抗CCR7单链抗体的筛选及初步鉴定

目的从噬菌体抗体库中筛选抗CCR7单链融合抗体,并对其生物学特性进行初步检测。方法PCR检测大肠杆菌中ScFv基因插入率;琼脂糖凝胶电泳鉴定SfiI和NotI双酶切质粒的结果;分别以乳腺癌细胞及CCR7多肽片段为靶抗原对抗体库进行4轮和3轮筛选富集。将阳性克隆转化E.coliHB2151进行可溶表达。抗体亲和层析纯化后,经Western blot鉴定,通过ELISA法检测可溶性ScFv抗体的免疫活性。免疫细胞化学和放射免疫显像鉴定scFv抗体与乳腺癌细胞结合的特异性。结果ScFv基因插入率为90%(18/20),双酶切鉴定检测到目的条带。经4轮细胞筛选,3轮抗原筛选抗CCR7抗原的噬菌体抗体得到了明显富集,在E.coliHB2151中实现可溶表达。Western blot结果显示获得抗体相对分子质量为34ku左右。免疫细胞化学检测与放射免疫显像均证实单链抗体与表达CCR7的乳腺癌细胞MDA-MB-435s特异性结合。结论成功从噬菌体抗体库中筛选获得具有较高特异性的抗CCR7单链抗体。抗体在体内体外均与肿瘤细胞表达特异抗原结合。     

类风湿关节炎30例左心室功能组织多普勒成像分析

目的 应用组织多普勒成像技术评价类风湿性关节炎患者的左心室功能.方法 选取类风湿性关节炎患者30例,正常对照组30例,分别进行超声心动图检查,测量常规左心室功能指标(射血分数EF、左室短轴缩短率FS、二尖瓣口血流速度比值E/A),并采用组织多普勒成像技术测量二尖瓣环运动频谱收缩期Sa峰、舒张早期Ea峰、舒张晚期Aa峰的峰值速度,Ea/Aa比值及Tei指数.结果 类风湿关节炎组与正常对照组相比,两组之间常规左室功能指标(EF、FS、E/A)差异无统计学意义(P＞0.05),而类风湿关节炎组Ea/Aa比值减低、Tei指数增高,两组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 组织多普勒成像技术可早期评价类风湿关节炎患者的左心室功能受损情况,有助于临床及时制订相应的治疗措施,从而有效改善类风湿关节炎患者预后.     

尼美舒利对A549细胞株放疗增敏作用的观察

目的:观察尼美舒利(Nimesulide)作为环氧化酶2(Cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂对肺腺癌细胞株A549的放射增敏作用并探讨其作用机制.方法:对数期生长的A549细胞株,按照实验要求分为对照组、药物组、照射组及实验组,流式细胞仪检测各组肿瘤细胞凋亡率及对Bcl-2、Bax蛋白表达的影响;克隆形成实验检测放射增敏作用.结果:小剂量(75mmol/L)尼美舒利与射线照射联合应用能够上调Bax的蛋白表达,同时抑制Bcl-2蛋白表达,明显增加肿瘤细胞的凋亡,具有统计学差别.结论:COX-2抑制剂尼美舒利对人肺腺癌A549细胞株具有明显的放疗增敏作用.     

夜间高血压患者不同组合降压药物治疗的疗效

目的 观察夜间高血压(NH)患者不同组合降压药物的疗效,为临床工作提供参考。方法 采用横断面研究方法,收集2021年1月至2022年12月在湖南医药学院第一附属医院体检并经动态血压监测诊断为NH患者的临床资料。根据不同类型用药治疗情况,将NH患者分为单药组、双药联合组和多药联合组,单药组应用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)或钙拮抗剂,双药联合组应用ACEI/ARB联合钙拮抗剂,多药联合组应用ACEI/ARB、钙拮抗剂、β受体阻滞剂和利尿剂中的任意三种或四种联合。对三组患者的临床资料进行分析比较。结果 NH患者共829例,其中单药组294例占35.46%,双药联合组400例占48.25%,多药联合组135例占16.29%。经药物治疗6个月后,单药组、双药联合组及多药联合组患者的夜间收缩压(NSBP)、夜间舒张压(NDBP)较治疗前显著下降(P<0.05),其中双药联合组明显低于单药组和多药联合组,但单药组和多药联合组组间比较差异无统计学意义(P>0.05);NSBP和NDBP下降幅度双药联合组(21.75%,20.06%)显著大于单药组(1...     

