细胞术对两组儿童进行外周血Treg、淋巴细胞各亚群检测。结果与正常对照组比较,NS组的外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-／low Treg细胞、CD3^＋CD4^＋辅助性T细胞、CD19^＋B细胞表达均明显降低（P＜0．05）;而CD3^＋CD8^＋抑制性T 细胞表达明显升高（P＜0．05）;肾病综合征组患儿的 CD16^＋CD56^＋NK细胞表达降低,但与对照组相比无统计学差异（P＞0．05）。结论淋巴细胞免疫功能的紊乱,特别是Treg的表达及其功能的改变,参与了肾病综合征的发病,其检测可有助于肾病综合征的诊治。     

烟曲霉的微管蛋白基因鉴定及唑类抗真菌药物的耐药性研究

目的建立烟曲霉临床分离菌株的微管蛋白基因鉴定方法,并分析烟曲霉对唑类抗真菌药物的耐药性。方法对表型鉴定为烟曲霉的菌株,采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)方法提取烟曲霉菌株DNA,并采用对微管蛋白基因进行PCR扩增和测序的方法对烟曲霉菌株进行分子生物学鉴定,采用琼脂稀释法检测烟曲霉菌株对伊曲康唑和伏立康唑的耐药性。结果 91株临床分离株表型鉴定为烟曲霉,这些菌株在35℃和48℃生长。其中88株(96.70%)经微管蛋白基因鉴定为烟曲霉。87株烟曲霉菌株对4μg/mL伊曲康唑和1μg/mL伏立康唑敏感,检出1株对4μg/mL伊曲康唑和1μg/mL伏立康唑耐药菌株。结论微管蛋白基因鉴定方法可以对烟曲霉进行准确鉴定。     

2011～2013年屎肠球菌和粪肠球菌的检出特点和药物敏感性分析

目的了解医院2011~2013年临床分离的426株屎肠球菌和221株粪肠球菌的耐药性。方法采用生物梅里埃公司的VITEK2COMPACT全自动微生物分析仪对菌株进行鉴定和抗菌药物敏感性测定。结果屎肠球菌与粪肠球菌检出数量的比值为1.93,该比值近3年呈现逐渐上升的趋势。屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素、利奈唑烷和替加环素的敏感率均为100.00%,屎肠球菌除对喹奴普汀/达福普汀和四环素的敏感率显著高于粪肠球菌外(P<0.05),对呋喃妥因、氨苄西林、青霉素G、莫西沙星、环丙沙星、左氧氟沙星的敏感率均显著低于粪肠球菌(P<0.05)。结论肠球菌的检出呈现向屎肠球菌偏移的现象,且该现象呈现扩大的趋势。屎肠球菌和粪肠球菌对抗菌药物的敏感性存在较大差异,临床应根据两种细菌各自的特征结合种间耐药性差异制订治疗方案,目前万古霉素、利奈唑烷、替加环素为治疗屎肠球菌和粪肠球菌感染的最有效的抗菌药物。     

1414株铜绿假单胞菌临床分布与耐药性分析

目的：了解铜绿假单胞菌（PAE）感染的临床分布及耐药情况。方法采用VITEK2-compact检测系统对分离菌株进行鉴定和药敏试验检测,回顾性分析 PAE菌株临床分布特点及耐药性。结果共检出1414株PA E ,以痰液检出最多[1126株（79．63％）],其次为伤口分泌物[88株（6．22％）]。PA E对头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、哌拉西林／他唑巴坦、亚胺培南的耐药率分别为31．61％、22．98％、33．73％、14．07％、31．40％、31．61％、34．23％,对氨苄西林、呋喃妥因、头孢替坦、头孢唑啉、氨苄西林／舒巴坦、复方磺胺甲噁唑均高度耐药,耐药率大于95．00％。2012年妥布霉素、哌拉西林／他唑巴坦耐药率较2011年明显下降（ P＜0．05）。结论氨基糖苷类、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林／他唑巴坦、亚胺培南可作为治疗PA E感染的经验用药。     

肠道病毒71型的快速纯化及其鉴定

目的 建立一种简单、快速有效的从细胞培养物中纯化肠道病毒71(EV71)的方法.方法 EV71病毒在恒河猴肾细胞(LLC-MK2)中增殖后,将获得的细胞培养物经反复冻融、聚乙二醇6000沉淀、超速离心、氯化铯垫层超速离心的方法纯化病毒.用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(Western blot)和透射电镜(TEM)的方法对纯化病毒进行鉴定,并测定其感染性的滴度及回收率.结果 SDS-PAGE显示出3个条带,相对分子质量分别为3.6×103、3×103和2.6×103与EV71的VP1、VP2和VP3相符合.Western blot证实为EV71特异性条带.经磷钨酸负染后电镜观察,能看到典型病毒颗粒.采用终浓度为10%的聚乙二醇6000沉淀后的病毒的感染性回收率为82.0%,再经氯化铯垫层超速离心后浓缩病毒的感染性回性率为29.0%.结论 聚乙二醇6000沉淀结合氯化铯垫层超速离心的方法比氯化铯密度梯度区带离心方法更简便,易于操作,并且比单独聚乙二醇6000沉淀有更高的纯度,是一种简便、有效的病毒纯化方法.     

补肾调肝复方对老龄小鼠自由基代谢的影响

观察了临床对早衰面黑具有明显疗效的补肾调肝复方对老龄小鼠血清和皮肤自由基代谢的影响。结果表明，老龄小鼠血清和皮肤ＳＯＤ活性低于青年组（Ｐ＜０．０１）；补肾调肝复方能使老龄小鼠血清和皮肤ＳＯＤ活性升高，使ＭＤＡ下降，为该方在临床上所显示的养颜之功提供了现代科学实验依据。观察结果还表明：中剂量之补肾调肝复方在提高皮肤ＳＯＤ活性方面，其疗效优于传统补肾名方──金匮肾气丸（Ｐ＜０．０５）。