人脐带间充质干细胞培养上清对米非司酮处理的人子宫内膜基质细胞存活、凋亡和子宫内膜容受性的影响

目的：探讨人脐带间充质干细胞培养上清（hUCMSCs-Sup）对米非司酮（Ms）处理的人子宫内膜基质细胞（hEndoSCs）增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响,并阐明其可能的作用机制。方法：体外培养hEndoSCs,分为对照组和40、60、80及100μmol·L-1 Ms组,MTT法检测各组细胞存活率。hEndoSCs分为对照组、40μmol·L-1 Ms组和60μmol·L-1 Ms组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平并计算Bcl-2/Bax比值。hUCMSCs-Sup作用后,hEndoSCs分为对照组、Ms组、Ms+hUCMSCs-Sup组和Ms+hUCMSCs-Sup+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组,MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ（LC3B-Ⅱ）和微管相关蛋白1轻链3B-Ⅰ（LC3B-Ⅰ）蛋白表达水平并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值,实时荧光定量P...     

CEA迷你基因串联体肿瘤疫苗的构建

目的：构建人癌胚抗原（CEA）的迷你基因串联体肿瘤疫苗。方法：通过PCR从人基因组中得到一段来源于CEA的DNA序列,其中包含两个编码辅助性T细胞（HTL）表位的迷你基因,插入pGEM-T easy载体后测序,再将目的基因以同尾酶连接的方式顺次定向亚克隆到真核表达载体 pcDNA3.0中,得到三串联体,以 PCR和酶切方法鉴定构建的重组真核表达质粒 pc DNA3.0-triCEA_625-667。结果:PCR和酶切结果表明,获得的目的基因与所选的基因片段 CEA_625-667中包含的碱基数量吻合,且带有正确的酶切位点。测序结果与GenBank登记完 全相同。构建的重组真核表达质粒中含有正确编码的经同尾酶连接的目的基因片段三倍体。结论：成功地构建了含有CEA_625-667基因三串联体的DNA疫苗。     

基于乳酸代谢基因的肺腺癌预后模型的建立和评价

目的：探讨肺腺癌（LUAD）组织中乳酸代谢相关基因以及基于乳酸代谢基因构建LUAD预后评分模型,阐明其预测LUAD预后的能力。方法：采用癌症基因图谱（TCGA）数据库筛选LUAD相关乳酸代谢基因。采用单因素和多因素Cox回归及LASSO回归分析获得关键基因并构建LUAD的乳酸代谢评分模型,采用Kaplan-Meier生存分析和受试者工作特征（ROC）曲线对模型的预测能力进行验证,TIMER法评估该模型与患者临床特征和免疫细胞浸润丰度之间的关系。结果：成功筛选出16个乳酸代谢基因并构建评分模型;生存分析,低风险组患者的总生存时间（OS）明显高于高风险组（P<0.01）,且有较高的预测预后能力,ROC曲线下面积（AUC）均高于0.7;多因素Cox回归分析,23个乳酸代谢基因是LUAD患者的独立的预后基因;乳酸评分与B淋巴细胞（r=-0.326,P<0.001）、CD4 T淋巴细胞（r=-0.196,P<0.001）、CD8 T淋巴细胞（r=-0.094,P=0.036）、巨噬细胞（r=-0.198,P<0.001）和树突状细胞（r=-0.119,P=0.008）百分...     

远程医疗在炎症性肠病患者中应用效果的系统评价再评价

目的对远程医疗在炎症性肠病(IBD)患者中应用效果的系统评价/Meta分析进行再评价。方法计算机检索中国知网、万方数据库、维普网、中国生物医学文献数据库、PubMed、Cochrane Library、Embase、Web of Science、Ovid、CINAHL, 获取有关远程医疗应用于IBD患者中有效性的系统评价/Meta分析, 检索时限均为建库至2022年4月30日。由2名研究者独立筛选文献、提取资料后, 采用系统评价方法学质量评价工具(AMSTAR 2)对纳入文献进行方法学质量评价, 采用证据质量分级和推荐强度(GRADE)系统对纳入文献的主要结局指标进行证据质量分级, 采用描述性分析法对远程医疗在IBD患者中应用的有效性进行分析。结果共纳入6篇系统评价/Meta分析, AMSTAR 2评价结果显示, 1项研究的方法学质量为低, 5项研究的方法学质量为极低;未报告前期研究方案、全文阅读阶段中被排除研究的清单、纳入研究的资金来源及发表偏倚是导致各项研究方法学质量较低的主要原因。GRADE系统评价结果显示, 6项研究中共涉及10个结局指标进行Meta分析, 其中3个指标的GRA...     

急性淋巴细胞性白血病DNA含量与细胞增殖活性的临床意义

目的　探讨DNA检测对急性淋巴细胞性白血病 (ALL)诊断和治疗的临床意义。方法　应用流式细胞术检测了 35例急性淋巴细胞性白血病患者骨髓细胞DNA含量 (DI)、倍体和细胞增殖活性 (PI)。结果　ALL异倍体检出率为 5 1 4 % ( 18 35 ) ,其中亚二倍体 8例 ,超二倍体 10例 ;ALL组骨髓细胞G0 G1%高于对照组 (P <0 0 5 ) ,而S %、PI值明显低于对照组 (P <0 0 5 )。结论　DNA含量检测和倍体分析对急性淋巴细胞性白血病的诊断、治疗是很有价值的临床生物学指标 ,有助于白血病的准确、客观诊断和判断预后     

Survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞株SMMC-7721增殖的影响 

目的：应用反义寡核苷酸技术研究凋亡抑制蛋白Survivin反义寡核苷酸对肿瘤细胞增殖的影响。方法：根据Survivin序列合成其反义寡核苷酸序列（Survivin-ASODN）。培养肝癌细胞株SMMC-7721,用荧光素标记的Survivin-ASODN转染,并设立空白对照、空脂质体对照及正义寡核苷酸(SODN)对照组;用PCR方法检测Survivin基因表达水平;通过MTT方法分析Survivin-ASODN转染对肝癌细胞增殖的影响。结果：荧光素标记的Survivin-ASODN在SMMC-7721细胞中的转染率达到60%以上。SMMC-7721细胞分别用100、200、300、400和600 nmol/LASODN转染后,Survivin基因表达水平下降,细胞增殖抑制率24 h时分别为(3.87±1.67)%、(9.21±2.21)%、(15.21±3.18)%、(21.32±3.43)%和(32.62±3.74)%,而300 nmol/L-1 ASODN组48 h时细胞生长抑制率为(29.21±4.12)%,72 h时抑制率为(44.21±3.32)%;ASODN转染组细胞增殖抑制率与空白对照组、空脂质体组及SODN组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：Survivin-ASODN对细胞增殖有抑制作用,且呈现剂量依赖性;并且随着作用时间的延长,其抑制效果增强。     

人Ⅱ型胶原反应性T细胞克隆的建立及其抗原反应性

目的 建立人Ⅱ型胶原(CⅡ)反应性T细胞克隆，探讨其抗原反应性。方法从健康人外周血中建立一个与CⅡ反应的T细胞克隆(TC9)[^3H]，dThd掺入法检测克隆TC9对不同胶原的T细胞增殖反应及对人CⅡ的HLA—DR限制性，流式细胞术分析TC9的细胞表型。结果 建立了一个与CⅡ反应的HLA—DR7限制性TC9，TC9识别天然的与变性的人CⅡ，与人Ⅰ型胶原和牛Ⅱ型胶原存在交叉反应性；TC9存在CD4和CD29的阳性表达。结论 对CⅡ反应的TC9是一种有意义的自身抗原，这对进一步去构建与治疗相关的抑制肽或封闭抗体有重要作用。     

人Ⅱ型胶原反应性T细胞克隆、T细胞受体β链的作用

目的 探讨人Ⅱ型胶原(CⅡ)反应性T细胞克隆(TC9)、T细胞受体β链的作用。方法 通过切割和纯化人CⅡ片段以定位T细胞表位，分子克隆并测序TC9的TcRβ链基因。结果 与CⅡ反应的HLA—DR7限制性TC9其T细胞受体β链由Vβ6．7、Jβ2．3、Cβ2以及序列尚不清楚的D片段构成。结论 对CⅡ反应的TC9的TcRβ链是一种有意义的自身抗原，对进一步研究与CⅡ相关的类风湿性关节炎发病机制及特异性治疗有重要作用。     

IFN-γ对体外培养系统中IL-18诱导的肿瘤快速杀伤效应的影响

目的 :建立体外培养系统 ( CCs) ,应用 rh IL- 1 8在 CCs中诱导肿瘤快速杀伤效应 ,探讨IFN- γ在快速杀伤效应中的作用。方法 :采用 Stem Sep TM免疫磁性细胞分离法分离人外周血 NK细胞、T细胞及树突状细胞 ( DCs) ;流式细胞仪分析细胞表型 ;细胞毒实验检测杀伤活性 ;ELISA方法检测 IFN-γ的产生量。结果 :在 CCs中 ,rh IL- 1 8能单独诱导一种快速肿瘤杀伤作用 ,其杀伤作用随rh IL- 1 8浓度的增加而增高 ;rh IL- 1 8能够诱导 CCs产生 IFN-γ,并促进 m RNA的表达 ,但其作用不如 rh IL- 1 2 + rh IL- 1 8明显 ;抗 IFN- γ单抗对 rh IL- 1 8诱导的快速肿瘤杀伤效应无明显影响。结论 :IL- 1 8能够在 CCs中有效地诱导快速肿瘤杀伤效应 ,且这种杀伤效应不依赖 IFN- γ无关途径     

重组可溶性TRAIL的表达及其诱导A549和H460wt细胞凋亡

目的：获得人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rsTRAIL)蛋白,并探讨其应用于非小细胞肺癌(NSCLC）治疗的前景。方法：RT-PCR从外周血单核细胞(PBMCs)中获取目的基因片段,构建重组质粒PQE₃0-TRAIL并转化入大肠杆菌(E.coli)M₁5,IPTG诱导目的蛋白表达并经镍固定金属亲和层析纯化,MTT法检测细胞增殖情况,荧光显微镜观察H460^wt细胞的形态学改变,流式细胞仪检测其凋亡率。结果：获得与GenBank中报道一致的TRAIL基因片段。SDS-PAGE电泳和免疫印 迹分析显示,获得具有TRAIL免疫原性、相对分子质量约为21 000目的蛋白。Ni²⁺-NTA agarose纯化得到单一条带蛋白。rsTRAIL处理H460^wt细胞24 h后,细胞凋亡率为43.2％,顺铂可以增强rsTRAIL对A549细胞的杀伤作用。结论：获得了与天然TRAIL蛋白具有相同生物学活性的目的蛋白,该目的蛋白具有诱导NSCLC细胞凋亡的作用,联合顺铂能够增强rsTRAIL对NSCLC的杀伤作用。