心脏移植术后睡眠呼吸暂停类型变化及机制探讨(附1例报告)

目的探讨心脏移植术后患者伴发睡眠呼吸暂停综合征(SAS)的类型特点及发病机制。方法总结北京安贞医院2005年3月1例心脏移植患者合并睡眠呼吸暂停综合征的临床资料并进行文献复习。结果本例为男性,44岁,心脏移植术前诊断为中枢性睡眠呼吸暂停综合征(CSAS)。心脏移植术后,长期服用环孢菌素A和泼尼松,体重增加明显并出现类库欣征样体征,经多导睡眠监测图(PSG)检查,为重度阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS),移植前后呼吸暂停的类型发生转变,国外也有类似报道。结论睡眠呼吸暂停是心脏移植的潜在危险因素,移植前后呼吸暂停的类型会发生转变,可能与移植前后心功能状态改变有关。     

小鼠白介素-12真核表达质粒的构建及其表达

目的:构建能在真核细胞内稳定表达小鼠白介素-12(mIL-12)的质粒,为进一步研究mIL-12的免疫调节机制及其抗肿瘤作用奠定基础。方法:通过聚合酶链反应(PCR)扩增质粒pORF-mIL-12(Elas-ti),双酶切后将目的片段mIL-12连接到真核表达载体pcDNA3.1( )质粒上,mIL-12受pcDNA3.1( )中mCMV启动子驱动,将mIL-12全长转录至同一mRNA上,对重组质粒进行鉴定后将其转染小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)测其表达。结果:PCR成功扩增出mIL-12片段,PCR鉴定、酶切鉴定及测序均证实pcDNA3.1( )-mIL-12质粒构建成功,RT-PCR及ELISA证实重组质粒在mRNA及蛋白质水平均高表达mIL-12。结论:pcDNA3.1( )-mIL-12真核表达质粒构建成功并能在LLC细胞中稳定表达。     

利用文献解读进行基础医学专业《实验核医学》教学实践

为提高学生兴趣,培养学生科学素养,尝试将专业文献解读教学与《实验核医学》教材内容进行有机结合。通过学生对文献进行部分精读、整体汇报和教师点评总结完成文献解读,提高了学生对理论知识的理解,加深了学生对实验核医学技术的认识,拓展了学生的科学视野,培养了学生的科学素养。     

c-erbB2反义寡脱氧核苷酸联合紫杉醇对乳腺癌细胞SK-Br-3的抑制作用

目的：探讨以c-erbB2mRNA为靶点的反义寡脱氧核苷酸（ASODN）联合紫杉醇对乳腺癌SK—Br-3细胞的抑制作用．方法：实验分为7组：ASODN组,紫杉醇组,赫赛汀组,表阿霉素组,ASODN＋紫杉醇组,赫赛汀＋紫杉醇组,表阿霉素＋紫杉醇组．分别处理乳腺癌SK．Br-3细胞72h,MTF法测定细胞抑制率,中效原理判定药物联合应用的效果,WesternBlot检测细胞c—erbB2,Bcl-2蛋白表达水平．结果：各组中SK．Br．3细胞的抑制率均随药物浓度的增加而增大;紫杉醇的中效浓度紫杉醇组为0．14mol／L;ASODN＋紫杉醇组为0．07μmol／L,其合用指数（CI）〈1,为协同作用．ASODN＋紫杉醇组c-．erbB2,Bcl-2蛋白表达明显低于紫杉醇组,两组相比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）．结论：ASODN可明显增强紫杉醇对乳腺癌SK．Br．3细胞的抑制效应,可明显降低紫杉醇的用药量．     

高血压病的调查与社区卫生服务

高血压病是世界范围的卫生保健问题,为更好地加强社区卫生服务,重视对高血压病的防治,为此,本文对2353例慢性病患者做了与高血压病相关的调查,现初步报告如下. 1 资料与方法 1.1 调查对象我们在对重庆市渝中区5 657户14 457名居民的调查中,发现慢性病患者2 353例.其中男1 080例,女1273例,平均年龄66岁.