外源P16基因对人类恶性脑胶质瘤细胞系活性的影响

①目的探讨5型腺病毒载体（Ad5）携带P16基因对恶性脑胶质瘤细胞系T／905生长状态的影响。②方法免疲组织化学法测定P16蛋白表达；甲基噻唑基四唑法测定恶性脑腱质瘤细胞系生长状态及感染病毒细胞克隆形成数的测定。③结果重组体腺病毒能介导P16外源基因在恶性脑肢质瘤细胞系TJ905细胞中阳性表达，6天时肿瘤经胞生长抑制率为98％，并且能显著地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力。④结论腺病毒介导P16基因能在肿瘤细胞中表达，并能明显抑制肿瘤细胞生长的状态。     

携带p16基因重组腺病毒的构建

目的 构建携带p16基因的重组腺病毒并对目的基因的表达进行研究。方法 lipofectamine介导质粒共转染293细胞构建重组腺病毒，病毒DNA提取及电泳，免疫组化检测p16蛋白表达。结果 构建的携带目的基因的重组体腺病毒，经扩增，纯化后，病毒滴度均达到了10^10 pfu/ml 以上。用Ad-LacZ为代表进行重组体腺病毒转导效率的检测，发现当MOI为625以上的感染强度时，就可使100％的体外培养的肿瘤细胞被转导。重组体腺病毒能介导p16外源基因在脑胶质瘤细胞系TJ899和TJ905细胞中表达。结论 腺病毒载体能携带p16基因在转导细胞中表达，并有很高的转导效率。